浅谈临床常见标本的微生物检验程序

浅谈临床常见标本的微生物检验程序

兰凯靳伟东刘天尧王宇

哈尔滨工程大学医院150001

摘要：目的：研究微生物标本的临床技术检验程序内容，提高临床微生物技术水平的研究。方法：采用念珠球菌作为临床微生物标准，采用生物检验的技术方法对检验程序进行分析。结果：念珠球菌是白色的，采用沙氏葡萄糖进行养基的培养。生长状态温度控制在35℃，将显色基置于25℃环境下，菌落是乳白色的。菌落是浅绿颜色的。在吐温玉米粉培养基、沙保罗琼脂基上进行生长状态控制调整。念珠球菌的发酵式样以阴性为主，通过尿素试验分解完成。结论：微生物种类繁多，生化特性不同，但是检验的基本程序是一致的，需要对标本进行分离，确定菌种的鉴定标准，药敏试验等，完成微生物的检验程序的判断。

关键词：微生物；检验；程序

引言

临床微生物标本技术的检验程序主要有几个步骤，通过分析临床检验标准的基本内容，对标本操作的相关程序进行分析和判断，确定卫生无标本检验的基本程序，建立有效的微生物检验方案，对检验程序进行准确的分析，提高检验速度的准确性和重要性，实现对标本微生物程序检验的准确分析。

一使用材料及操作方法

1材料

选用念珠球菌、沙氏葡萄糖菌等多个菌种进行培养，通过氯化苯唑沙琼脂做培养基，使用乳糖、葡萄糖为发酵基。

2方法

首先需制作菌液，采用斜面进行培养基的培养。选用新鲜的培养接种方法处理，将液体放置于葡萄糖培养基中，放置时间在48小时以上，放置的温度在25℃左右。将菌液通过稀释后取1ml的菌液，放置于沙氏葡萄糖琼脂、氯化三苯、沙保罗琼脂培养基，在不同的控制温度下进行培养分析，温度分为控制在25℃、35℃以及38℃。培养时间经过5天后，对菌数进行比较对比分析。

挑取琼脂培养基、氯三苯琼脂的培养基，保证菌落接种于培养基的范围内。控制温度范围在25℃范围内，经过24小时后，分别观察显微镜下菌落的形态变化情况，确定显色效果。通过对比沙氏葡萄糖琼脂、氯化三苯琼脂、沙宝罗琼脂培养基中，对菌落的生化试验进行分析，确保实现对糖发酵、尿素分解的试验检验过程。

二结果

念珠球菌生长在沙氏葡萄糖的基本培养试剂中，生长状态在35℃，通过合理的生长状态，对活菌水平进行分析，确定活菌温度高于25℃条件下的活菌落量。在沙氏培养基中，念珠球菌的整体菌落以乳白色呈现，形态呈圆形，大小控制在5微米左右范围内，内部粘黏较复杂，菌落中央呈现突起的状态。革兰氏的培养基的染色呈现阳性，菌体状态不均匀，呈现着色不清楚的现象。芽管与菌丝不可以清洗的分辨出来。念珠球菌在25℃状态下的生长较为慢，菌落成乳白色状态，形态不规范，较小。当温度达到35℃的时候，生长状态良好，菌落逐步成浅绿色的状态，随着生长时间的快速增长和延长，菌落的整体颜色逐步加深，呈现深绿色状态。随着念珠球菌的颜色逐步加深，生长时间成延续发展阶段。在显微镜下观察革兰氏菌落的染色后状态，菌体呈现着色不均匀的状态，可以看到成厚孢子生长状态，存在较多不清楚的假菌丝。利用纤维镜进行培养，区分酵母菌、假酵母菌丝的区别，对白色珠菌、光滑酵母菌进行鉴别，确定培养基的显色状态。白色念珠球菌在玉米粉的培养基上的整体生长装填较为缓慢，显微镜下可以看到呈现厚孢子、大量假菌丝。白色念珠球菌在氯化苯琼脂培养基上生长较为缓慢，菌落程度较小。在血培养基中的生长快速，在显微镜下显示大量的假菌丝。采用生化试剂的检验结果分析奶猪球菌在发酵试验中呈现状态，葡萄糖、麦芽糖中的发酵试验显示成阳性，尿素分解后的试验显示成阴性。而热带念珠球菌在葡萄糖、麦芽糖的发酵试验上成阳性，尿素分解后的试验状态成阴性。

三讨论分析

念珠球菌是一种较为常见的致病菌，患者经感染后容易出现炎症疾病，引发机体内部各器官产生严重的炎症。采用微生物化学检验方法进行检验分析。首先需要对试剂稀释，取10ml的基础液倒入到10倍量的沙氏培养基中，经过静置在35℃的培养基48小时后，进行增菌分析。真菌量随着繁殖环境的改善，逐步提升，显微镜下显示培养基底部的颜色逐步加深。，大量的增菌造成培养基少量渗出。培养基中显示，经过72小时后，观察培养基中的菌落颜色和状态，念珠球菌的群落逐步成现绿色状态，菌落直径约为1.5μm，而热带念球菌的颜色呈现深蓝色状态，菌落的大小呈现2μm状态。另外克柔念珠菌的颜色呈现粉色或红色，菌落的直径约为4.5μm，光滑的念珠菌颜色较深，菌落颜色呈现深紫色，菌落直径约为2μm，其他念珠球菌的菌落颜色为白色，菌落大小游离不定。

在增加菌配液后，去除1ml放置入玉米培养基和血培养基中，采用35℃的温度进行48小时的培养。挑选典型的菌落涂片进行观察。在显微镜下，使用高倍望远镜观察真菌丝、芽管之间的关系，可以见到念珠球菌中含有较多的厚膜孢子。最后使用显色培养基进行生长实现试验，菌落主要以念珠球菌为主，经过多方面的生化培养，实现生化试验的作用，真菌试验中采用的能量源有葡萄糖、蔗糖等，通过发酵放置于培养液中，经过尿素分解试验处理，将其放置于35℃的培养箱内进行培养。对比分析观察试验效果，分析试验检测结果，同时进行菌种的鉴定分析。经过判断显示确定，真菌采用的化学生物检验方法差异不大，但是不同的病原菌受环境、生长状态的影响，生化特点不同、生长水平不同。但是，尽管微生物的生化检验状态、特性存在千差万别的差异，单检验程序基本相同，显影审查考核的标准基本相同。都是通过对菌种的分离，对菌种、药敏程度进行鉴别分析，确定药敏试验的实际检查步骤。

结语

综上所述，临床医学标本检查中，对于微生物的培养基、菌种、菌落以及生物特性进行分析，判断有效区分生化特性的标准内容，分析医学临床检验程序标准，对检验标本的步骤、内容、生长环境、温度、湿度、使用的检验材料等多项内容进行分析，判断检验效果，认识到临床医学检查中对于微生物的生物化学检验程序，逐步提高临床检验的质量配比效果，提升检验标准和检查效果，确保微生物检验不受其他因素的影响，降低其他因素问题，提高微生物临床生物检验的准确性。

参考文献：

[1]孙大惠.临床微生物检验的质量控制[J].内蒙古中医药.2013（24）

[2]颜晓宁，周志敏.加强临床微生物检验的质量控制和生物安全管理[J].中国社区医师（医学专业）.2010（23）

[3]郭基平，袁晖蓉，陈幼红.标本涂片革兰染色在临床微生物检验中的作用[J].中国医药导报.2006（32）