舒祖文(湖南省沅陵县疾病预防控制中心湖南沅陵419600)
【摘要】目的正确的使用XS-1000i,并对血细胞分析仪进行初步评价。方法利用SysmexXS-1000i全自动血液细胞分析仪对血液标本进行测量,计数,分别计算分析仪的精密度,携带污染率,总重复性。结果Sysmex全自动血细胞分析仪精密度表现优异,总重复性好,携带污染率低。结论SysmexXS-1000i血细胞分析仪是较为理想的血细胞分析仪,适用于日常检验。
【关键词】SysmexXS-1000i全自动五分类血细胞分析仪应用评价精密度携带污染率总重复性
1材料与方法
1.1仪器和试剂
1.1.1仪器:SysmexXS-1000i全自动五分类血细胞分析仪,日本Sysmex公司生产。
1.1.2试剂:CELLPACK,STROMATOLYSER-4DL,STROMATOLYSER-4DS,SULFOLYSER,CELLCLEAN,e-CHECK日本Sysmex公司生产。
1.2方法
1.2.1标本在采血前,应使患者尽量减少运动;剧烈运动后应静息30分钟后采血。血液标本尽可能用静脉血,少数不宜取静脉血可采末梢血。静脉采血止血带压迫时间不能过长过紧,压迫时间宜小于1min,不超过2min。真空采血,穿刺顺利,采血量要正确;采血后,轻轻颠倒180°混匀,不要产生气泡。静脉血放入EDTA-K2抗凝真空管,末梢血放入注有CELLPACK的样本管。室温放置立即送检。血标本采集后应该在4h内检验完毕;如果无法在4h内分析样本,应将其储存在2-8℃冷柜内,在开始分析前先让冷藏标本恢复室温(15min-30min),轻摇标本10次。
1.2.2操作
打开打印机、IPU、主机及其他组件的电源。打开电源、处于就绪状态之后,遵循以下的步骤开展质量控制、分析和输出,停机,然后关闭电源。具体步骤:打开电源→执行质控分析→样本处理→分析(手动模式毛细管模式进样器模式)→显示并输出分析结果→执行关机程序→关闭电源。
2结果
2.1精密度
精密度包括批内及批间精密度,选择WBC,RBC,HB正常值标本10份,按常规方法分别进行测定,每份标本重复测定3次记录结果,将标本放室温2小时,再将每份标本测定3次记录结果。见下表
(1)正常值白细胞测定结果(单位1012/L)
全部总和=195.68+197.56=393.24;均值=393.64/60=6.55;批内重复实验均方=0.0101;批间重复试验均方=0.0589;批内重复试验CV=1.53%;批间重复试验CV=1.65%
正常值红细胞测定结果(单位1012/L)
全部总和=127.81+128.46=256.27;均值=256.27/60=4.27;批内重复实验均方=0.0017;批间重复试验均方=0.007;批内重复试验CV=0.97%;批间重复试验CV=1.01%
正常值血红蛋白细胞测定结果(单位1012/L)
全部总和=3844+3862=7706;均值=7706/60=128.43;批内重复实验均方=1.6167;批间重复试验均方=5.4;批内重复试验CV=0.99%;批间重复试验CV=1.03%
2.2携带污染率
在作携带污染率试验之前,先测定一定数量的标本,使测定数值达到稳定,然后取一份高值标本,连续测定3次(i1、i2、i3),随后立即取一份低值标本连续测定3次(j1、j2、j3)。携带污染率以下述公式计算:携带污染率=(j1-j3)/(i3-j3)*100%
以白细胞为例,测定的五次结果见下表
按照公式算得:携1=0.32%,携2=1.61%,携3=2.31%,携4=0.50%,携5=0.32%则携平均=(0.32%+1.61%+2.31%+0.50%+0.32%)/5=1.01%
2.3总重复性
总重复性包括重复测定的随机误差与携带污染双重变异因素。随机取标本20份,常规分别测定RBC,WBC,Hb及放置2h,4h后的数值,见下表。分别测定RBC,WBC,HB的重复试验CV
(1)WBC测定的总重复性CV:
∑测定值=15.95+32.73+…+49.5+23.59=452.48;均值=452.48/60=7.54;WBC测定的总重复性CV=2.39%
(2)RBC测定的总重复性CV:
∑测定值=11.6++13.52+…+11.16+14.91=243.78;均值=243.78/60=4.06;RBC测定的总重复性CV=1.09%
(3)HB测定的总重复性CV:
∑测定值=337+391+…+354+445=7376;均值=7432/60=122.93;Hb重复试验CV=1.28%
3讨论
3.1在精密度试验中,分别测得WBC批内重复试验CV1.53%,批间重复试验CV1.65%;RBC批内重复试验CV0.97%,批间重复试验CV1.01%;Hb批内重复试验CV0.99%,批间重复试验CV1.03%;
3.2在携带污染率试验中,WBC携带污染率1.01%;
3.3在总重复性实验中,测得WBC重复试验CV2.39%,RBC重复试验CV1.09%,Hb重复试验CV5.92%;这与XS-1000i操作手册上给出精确度WBC介于±3%,RBC介于±2%,精度(重现性)WBC≤3.0%,RBC≤.%,HGB≤1.5%,测得结果与之相符。
3.4SysmexXS-1000i根据液压聚集法、流细胞计数法、SLS-血红蛋白法进行血液分析。
A液压聚集法(DC检测)
在该检测器内,样本喷嘴将被定位在小孔的前面且与中心对齐。稀释后的标本由样本喷嘴被推入锥形室以后,在前鞘流内的试剂包裹下通过小孔的中心。通过小孔后,经过稀释的样本被送入捕集管中。这样就可以防止该区域的血细胞回流,并防止产生假性血小板脉冲。
液压聚集法改善了血细胞计数的准确度和重现行。同时由于血细胞通过在一条直线上的小孔,所以也可防止产生异常血细胞脉冲。
B流细胞计数法
血样经过抽吸和测量并被稀释至指定的稀释比后,再进行染色。然后该样本将被送入贯流分析池中。这种液压聚焦装置改进了细胞计数的精确度和重现行。由于血细胞颗粒是排成一行通过贯流分析池的中心,故而防止产生异常血液脉冲并可减少对贯流分析池的污染。
半导体激光束将照射到通过该贯流分析池的血细胞上。前向散射光和侧向散射光将被光电二极管接收,侧向荧光则由APD光电二极管接收。光信号被转化为电脉冲,从而可以得到有关血液细胞的信息。
CSLS-血红蛋白法
与氧合血红蛋白检测方法一样,SLS血红蛋白检测法的血红蛋白转换速度很快,而且该方法不使用毒性物质,这使该方法成为自动检测的一个合适的方法。同时,由于该方法可以用于检测高铁血红蛋白,所以该方法也可以准确的检测含有高铁血红蛋白的血液(如质控血)。
XS-1000i除了手动模式,进样器模式,还有毛细管模式,只要20μl,末梢血即可进行检验,适用于婴幼儿血细胞分析[1]。
参考文献
[1]丛玉隆,等.实用检验医学[M].人民卫生出版社,2009.107.