藿香正气水的微乳薄层色谱法鉴别

藿香正气水的微乳薄层色谱法鉴别

杨滢李婷许雪峰缑慧君任杰李帆

（汉中市食品药品检验检测中心陕西汉中723000）

【摘要】目的：建立藿香正气水微乳薄层色谱鉴别法。方法：以不同配比的微乳系统为展开剂，聚酰胺薄膜为固定相，同时鉴别藿香正气水中多个有效成分。结果：以85%微乳液[SDS-正丁醇-正庚烷-水，g/g]-甲酸（5:1）为展开剂，可同时对陈皮、白芷、厚朴酚、和厚朴酚进行分离鉴别。结论：建立了一种可以准确、快速、高效地同时分离和鉴别藿香正气水中陈皮、白芷、厚朴酚、和厚朴酚的方法。

【关键词】微乳体系；薄层色谱；藿香正气水；分离及鉴别

【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2018）18-0049-03

Microe-mulsionTLCidentificationofHuoxiangZhengqiLiquidYangYing,LiTing,XuXuefeng,GouHuijun,RenJie,LiFan.

HanzhongTestingAndInspectionCenterForFoodAndDrugControl,Hanzhong,Shannxi723000,China

【Abstract】ObjectiveToestablishamethodontheidentificationofflavoneinHouxiangZhengqiLiquidbymicroe-mulsionTLC.Methods4activeingredientsinHouxiangZhengqiLiquidwereseparatedandidentifiedsimultaneouslywiththemicroemulsionasmobilephasesandthepolyamidefilmasstationaryphase.ResultTheall-grassofCitriretoiculataepericarpium,rootofAngelicadahurica,magnolol,honokiolinHuoxiangZhengqiLiquidwereseparatedandidentifiedsimultaneouslywithmobilephaseofmicroemulsion:formicacid(5:1).TheconstituentofmicroemulsionwasSDS:butylalcohol:n-Heptane:water=4.05:9.45:1.50:85(g/g).ConclusionEstablishedanewaccuracy,quick,efficientmethodfortheseparationandidentificationofHuoxiangZhengqiLiquid.

【Keywords】Microemulsion;Thin-layerchromatography;HuoxiangZhengqiLiquid;Separationandidentification

藿香正气水为《中国药典》收录品种，由苍术、陈皮、厚朴（姜制）、白芷、茯苓、大腹皮、生半夏、甘草、广藿香油及紫苏叶油组成，具有解表化湿，理气和中的功效。主要用于外感风寒、内伤湿滞或夏伤暑湿所致的感冒，疗效确切，是一种常用药。其中主以藿香芳香化湿、力气和中兼能解表；辅以紫苏叶、白芷解表散寒而兼化湿滞，三药合用，其解表化湿之功，相得益彰；佐以厚朴、大腹皮去湿消滞，半夏、陈皮理气和胃、降逆止呕；又佐以茯苓、白术、甘草益气健脾，以助运化。

微乳液是在1958年由Schuiman等人提出的，上世纪90年代以来，微乳液得到了广泛的应用，尤其是在工业和技术领域[1]。微乳薄层色谱是利用微乳液作为展开剂，聚酰胺薄膜为固定相，对有效成分进行分离和鉴定。康纯等[2]在2000年，首次利用微乳薄层色谱法对13种黄连中的生物碱进行了分离和鉴定，并得到了满意的结果。近十几年，利用微乳薄层色谱法对中药材及中成药的有效成分进行分离和鉴定运用的较为广泛[3-7]，但对藿香正气水利用微乳薄层色谱法分析其有效成分尚未见报道。

本研究则采用微乳薄层色谱法，同时对中陈皮、白芷、厚朴酚、和厚朴酚4种成分进行分离和鉴定，为藿香正气水的有效成分分离鉴定提供准确快速的方法。

1.仪器与试药

1.1仪器

电子天平：JY10002，上海舜宁恒平；恒温水浴锅：国华电器有限公司；超声清洗仪：昆山市超声仪器有限公司；聚酰胺薄膜：浙江台州路桥生化材料厂点样针：上海安亭微量进样器厂；薄层层析展开缸：上海信谊仪器厂有限公司；暗箱式紫外分析仪：WFH-203B，杭州齐威仪器有限公司。

1.2试药

对照药材：陈皮对照药材（批号：120969-201510，中国药品生物制品鉴定所）、白芷对照药材（批号：120945-201510，中国药品生物制品鉴定所）；对照品：厚朴酚（批号：110729-201714，中国药品生物制品鉴定所）、和厚朴酚（批号：110730-201614，中国药品生物制品鉴定所）。藿香正气水（四川彩虹制药有限公司）购于四川。十二烷基硫酸钠（分析纯，成都市科龙化工试剂厂）、正丁醇、无水乙醇、甲醇、正庚烷、正己烷、丙酮及甲酸均为分析纯。

