应用ROC曲线评价GPI在类风湿关节

应用ROC曲线评价GPI在类风湿关节

李瑾余悠悠潘秀军

李瑾余悠悠潘秀军

(上海交通大学医学院附属新华医院检验科200433)

摘要：目的：探讨血清葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphateisomerase,GPI)抗原检测在类风湿关节炎(rheumatiodarthritis,RA)患者诊断中的意义。方法：

用酶联免疫吸附试验(LIESA)检测74例（其中类风湿关节炎病人37例，其他风湿病人17例,正常对照20例）患者血清中的GPI抗原的含量。同时还检测了其血

清中类风湿因子(rheumatiodfactor,RF)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体的含量。通过ROC曲线的绘制比较GPI抗原、抗CCP抗体、RF的检测对于RA诊断的敏感性

和特异性，并取理想临界值，同时分析3者的相关性。结果：GPI抗原在RA组中的阳性率为91.9%，并且56%的病人含量高于2mg/L，GPI的含量在RA组和

其他风湿病组的差异有统计学意义（P<0.01）；同时GPI、CCP、RF在RA组的检测结果明显高于其他风湿病组和正常对照组，但3者无相关性。结论：GPI

在RA组中有明显的升高并有很高的特异性，可作为RA诊断的新指标。如果结合抗CCP联合检测，将提高RA的早期诊断率。

关键词：ROC曲线葡萄糖-6-磷酸异构酶抗环瓜氨酸肽类风湿因子类风湿关节炎

类风湿关节炎是某种感染引起的自身免疫反应，多入侵关节，

后期发生软骨及骨的破坏，并可出现畸形及功能障碍。因早期临床

症状复杂多样且不典型，常给临床早期诊断带来困难而延误治疗，

从而给患者造成不良后果。目前，在RA诊断标准中，RF作为血清学

标准其敏感性高但特异性差。近年来，人们逐渐认识到CCP、GPI在

RA诊断中的重要性，特别是GPI作为一种自身免疫性抗原，与RA有

高度的相关性。本次研究检测患者血清中的GPI浓度，并通过与RF、

CCP比较，探讨3个指标在类风湿关节炎诊断中的价值。

一、资料与方法

二、研究对象：

选择2010年-2014年上海新华医院住院患者74例，包括RA患者37

例,其中男性7例，女性30例，年龄38-83岁。其诊断均符合1987年美

国风湿病协会修订的诊断分类标准；其他风湿病对照组17例，包括红

斑狼疮，干燥综合征，皮肌炎等。其中男性4例，女性13例，年龄31-89

岁。正常对照组20例，均来自体检人群，其中男性6例，女性14例，

年龄29-76岁。

三、标本采集：

所有研究对象均空腹静脉采血5ml，3000r/min离心10min，取血

清于-20℃冰箱保存，一次溶解后测定。

四、方法：

（1）GPI抗原测定：采用上海北加生化试剂有限公司生产的双

抗体夹心酶联免疫检测(LIESA)试剂盒，严格按照说明书进行操作。

结果>0.2mg/L为阳性。

（2）抗CCP抗体测定：采用上海富莼科芯生物技术有限公司生

产的LIESA试剂盒，结果>25RU/ml为阳性。

（3）RF检测：在IMMAGE800上检测，试剂为美国Beckman公司

配套的药盒。结果>20IU/ml为阳性。

五、统计学方法：

采用SPSS13.0软件进行分析GPI抗原、抗CCP抗体、RF对RA诊断

的灵敏度及特异度，同时取GPI的理想临界值。三者相关性使用

Spearman相关性分析，GPI的含量在RA组和其他风湿病组的差异有无

统计学意义使用卡方检测。

六、结果

七、GPI浓度

GPI在RA患者血清浓度为2.66±2.3mg/L，其他风湿病组为0.39

±0.34mg/L，正常对照组为0.12±0.13mg/L。GPI在RA组的检测结

