授精时间对IVF-ET妊娠结局的影响及进展分析

授精时间对IVF-ET妊娠结局的影响及进展分析

黄藏玉，胡云芳，廖相

广西桂林市妇幼保健院广西桂林541001

【摘要】本研究首先分析了体外授精治疗妊娠结局的影响因素，然后分析了授精时间对妊娠结局的影响，之后分析了授精时间对ICSI妊娠结局的影响，最后分析了授精时间对IVF-ET妊娠结局的影响及进展。

【关键词】授精时间；IVF-ET妊娠结局；影响；进展

在体外授精治疗中，取卵后授精前需要进行一段时间的体外培养，通常情况下在授精前进行4-6h的培养。近年来，相关医学学者认为，授精前体外培养卵子2-3h、12h均不会影响临床结局及实验室指标，这就将一定的困惑带给了实验室工作者[1-3]。早期的一些研究是采用克罗米芬促排卵、腹腔镜下取卵进行的，均可能影响研究结果。

1.体外授精治疗妊娠结局的影响因素分析

在体外授精治疗中，卵子的授精率、优胚率、着床率等均受到卵子成熟度的直接而深刻的影响，而卵母细胞成熟指排卵前几小时充分发育的优势卵泡中将第一次减数分裂完成到第二次减数分裂中期、卵母细胞恢复在LH峰诱导下的核成熟，及对授精、胚胎发育进行支持的细胞膜、细胞质成熟，其涉及一个动态、复杂的生物学过程，包括核、膜、质、透明带、卵丘细胞等。同时，滋养细胞也将良好的前提条件提供给胞质成熟，细胞核、细胞质的变化直接而深刻地影响着授精、早期胚胎分化。生发泡（GV）消失并将第一极体排出时核成熟的形态学特征[4-6]。如果卵母细胞只是核成熟，那么其就不具备授精、胚胎发育潜能。要想具备授精、胚胎发育潜能，就必须同时伴胞质成熟。在形态学上，胞质成熟的特征并不显著，其包括细胞器的适当移位、多种蛋白质的合成等。目前，临床还缺乏观测细胞膜成熟的指标，多精受精的发生、IVF授精率均可能对其造成影响。细胞质、细胞核的成熟在生理条件下是精确同步的，要想使卵母细胞的正常授精、进一步发育得到有效保证，就必须保证二者相互协调。

2.授精时间对妊娠结局的影响分析

促排卵用药的过程在辅助生殖治疗过程中将卵泡募集模式改变，应用大量Gn将卵子的发育调控与同步化破坏，可能使细胞浆、细胞核、卵子缺乏统一的成熟度。目前，临床还没有统一胚胎质量受到促排卵药物的影响。相关医学学者认为，促排卵药物能够有效改善获取的卵母细胞质量。但是，相关医学研究表明[7-9]，小鼠细胞核的成熟会在促排卵的作用下延迟，促进染色体异常卵母细胞比例的增加。相关医学学者则认为，COS会造成卵母细胞核缺乏相同的成熟程度，而胚胎发育及质量会受到不同类型的核成熟异常的影响。从总体上来说，核质发育在超排卵的作用下不同步，导致排出第一极体后需要有一段时间使卵母细胞在授精前将细胞质成熟完成，因此常规体外授精治疗中取出卵子后授精前需要进行一段时间的培养，但是现阶段，临床还没有统一培养时间。

3.授精时间对ICSI妊娠结局的影响分析

相关医学研究表明，和取卵后第一时间ICSI相比，卵母细胞培养2-4h后ICSI更能一方面促进卵母细胞成熟度的提升，另一方面促进卵母细胞授精率的提升，此外促进卵母细胞胚胎质量的提升。相关医学学者认为[10-12]，ICSI前最好体外培养卵子5-6h。相关医学研究表明，将授精前卵母细胞培养时间适当缩短2-3h并不会影响IVF结局。相关医学研究表明，适度的卵母细胞体外培养时间（4-8h）能够维持卵母细胞成熟度在较为理想的水平，从而对ICSI患者的临床结局进行改善。相关医学学者认为，在胚胎发育的早期阶段，ICSI结局并不受到卵母细胞体外孵育时间的直接而深刻的影响，而在胚胎后期的发育阶段，入胚胎植入、囊胚形成，ICSI结局就会受到卵母细胞体外孵育时间的直接而深刻的影响。在胚胎发育早期，人类受精卵基因组需要重编程，主要涉及DNA的重新甲基化、去甲基化，受精卵基因组的重编程可能受到卵母细胞质成熟度的直接而深刻的影响。由于4-8细胞阶段是人类胚胎基因组的主要表达开始阶段，因此，如果重编程不充分，那么可能就不会再极大程度上影响胚胎早期发育，而造成胚胎后期发育停滞。但是，也不应该保持过长的体外培养时间，发生这一现象的原因为未成熟卵母细胞的细胞质和细胞核在体外培养成熟后缺乏同步发育，从而可能对胚胎质量造成不良影响，进而促进优质胚胎率的降低。同时，卵母细胞具有过长的体外培养时间可能会造成染色体异常、卵母细胞老化，从而在极大程度上降低植入率、临床妊娠率。但是，相关医学学者认为，ICSI前体外培养卵母细胞3-12h结果无显著差异。从总体上来说，目前，临床还没有统一常规IVF/ICSI取卵后体外培养卵子的最佳时间。