2.方法

2.1溶液制备

2.1.1展开剂配制分别取适量的十二烷基硫酸钠、助表面活性剂（正丁醇、乙醇、甲醇）、油相（正己烷、正庚烷）、水，混匀，放置24小时备用。临用加适量改良剂（丙酮、甲酸）制成展开剂。

2.1.2对照药材溶液取陈皮对照药材1g，置具塞锥形瓶中，加甲醇10ml，超声40min，滤过，滤液蒸干，加甲醇1ml，使溶解，即得陈皮对照药材溶液。另取白芷对照药材2g，同法制成白芷对照药材溶液。

2.1.3对照品溶液分别取厚朴酚、和厚朴酚适量，加甲醇分别制成1mg/ml、2mg/ml、的溶液，作为对照品溶液。

2.1.4供试品溶液取藿香正气水5ml，蒸干，加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液。

2.1.5阴性样品溶液按照藿香正气水的处方，分别取除去陈皮、白芷的其余药材，按照制备工艺制成相应的阴性样，按照2.1.4项下方法制备阴性样品溶液。

2.2微乳薄层色谱条件

分别取陈皮、白芷对照药材溶液，厚朴酚、和厚朴酚对照品溶液及供试品溶液各1μL，点于聚酰胺薄膜上。分别以不同微乳液展开剂，饱和30min，按上行法展开，展距15cm，取出晾干，置紫外光下（254nm、365nm）检视。

3.结果与讨论

3.1结果

3.1.1微乳液中水的考察在保证微乳液SDS：正丁醇：油相（27:63:10）保持不变的条件下，按照表1改变含水量，2.2项下方法进行展开。可得，随着水的质量比的增加（除水的质量比为90%时，展开剂分层外），展开得到的斑点数随之增加，且斑点清晰度也随之增加，展开所用时间在不断缩短。当含水量为85%时，斑点最为清晰，分离效果较好，展开时间最短。因此最终选择85%为最佳含水量。

3.1.2微乳液中油相的考察分别用正己烷、正庚烷为油相，进行微乳液中油相的考察对象。以含水量85%的微乳液作为展开比例，在对各个成分分离的效果显示，正庚烷的展开效果较正己烷理想，得到的斑点清晰，分离效果较好，展开时间较短。故选择正庚烷为微乳液油相。

3.1.3微乳液中助表面活性剂的考察选择甲醇、乙醇、正丁醇作为助表面活性剂，以75%、85%和90%为微乳液含水比例进行微乳液配置。最终只有当正丁醇作为助表面活性剂时，所配溶液未出现分层现象。故选择正丁醇为助表面活性剂。

3.1.4微乳液展开剂中改良剂的考察在最终选定的微乳液中分别加入丙酮、甲酸作为改良剂。分别以85%微乳液-改良剂进行展开。结果显示，加入丙酮容易出现分层现象，且对拖尾的改善效果不大；而甲酸消除拖尾的效果较好，且展开时间较短，故选择甲酸为微乳液展开剂中的改良剂。

3.2微乳薄层层析结果

以85%微乳液-甲酸（5:1）为展开系统按照2.2的方法展开，取出晾干后，置紫外灯（365nm）下检视，在供试品色谱和对照药材色谱相应位置上，陈皮显两个橙色及一个黄绿色斑点，白芷显一个橙色主斑点。置紫外灯（254nm）下检视，在供试品色谱和对照品色谱相应位置上，厚朴酚显紫色斑点，和厚朴酚显紫色斑点。阴性样在相应位置上均无干扰斑点。

图1藿香正气水主要成分鉴别微乳薄层色谱图

A：紫外365nm下检视；B：紫外254nm下检视；1.陈皮对照药材溶液；2.厚朴酚对照品溶液；3.和厚朴酚对照品溶液；4.供试品溶液；5.阴性样品；6.白芷对照药材溶液

3.3讨论

在中国药典中，采用经典薄层色谱法分别以6个不同的TLC方法鉴定陈皮、厚朴酚、和厚朴酚、白芷等11种对照药材及对照品，需进行较为复杂的前处理，且使用试剂种类较多。

本实验利用微乳薄层对藿香正气水中的有效成分进行分离鉴定，本实验对展开剂的各个组成成分进行考察，最终确定微乳液（SDS：正丁醇：正庚烷：水=4.05：9.45：1.05：85，g/g）-甲酸（5:1）为展开剂，能够同时分离和鉴定陈皮、白芷、厚朴酚及和厚朴酚4种有效成分。用此法可大大简化藿香正气水有效成分分离鉴别的步骤，缩短了实验时间，同时减少了试剂使用的种类和用量，减少实验成本，为中国药典完善提供方法的可能。

【参考文献】

[1]李瑞，梁杰.双生表面活性剂/醇/烷/水微乳液体系的研究[J].贵阳科学，2008，26(4):18-22.

[2]康纯，闻利毓，丁仲伯，等.微乳薄层色谱用于黄连类药物分离鉴定的研究[J].中国中药杂志，2000，25（5）:262-265.

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