依达拉奉对大鼠全脑缺血再灌注后S100B蛋白和NSE的影响

依达拉奉对大鼠全脑缺血再灌注后S100B蛋白和NSE的影响

刘亚东路建新

刘亚东路建新（江苏省常州市医疗急救中心医务科江苏常州213000）

【摘要】目的探讨依达拉奉对大鼠全脑缺血再灌注后血清星形胶质源性蛋白（S100B）和神经元特异性烯醇化酶（NSE）的影响。方法24只SD雄性大鼠随机分为3组：假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、依达拉奉组(E组)，每组8只。采用改良的Longa法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。实验结束后测定大鼠血清S100B蛋白浓度和NSE浓度。结果与S组比较，IR组S100B蛋白浓度和NSE浓度显著升高(P<0.05)，使用依达拉奉处理后，与IR组比较，S100B蛋白浓度和NSE浓度显著降低(P<0.05)。结论依达拉奉可以显著降低大鼠全脑缺血再灌注后血清S100B蛋白和NSE的表达量，对全脑缺血再灌注损伤大鼠有保护作用。

【关键词】依达拉奉S100B蛋白缺血再灌注

【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）19-0365-01

血清星形胶质源性蛋白（S100B蛋白，一种钙离子结合蛋白）一种主要存在于神经胶质细胞中的特异性蛋白，其含量能反映颅脑损伤的程度并对预后进行评估[1]。神经元特异性烯醇化酶（neuronalspecificenolase，NSE）是参与糖酵解途径的烯醇化酶中的一种，主要存在于神经组织和神经内分泌组织中，是脑损伤的敏感性和特异性指标，反映脑损伤的严重程度，并且随脑损伤程度加重而升高[2]。本研究探讨新型羟自由基清除剂依达拉奉对全脑缺血再灌注大鼠神经损伤的保护作用。

一、材料与方法

1.实验动物与模型

采用改良的Longa法制备模型：大鼠以水合氯醛（35mg/kg）腹腔注射麻醉后，颈部正中切开2cm，分离双侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉后，动脉夹夹闭颈总动脉近心端，在颈总动脉近动脉分叉处剪一小口，缓慢向颈内动脉插入事先制备好的尼龙线约19-22mm，在颈总动脉根部结扎，松开动脉夹，缝合皮肤。体外留少许栓线，缺血2h后将栓线抽离，形成再灌注模型。

2.动物分组及给药方法

将动物随机分为3组，每组8只。假手术组（S组）：分离双侧颈总动脉，开颅并暴露基底动脉，仅穿线不阻断；缺血再灌注组（IR组）；依达拉奉组（E组）：IR组在缺血前5min通过微量注射器注入5μl生理盐水，E组在缺血前5min将事先溶于5μl生理盐水中的3ng依达拉奉注入侧脑室。

3.标本采集及处理

缺血再灌注6h后，尾静脉取血1.5ml，以转速4000r/min离心10min,制备大鼠血清。使用S100B和NSE蛋白酶联免疫试剂盒（上海瑞齐生物科技有限公司）测定血清中S100B和NSE蛋白浓度。

4.统计学分析

应用SPSS13.0统计软件，所有数据均以x±s表示，采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

二、结果

与S组比较，IR组S100B和NSE蛋白浓度明显升高(P<0.05)；经依达拉奉处理后，与IR组比较，E组S100B和NSE蛋白浓度显著降低(P<0.05)，见表1。

表13组大鼠血清S100B和NSE蛋白浓度

组别S100B蛋白浓度（μg/L）NSE蛋白浓度（μg/L）

S0.02±0.003.22±1.23

IR0.92±0.236.84±2.01

E0.54±0.124.01±1.12

三、讨论

S100蛋白是一种酸性钙结合蛋白,是由2种亚基组成的同二聚体或异二聚体。S100B主要存在于胶质细胞和神经膜细胞中,是星形胶质细胞增生的标志物。由于S100B主要存在于神经组织，无神经损害时在血清中不易测出，而当神经组织受到损失时，其可溶性使之能通过损伤的血-脑脊液屏障到达血中，因此测定血清S100B水平可反映脑损伤程度[3]。NSE由3种具有特殊免疫特性的亚单位α、β、γ组成，存在形式为二聚体，血清中所释放的NSE水平与神经细胞的死亡数量呈正相关[4]。依达拉奉是一种新型的自由基清除剂，具有比传统抗氧化剂更强的抑制过氧化损伤作用，目前主要应用于急性脑梗死、缺血缺氧性脑病及各种缺血再灌注损伤的治疗[5]。本研究显示，依达拉奉处理可以显著的减轻缺血再灌注所造成的脑组织损伤，说明依达拉奉可通过清除自由基，减少氧化性损伤，抑制神经元死亡，从而对脑组织起到一定的神经保护作用。

参考文献

[1]PelinkaLE,KroepflA,LeixneringM,BuchingerW,RaabeA,RedlH.GFAPversusS100Binserumaftertraumaticbraininjury:relationshiptobraindamageandoutcome[J].JNeurotrauma,2004,21:1553-1561.

[2]HerrmannM,EbertAD,GalazkyI,etal.Neurobehavioraloutcomepredictionaftercardiacsurgery:roleofneurobiochemicalmarkersofdamagetoneuronalandglialbraintissue[J].Stroke,2000,31(3):645-650.

[3]VosPE,JacobsB,AndriessenTM,LamersKJ,BormGF,BeemsT,etal.GFAPandS100Barebiomarkersoftraumaticbraininjury:anobservationalcohortstudy[J].Neurology,2010,75:1786-1793.

[4]LiQ，ZhangR，GeYL.EffectsofneuregulinonexpressionofMMP-9andNSEinbrainofischemia/reperfusionrat[J].JMolNeurosci,2009,38(2):207-215.

[5]HiranoM.Clinicalevaluationofliverinjuryinpatientswithacuteischemicbrainstroketreatedwithedaravone[J].HepatolRes,2011,41:142-150.