4.授精时间对IVF-ET妊娠结局的影响及进展分析

4.1授精时间对IVF-ET妊娠结局的影响分析

相关医学研究表明，IVF-ET治疗中，体外培养卵子2-7h，但在7h内授精不会在极大程度上影响临床结局及实验室指标，发生这一现象的原因可能为COS后将同一批卵子取出来后，一些卵子具有良好的成熟度，一些卵子具有较低的成熟度，一些卵子具有较高的成熟度，而体外培养卵子6-7h、4-6h、2-3h可能使不同成熟度的卵子需求得到有效满足，因此不会在极大程度上影响临床结局及实验室指标[13-15]。但是，并不是随着培养时间的延长或缩短，临床结局就随之改善或恶化。由于胞浆在过短的培养时间的情况下没有充分成熟，会对授精、胚胎随后的发育潜能造成不良影响，而卵子可能在过长的培养时间的情况下老化，从而影响授精率、发育潜能。因此，相关医学学者在取卵后体外培养卵子2-7d授精临床及实验室指标差异不显著。现阶段，临床已经具有较为稳定的实验室培养技术，同时也进一步优化了体外培养体系，选择临床超排方案、加减用药量、把握取卵时机可能更能对卵子发育的同步性进行调控，从而使绝大部分卵子成熟度同步，为将更好的临床结局获取过来提供良好的前提条件。

4.2授精时间对IVF-ET妊娠结局的影响进展分析

现阶段，很多相关医学研究均报道了ICSI治疗取卵后体外培养卵子时间，但是却较少有相关医学研究报道[17-18]IVF-ET治疗中取卵后最佳的体外培养卵子时间及其对临床结局及实验室指标的影响。在体外授精治疗中，和ICSI治疗的患者相比，IVF治疗的患者具有显著较多的数量。因此，临床很有必要将IVF-ET治疗受到体外培养卵子的不同时间授精的影响弄清楚。相关医学学者认为，授精前培养卵母细胞0.5-6h的ICSI、IVF患者具有类似的授精率、种植率、持续妊娠率。但是，该研究为回顾性研究，并没有排除子宫内膜异位症、不明原因性不孕等引发不孕的多种原因，也没有统一促排卵方案，因此可能会在一定程度上影响研究结果的可靠性。相关医学学者的研究虽然将上述研究的缺陷克服，但是研究对象仅为ICSI患者，并没有研究IVF-ET患者。同时，大部分相关医学学者均回顾性研究了ICSI治疗的患者，还较少有相关医学学者[19-20]前瞻性研究IVF-ET治疗的患者的临床资料。历史性前瞻性研究可能具有更具说服力的结果，但是如果具有较少的样本数量，那么就会在一定程度上显著所得结论，需要相关医学学者将样本量扩大进行进一步深入研究。此外，近年来，临床采用了早期补救ICSI技术治疗可能授精失败的患者，其要求短时授精，授精2-4h后将卵子颗粒细胞剥除，对第二极体排出情况进行观察，从而将补救ICSI确定下来。取卵后体外培养卵子2-3h后授精能够使临床和实验室工作人员按常规时间取卵，同时还能够使其在正常工作时间内完成补救ICSI工作，从而促进了临床和实验室工作人员负担的显著减轻。相关医学研究还表明，取卵后体外培养卵子2-7h授精不会影响IVF-ET治疗结果，也能够使临床和实验室工作人员依据每天工作情况对授精时间进行合理安排，没从而保持更为通畅的工作流程。

综上所述，在IVF-ET治疗中，授精前体外培养卵子2-7h不会在极大程度上影响临床结局及实验室指标，值得临床充分重视。

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