果明显高于其他风湿病组和正常对照组，GPI的含量在RA组和其他

风湿病组的差异有统计学意义（P<0.01）见下表

2.2GPI、CCP、RF的相关性分析

RA组中同时检测了GPI、CCP、RF的浓度，GPI的平均值为2.66

±2.3mg/L，CCP的平均值为173.44±133.83RU/ml，RF的平均值为

166.99±134.16IU/ml。经Spearman相关性分析，GPI与CCP无相关

性（r=0.114,p=0.845），与RF也无相关（r=0.289,p=0.633）。

2.3GPI诊断RA的理想临界值的取值

假设将GPI作为诊断RA的指标，以不同浓度GPI值计算诊断的

灵敏度和特异度。以灵敏度为纵坐标，以1﹣特异度为横坐标，建立

ROC曲线（见下图）。选择最佳临界值为0.49mg/L，此时的灵敏度

为75%，特异度为91.9%。曲线下面积为0.883，面积>0.5，P值<0.001。

讨论

类风湿关节炎是一种常见以关节滑膜炎症为特征的慢性全身性

自身性疾病。患者体内存在多种自身抗原和相应的自身抗体，若未

经及时治疗，可出现严重的关节畸形，甚至致残，因此早期诊断和

治疗尤其重要。目前，类风湿因子（RF）是RA最经典的诊断指标，

是针对免疫球蛋白IgG稳定区的抗体，但RF可出现在正常人群及其

他自身免疫疾病中，故特异性不高。抗环瓜氨酸肽（CCP）是针对瓜

氨酸是RA血清抗filaggrin相关抗体识别的主要抗原决定簇的特异性

抗体，所以CCP的特异性更高。CCP在类风湿关节炎的诊断价值已

得到公认[1]GPI是一种多功能蛋白质，分子量60KD，也称磷酸葡萄糖异构

酶或磷酸己糖异构酶，存在于细胞质和细胞外液尤其是关节腔内。

1996年Kouskoff等发现KRN转基因小鼠与NOD小鼠进行杂交产生

的F1代小鼠中，所有转基因T细胞受体阳性的小鼠都发生了类似人

RA的多发性关节炎[2]，Matsumoto等在进一步的研究中发现其致病

性蛋白为GPI，并且在人类RA患者血清和关节液中也检测到了

GPI[3]。提示GPI在RA诊断中的重要性。也有文献报道[4]血清和关

节液中明显增高的GPI抗原本身可能与类风湿关节炎相关。

本次研究发现，RA患者组中的GPI含量显著高于其他风湿病组

和正常对照组（p<0.01），并通过绘制ROC曲线取得GPI理想临界

值为0.49mg/L，虽然此时的灵敏度为75%,低于CCP的78.9%和RF

的80.6%，但其特异度为91.9%，高于RF的77.3%接近CCP的92.3%。

所以有理由认为GPI抗原有可能成为RF、CCP以外的又一种RA标

记物[5]。同时进一步分析得出GPI与CCP、RF均无相关性，故GPI

又是一独立的指标。

为了弥补单一应用GPI、CCP、RF诊断RA的不足，本实验将特

异性较好的抗CCP抗体和GPI抗原作为联合检测组合，测得其灵敏

度为66.7%，特异度高达97.3%。说明抗CCP抗体和GPI抗原的联合

检测能大大提高RA的诊断效率，是RA早期诊断的理想指标。

综上所诉，GPI作为一种自身免疫性抗原，由于有较高的特异性，

所以对RA的诊断有重要价值，有可能成为一种新的标记物，而且

ELISA方法简单，结果可靠，适用于临床推广。

参考文献

[1]徐朝焰，赵素萍，吴美辉等，抗环瓜氨酸肽抗体对类风湿关

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[4]鲍春德,叶萍,陈晓翔,等.血清中6磷酸葡萄糖异构酶抗原

升高在类风湿关节炎中的意义探讨［J］中华风湿病学杂志,

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[5]林珺芳，陈君敏，郑玲，薛原，芮红兵[J]福建医科大学

报20102010年8月44卷4期