乙肝病毒血清标志物检测与临床价值

乙肝病毒血清标志物检测与临床价值

曾铁文

曾铁文

元谋县疾控中心云南省楚雄彝族自治州651300

【摘要】使用探讨时间分辨荧光免疫测定法，进行定量检测乙型肝炎血清标志物和酶联免疫吸附试验定性检测的关系，有着非常重要的临床应用意义。采用检测86份血清标本HBV-M方法，可以得出两种检测方法，同时具有较高一致性意义，但是利用TRFIA检测会明显高于ELISA。

【关键词】乙肝病毒；血清标志；检测；临床价值

乙型肝炎属于病毒性肝炎，也是流行最广泛和危害最严重的病毒肝炎，乙肝血清标志物检查仍然是目前临床诊断和治疗病毒感染者传染非常重要的标志。血清标志物检测是目前对于乙型肝炎检测最常用指标，临床上常用的免疫检测方法主要就是放射性技术，时间分辨荧光免疫分析法的研究分析更加突出其优越性，本文通过对于酶联免疫吸附和时间分辨测定检测差异性进行一定临床价值分析。

一、乙型肝炎检测方法

1、一般资料显示，于2007年我中心对于患有乙肝患者进行检测，其中男士42例，女44例，年龄是5～58岁之间，采用静脉血分离血清置-70℃进行保存。

2、试剂使用上海新波生物技术有限公司的HBSag和抗-HNE定量检测试剂盒，另外还有卫生部临检中心提供的乙肝病毒血清标志物质控品，然后按照操作，严格按照作业指导书进行测试。

3、仪器是Anytest2000型时间分辨荧光免疫分析仪，判定结果方法是参照实际说明书判定，经过本室严格进行检测工作，不同浓度标准对应不同法定性检测结果，抗-HBc大于或者等于0.6NCU/ml判定为阳性，反之是阴性。

使用TRFIA法和ELOSA法检测HBVM结果相互比较，86例血清标本中，除了对于抗-HBE检测结果也是两种方法，可以很好分别出差异性，其他的单个项目检测无统计意义。

二、乙肝病毒传播方法

1、乙肝病毒是全球传染非常广泛的传染病，以HBV感染数和HBSAG携带率估算，全世界病毒携带者就有3.5亿人，其中亚非拉地区有2.8亿，中国就有1.2亿人，占全世界总携带者的三分之一。所以要加强对于乙肝病毒携带者的防止工作，保障我国人民健康，促进经济发展和社会整体进步工作，都需要一定合理医疗和防止措施。

2、对于健康人群要进行一定计划性免疫措施，需要快速和灵敏的检测方法，筛选无偿献血人员，从业人员体检和婚检工作，临床上要对病例发展进行一定评估工作，传统的检测乙肝病毒方法主要标准就是对血清进行一定判断工作，只能判断阴阳性，但是无法得知真正的浓度问题，这样给临床上诊断和治疗乙肝病毒带来了一定的难度。

3、使用HBV血清标志物定量检测反映血清含量，可以间接反映体内的HBV活跃程度，对于临床上药物疗效进行一定评价，具有非常重要的意义，两对半定量检测结果的有效性，在检测过程中直接可以进行标准量化控制，可以分为高中低三个定制，两对半检测方法的室内控制，分为阴阳性质控制，免疫胶体的检测不能进行严格质控，同时可以保证检测结果的有效性。

三、两种检测方法

1、TRFIA法检测的灵敏度明显高于ELISA法，和检测原理也有一定关系，TRFIA方法应用主要就是镧系元素的特点，原子标记技术，用于镧系元素的銪示踪物，标记物体积也是比较小的，对于被标记物空间结构和活性也影响很小，时间分辨标记物的荧光寿命很长，如果延缓测试时间等，测试样品自然荧光就会完全灭失，然后再测定銪的荧光信号时，就会使得特异性荧光干扰消失，从而提高检测灵敏度。

2、对于波长分辨主要是镧系元素发射光和激发光波长之间位移问题，可以有利于排除干扰，很好提高分辨率，解离增强技术，如果示踪物信号微弱的时候，可以加入酸性增强液体，就会从免疫复合物中解离出来，形成新的螯合物，如果被激光激发后，会发出极强的荧光信号。

3、EHLSA检测结果比较，有较高的灵敏度，有很好重复性和比较宽的线形范围，可以检测出ELISA浓度标本问题，还可以很好弥补酶标定检测不足问题，为血清低浓度抗-HBS幼儿再进行一定免疫苗接种，也可以提供一个非常有效的判断依据，有很好发汗前景和分析手段。

四、乙肝病毒检测临床意义

1、传统的乙肝检测在临床上可以持续很长时间，直到被完全敏感和快速方法代替，两者检测结构都和数目有着很大关系，检测灵敏度也很高。

2、使用PCR检测是上个世纪检测技术，具有敏感、特异和快速的效率，使用定性的检测方法可以提高检测水平。利用杂交方法固定到酶标板孔壁，要加上生物素标记探针进行链亲系统结合，这种方法可以永远定性检测，但是污染危险比较大。

3、利用定量的PDR临床检测血清，是常用的方法，具有一定分子生物方法，还可以利用酶独特进行生物活性荧光激发，合成分别的荧光基因引物。在循环进行中可以用检测荧光强度软件和内部参比，进行一定定量分析，可以避免检测产物，也避免了以往传统的阳性污染缺点问题，但需要进行定量抗病毒药物治疗观察。

4、PCR的检测灵敏度和特异性主要取决于试剂盒，为了杜绝对于假阳性的发生，卫生部参照国家标准制定了严格管理规定和办法，对于检测要从生产到使用都进行一定合理检验和考核，同时开展检测实验室，按照卫生部的设置实验室，配置有关仪器设备，然后才能进行检测工作。

5、经过几十年的发展，我国对于乙型肝炎免疫和分子生物学研究，已经形成一套完整的检测病毒系统，对于敏感、特异和定量的乙肝病毒血清标志物采用合理科学的检测方法，进行合理的诊断和治疗。

五、讨论

传统乙肝血清标志物是目前国家对于乙肝检测和筛查最普遍的标志物，对于抗原作为一种新型的检测指标，相比较HBEAG更能准确反映乙肝病毒的复制情况，是一种传统乙肝血清标志物，也是传统乙肝血清标志物，是非擦汗功能有益的补偿条件。HBV-DNA是衡量乙肝病毒复制的最重要及精准的证据，在临床上也是一项重要的指标综合分析，通过HBV-DNA能够进行准确了解患者的病情，进行合理指导治疗工作。

【参考文献】

[1]张晓平，王延青.时间分辨荧光免疫分析技术在HBV-M检测中的应用[J]，实用医技杂志，2006年12期.

[2]何念海,王英杰,王泽文,刘俊,刘国栋,李嘉佳,王宇明.混合型人工肝治疗肝衰竭疗效观察[J]，第三军医大学学报,2003年06期.