康复训练对海马梗死大鼠学习记忆能力的影响

康复训练对海马梗死大鼠学习记忆能力的影响

初志和李雅君王芳

初志和1李雅君1王芳2（1河北迁安市中医院064400;2鄂州大学医学部436000）

【中图分类号】R493【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）20-0057-02

【摘要】目的研究康复训练对海马梗死大鼠学习记忆能力的影响。方法30只SD大鼠随机分模型组和康复组，每组15只。造模3天后给予不同处理，康复组进行水迷宫训练，模型组不给予任何处置。分别在造模前、造模后（训练前）、训练7天、14天、21天后进行检测学习记忆能力。结果海马梗死大鼠学习记忆能力较造模前明显下降（P<0.05），给予康复训练后学习记忆能力均有所恢复，且康复组各时间点均较模型组学习记忆恢复显著（P<0.05）。结论康复训练可促进学习记忆能力的恢复。

【关键词】康复训练大鼠脑梗死学习记忆

EffeCTofrehabilitationtrainingonlearningandmemoryabilityofrathippocampalinfarction

【Abstract】objective:TostudytheeffeCTofrehabilitationtrainingonlearningandmemoryfunctionofhippocampalinfarctionedrat.Methods:30SDratswerepidedinto2groupatrandom：modelgroupandrehabilitationgroups，eachgroup15only.Buildmode3daysgivedifferentprocessing,rehabilitationgroupsweregivenwatermazetraining,modelgroupdoesnotofferanydiSPOsal.Totestlearningandmemorycapacityatdifferenttimes:beforeandafterinfarction(trainingbefore),training7days,14days,21days.Results:Infarctionedratslearningandmemorycapacityweredeclinedobviously(P<0.05),Afterrehabilitationtraining，thelearningandmemorycapacityrestore.Comparetomodelgroup，learningandmemoryofrehabilitationgrouprestoresignificantlyatdifferenttimepoints.(P<0.05).Conclusion:rehabilitationtrainingcanpromotelearningandmemorycapacityrecovery

【Keywords】rehabilitationtrainingratscerebralinfarctionlearningandmemory

脑缺血是危害人类健康的多发病、常见病，脑缺血后学习记忆障碍是临床较常见的症状，也是一种严重的后遗症，严重影响了患者的生活质量；本实验采用光化学法制作大鼠海马梗死模型，然后给予康复训练，观察康复训练对大鼠的学习记忆能力的影响。

1实验材料

1.1实验动物健康清洁级雄性SD大鼠30只，体重200g～250g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供(许可证号scxk(京)2009—0001)。

1.2主要试剂虎红（四氯四碘荧光素纳）粉剂，国药集团化学试剂有限公司。

1.3主要仪器冷光源由本实验室与哈尔滨工业大学联合研制，激光为发光光源，滤去全部紫外线与红外线，投射出单一绿光束，波长为（530±30）nm。Morris水迷宫，华北正华生物仪器设备有限公司。明暗箱，上海垒固仪器有限公司。

2实验方法

2.1动物分组30只大鼠用数字随机法分为模型组和康复组，每组15只。造模3天后给予不同处理，康复组进行水迷宫训练，模型组不给予任何处置。分别在造模前、造模后（训练前）、训练7天、14天、21天后进行检测。

2.2模型制备参照[1][2]采用光化学法制备模型：大鼠用10％水合氯醛常规麻醉后，俯卧于脑立体定位仪上，沿头颅正中切开头皮，在前囟后3.5mm、中线向左旁开2mm处，用牙科钻钻开一骨窗，光纤管尾端插至硬膜下3.5mm。虎红按70mg／kg于腹腔注射。5min后通过光纤管照射局部海马组织。照射时间：5min。术后缝合头皮，正常喂养。

2.3康复训练Morris水迷宫训练:从站台所占象限外的另三个象限随机选择一个入水点，将大鼠面向池壁放入池中，观察并记录大鼠寻找并爬上平台的潜伏期。如2分钟内找不到站台，则将其在站台上放置30s后再放回笼中，此时潜伏期记为120s。训练时分别从三个不同的入水点入水，每次不同动物的入水点相同，训练顺序固定。每日训练3次，早中晚各一次。

2.4神经功能评分：并采用Bederson等[3]制定的标准评分：0分：无神经损伤症状；1分：不能完全伸展对侧前爪；2分：向对侧转圈；3分：向对侧倾倒；4分：不能自发行走，意识丧失

