朱丹梅（抚顺第四医院检验科辽宁抚顺113123）
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）25-0147-02
【关键词】结核菌培养
结核菌生长缓慢，增代时间在固体培养基上为18-20小时，整个培养时间为4-8周[1]。
使用液体培养基使培养时间缩短至10-14天，但是如果前处不当会使污染率增加。我们对850份痰标本分别使用美国CDC建议方法和改良后的方法进行比较分析如下：
1、标本来源
为2012年1月至2012.年12月抚顺市第四医院临床送检痰标本850例份，所有标本患者全部诊断为肺结核。
2、试剂与方法
2.1试剂
N乙酰-L半胱氨酸；8%NAOH；PH6.8磷酸盐缓冲液；柠檬酸钠2H2O；（Bact/ALERTMPbottle）
2.2方法
标本分为两组进行去污染消化处理。取两支离心管中标本量不超过10ml，一支加入等量的改良NALC-NAOH消化处理液（消化液配制见表一）为改良后组；一支加入等量的美国CDC建议NALC-NAOH消化处理液为对照组。同时混匀，离心振荡20S，将离心管放室温15分钟。然后加入无菌PH6.8磷酸盐缓冲液，稀释标本至50ml以停止除菌作用。倒置或振荡封盖离心瓶，充分混匀液体，确保所有内壁经过浸泡，经3000g离心15分钟。弃去上清液用无菌磷酸盐缓冲液复溶离心沉淀物备用。取出一瓶抗生素补充试剂盒中的抗生素冻干粉和一瓶复溶液，将10ml复溶液加入抗生素冻干粉中。轻轻混匀，充分溶解。准备结核分支杆菌痰培养瓶（Bact//ALERTMPbottle）瓶中加入0.5ml已溶解的抗生素补充试剂。在生物安全柜中加入已液化的痰标本于MP培养瓶中。按照Bact//ALERT3D仪器操作方法，将MP培养瓶放入仪器中，并由仪器自动培养和检测。在标本培养前，同时做浓缩涂片染色，镜检找抗酸杆菌。
表1改良NALC-NaOH消化处理液的配制
3、结果
送检标本850例次。其中痰标本使用美国CDC建议方法进行前处理的阳性标本例次为85例次，阳性率为10%；使用改良后的前处理方法阳性标本例次为238例次，阳性率为28%；抗酸染色涂片的阳性率为17%。见表2
表2两组方法阳性率对比
标本总数例次阳性数例次阳性率%抗酸染色结果%
改良前850101017
改良后8502382817
讨论使用Bact/ALERT3D系统培养结核杆菌，该方法简单培养时间短，但是标本的前处理不当会导致标本污染，使阳性率下降。本文在美国CDC建议的痰标本前处理的方法基础上进行了改良，把消化处理液中NaOH的浓度由4%提高到8%，更好的对痰标本进行消化-除菌。结果表明用此方法可以提高痰标本中结核杆菌的阳性率，对在快速培养结核杆菌工作中具有重要意义。
参考文献
[1]刘照云,黄景萍.对结核菌培养痰标本前处理几种前处理方法的探讨[J].蚌埠医药,1987（02）.
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