(徐州市食品药品监督检验中心江苏徐州221000)
【摘要】目的:分析高效液相色谱法测定甲巯咪唑片的含量。方法:选择流动相0.02mol/LKH2PO4(用H3PO4pH值调到3.2)-甲醇(87:13),色谱柱为KromasilC185μm,150mm×4.6mm,检测波长:254nm。结果:5~60μg/mL范围中的甲巯咪唑浓度和峰面积有很好的线性关系(r=1.0000),回收率达到99.6%,RSD=0.62%。结论:高效液相色谱法的准确、专属性、灵敏性比较强。
【关键词】含量测定;甲巯咪唑;高效液相色谱法
【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2018)16-0365-01
甲巯咪唑片临床上用于治疗甲状腺功能亢进,目前《中国药典》使用酸碱中和滴定法对其含量进行测定,这种检测方法准确度低,误差大,没有较强的专属性。本文主要探讨的方法是高效液相色谱法,这种方法具有较强的专属性、灵敏度、重现性。
1.仪器和试药
电子天平XS205DU(METTLER公司),甲巯咪唑对照品(中国食品药品检定研究院),样品均是市场销售品。
2.方法和结果
1.1色谱条件
流动相溶液是0.02mol/LKH2PO4(用H3PO4pH值调到3.2)-甲醇(87:13);色谱柱为KromasilC185μm,150mm×4.6mm,检测波长是254nm,流速1mL/min,进样量10μL。
1.2标准曲线制备
精密称取25mg甲巯咪唑对照品,置于100mL量瓶中,加水溶解并稀释至刻度。精密量取1.0,3.0,5.0,7.0,9.0,12.0mL,分别置于50mL量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀后,在按照上述色谱条件完成进样,并记录色谱图,将浓度作为横坐标,峰面积作为纵坐标建立线性回归方程,方程式A=44.53+4657.5C,r=1.0000(n=6)。5~60μg/mL甲巯咪唑浓度范围中和峰面积存在很好的线性关系。
1.3供试品制备溶液
将样品研细,精密称取细粉相当于甲巯咪唑5mg,置于200mL的量瓶中,加水适量,振摇30分钟使溶解,稀释至刻度,过滤,取滤液作为溶液供试品。按上述色谱条件进样,记录色谱图。根据处方选择合适比例的辅料,制作空白样品,按相同方法制备空白品溶液,并进样,在与对照品峰相同位置处没有色谱峰出现(见图1)。
图1高效液相色谱图
1.4精密度试验
选择对照品溶液25μg/mL浓度连续进行5次进样,进样量10μL。检测结果RSD=0.46%(n=5),精密度良好。
1.5稳定性试验
选择对照品25μg/mL浓度溶液,分别选择0,2,4,12,24h的进样,RSD=0.87%(n=5),稳定性良好。
1.6重现性试验
选择相同批次样品,按上述色谱条件以外标法测定其含量,连续测定5次,测得含量的RSD=0.53%。
1.7回收率试验
分别取相同浓度的样品供9份,加样回收法,高中低三种浓度加入甲巯咪唑对照品,根据上述检测方法,对回收率进行计算,相关结果,见表1。
表1比较回收率试验结果(n=9)
3.结论和讨论
3.1选择高效液相色谱法进行甲巯咪唑片含量测定,其测定结果比较准确,具有很强的专属性,同时重现性也比较好。
3.2在色谱条件的选择中,开始使用流动相是水和甲醇,但是因为色谱峰峰形不是很好,时间保留比较长,这里使用溶液0.02mol/LKH2PO4--甲醇(87:13)作为流动相后,色谱峰峰形表现比较好,塔板理论数比较高。
【参考文献】
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