2.5行为学检测明暗箱：先将大鼠放置在箱中适应3min，然后通电5min(50v,交流电)，并记录5min内的钻洞次数(即错误反应次数)，24h后进行测试。如大鼠进入暗室，因暗室底通有微弱的电流刺激大鼠，故大鼠逃出暗室，5min以内不进入暗室。就完成了学习，24h后测试的就是记忆能力。把大鼠放入明室始至进入暗室的时间称作潜伏期，进入暗室的次数为错误次数。我们分别在相应的时间点进行测试。

2.6统计学方法采用SPSS17.0统计软件进行数据处理，明暗箱测试成绩用均数±标准差表示，造模前和造模后的组内资料进行配对t检验，造模后各时间点数据进行方差分析。

3结果

3.1神经功能评分

于造模后3天对大鼠进行Bederson评分，可见实验大鼠无明显神经功能评分降低（p<0.05），饮食、活动无明显异常，造模后大鼠无死亡情况。

3.2.明暗箱测试潜伏期结果

造模前康复组和模型组两组之间潜伏期无明显差别（t值为0.225，P值为0.823），造模后潜伏期明显下降(t值分别为-5.811，-6.050；P值分别为0.000，0.000)；训练后两组大鼠的潜伏期均随时间逐渐恢复，但康复组较模型组恢复显著，两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)（见表1）。

表1两组明暗箱潜伏期结果(s，n=15，x-±SD)

注：与造模前比较，ap<0.05；与模型组比较，bp<0.05

3.3明暗箱测试错误次数结果

造模前康复组和模型组两组之间错误次数无明显差别（t值是0.503；P值为0.619），造模后错误次数明显增多(t值分别为-5.666，-6.596：P值分别为0.000，0.000)；训练后两组大鼠的错误次数均随时间逐渐减少，但康复组较模型组恢复显著，两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)（见表2）

表2两组明暗箱错误次数结果(次，n=15，±SD)

注：与造模前比较，ap<0.05；与模型组比较，bp<0.05

4讨论

脑梗死作为人类的常见病、多发病，常常伴随一定的功能障碍，而其中学习记忆障碍最为常见。海马与学习记忆的关系密切，众多研究表明，损伤海马可引起记忆能力的下降，使动物或病人丧失了学习新事物和新技巧的能力。因此，研究康复训练后对学习记忆的影响近年来倍受关注。应用光化学法制作大鼠缺血性模型，创伤小，存活率高，梗死灶重复性好，是研究大鼠局灶性脑缺血理想的模型。本实验结果显示，采用光化学法制作大鼠海马梗死模型后，检查学习记忆能力，发现脑梗死后大鼠出现潜伏期延长，错误次数增加，需要更多的电击才能完成学习内容，说明海马损伤可引起学习能力减退，这与Higashi[4]研究一致。海马局部血栓形成后导致组织缺血缺氧，产生大量的自由基、氨基酸，导致细胞内钙离子超载，造成神经细胞变性坏死，影响了神经元之间的信息传递，并最终引起学习记忆功能障碍。随着时间的延长，学习成绩有所提高，而经过康复训练后大鼠的学习能力较自由活动组恢复较好。可以肯定康复训练可以促进学习记忆能力的恢复。康复训练可以促进大鼠学习记忆能力的恢复，但对于其如何参与学习记忆恢复的机制，以及如何促进海马与其他相关脑区的功能组合，还有待于进一步研究。

参考文献

[1]WastonDB,DietrichWD,BustoR.InductionofreproduciblebraininfarctionsbypHotochemicallyinitiatedthrombsis[J].AnnNeurol.1985,17:497-504.

[2]潘惠娟，李玲，刘卫，等.光化学法诱导大鼠双侧海马梗死模型的建立[J].中华物理医学与康复杂志，2005，27(11)：645-648.

[3]BedersonJB,PittsLH，TsujiM.Ratmiddlecerebralanteryocclusion：Evaluationofthemodelanddevelopmentofaneurologicexamination[J].Stroke，1986:17(13):472-476.

[4]Higashih,MenoJR,MarwahaAS,etal.Hippocampalinjuryandneurobehavioraldefictsfollowinghyperlycemiccerebralischemia:effeCToftheophyllineandZM241385[J].Neurosurg，2002,96(1):117-126.