龙蛇溶栓冲剂对大鼠血栓形成的影响

龙蛇溶栓冲剂对大鼠血栓形成的影响

蔡冬梅1刘海军2蒋丽娟1孙晋民2郝文学3

蔡冬梅1刘海军2蒋丽娟1孙晋民2郝文学3

（中国医科大学1.附属第一医院老年病科;2.实验技术中心;3.老年病防治研究中心）

【摘要】目的：研究龙蛇溶栓冲剂对实验性动物血栓形成的作用。方法：通过结扎左肾下方下腔静脉建立大鼠血瘀模型和分离颈动脉建立动脉血栓模型，给予龙蛇溶栓冲剂(高剂量组0.80g/kg/d、低剂量组0.30g/kg/d)灌胃治疗，用生理盐水作阴性对照，血塞通片(0.03g/kg/d)作为阳性对照药物。观察该药对动脉及静脉血栓形成率及血栓湿重的影响。结果：龙蛇溶栓冲剂能有效抑制大鼠静脉与动脉血栓形成，降低血栓形成率，与生理盐水对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：龙蛇溶栓冲剂有较好的抑制动物血栓形成作用，具有潜在的临床应用价值。

【关键词】龙蛇溶栓冲剂;大鼠;血栓

【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】1008-6455（2011）02-0052-01

龙蛇溶栓冲剂以精制蛇粉配以党参、当归、山楂、三七等药物组成，治疗动脉硬化闭塞症等周围血管疾病具有的良好疗效。为进一步探讨龙蛇溶栓冲剂药理作用，本研究采用大鼠实验性体外血栓模型，观察该药物对大鼠血栓形成的影响，为临床用药提供依据。

1材料与方法

1.1药物:受试药物：龙蛇溶栓冲剂由中国医科大学老年病防治研究中心提供。对照药物：血塞通片(三七总苷)由中国云南文山特安呐制药有限公司生产，批号990202。

1.2动物:清洁级Wistar大鼠，雌雄各半，体重(200.0±20.0)g，由中国医科大学实验动物部提供,许可证号为SCXK(辽)2003-0009，分笼饲养,自由饮水,常规饲料喂养。饲养条件:温度18℃～25℃，湿度75%。

1.3实验方法

1.3.1对大鼠静脉血栓形成影响实验：参照文献制备大鼠静脉血栓模型[1]:取大鼠60只，随机分为四组，每组15只。四组分别是：空白对照组(生理盐水10ml/kg/天)，阳性药物对照组(血塞通片0.03g/kg/天)，龙蛇溶栓冲剂低剂量组(0.30g/kg/天)，龙蛇溶栓冲剂高剂量组(0.80g/kg/天)，各组动物按上述剂量药物加生理盐水10ml/kg/天灌胃给药，空白对照组给予10ml/kg/天生理盐水灌胃，每日1次，连续14天，末次给药后２小时，腹腔内注射3%戊巴比妥钠35mg/kg麻醉大鼠，固定,沿其腹中线切口3厘米，打开腹腔,分离出下腔静脉,于下腔静脉和左肾静脉交叉下方用丝线结扎下腔静脉，阻断血流，缝合腹壁。2小时后重新打开腹腔,用止血钳将连接下腔静脉的其他静脉侧支和距离结扎处约2厘米的下腔静脉夹住,剪取该段静脉,分离出管内血栓,滤纸吸净血栓水分，称重，得血栓湿重。以血栓形成百分率和血栓湿重为观察指标。

1.3.2对大鼠动脉血栓形成实验：取大鼠40只，随机分为四组，每组10只。给药方法同前，连续用药21天。末次给药后２小时，参照文献的方法[2]制备大鼠动脉血栓模型：腹腔内注射3%戊巴比妥钠35mg/kg麻醉大鼠，分离左侧的颈总动脉和右侧的颈外静脉，在7厘米的聚乙烯管中放一根预先称重的4号手术线。将聚乙烯管充满生理盐水肝素溶液（50u/ml/kg）,一端先插入右颈外静脉，另一端插入左颈总动脉，术后开放血流后15min中断血流，取出手术线称重，减去原线重量即为血栓湿重。并计算抑制率。抑制率=(对照组血栓重量－给药组血栓重量)/对照组血栓重量×100%

1.3.3统计学处理：采用SPSS10.0统计软件包，计量资料以x±s表示，组间比较用t检验、方差分析。计数资料比较用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1龙蛇溶栓冲剂对大鼠静脉血栓形成的影响（见表１）：结果表明,龙蛇溶栓冲剂高、低剂量组与对照组大鼠比较，血栓形成率与血栓湿重均明显下降，差异显著(P<0.05或P<0.01)。

2.2龙蛇溶栓冲剂对大鼠动脉血栓形成的抑制作用(见表２)：结果表明,龙蛇溶栓冲剂高、低剂量能够显著抑制下腔静脉血栓的形成(P<0.01)。

3讨论

血栓形成是缺血性心脑血管疾病的一个重要发病原因。研究表明[3]，随着年龄的增长血栓性疾病的发病率逐年上升，严重危害中老年人群的健康。目前临床治疗血栓性疾病的药物多为西药，如阿司匹林、华法令等，然而单用西药疗效欠佳,而且副作用较大。药理学基础研究与临床实验证实，活血化瘀中药具有抑制血栓形成作用，从中草药中寻找可口服、毒性小、价廉、药源多的抗血栓药是一条有效的途径[4]。

通过结扎肾下方下腔静脉引起血流淤滞建立的大鼠静脉血栓模型是静脉血栓形成的“经典过程”，能较好的模拟静脉血栓阻塞性血管疾病如脉管炎，反映其自然的病理过程[5]。而动脉血栓模型与临床硬化性动脉闭塞症等疾病具有相似性，通过动物试验观察龙蛇溶栓冲剂对血栓模型血栓形成的影响，可以体现该药物对血栓性周围血管疾病的治疗作用。

本实验研究表明，龙蛇溶栓冲剂对大鼠静脉和动脉血栓的形成均有较好的抑制作用，降低了血栓的形成率，预示该药物对周围血管病具有可靠的疗效，为临床应用提供了实验依据。但其抑制血栓形成的具体作用机制还需做进一步的研究。

参考文献

[1]ReyersL.Failureofaspirinatdifferentdosestomodifyexperimentalthrombosisinrats.ThrombRes,1980,18(2):669-672

[2]XuSY,BianRL,ChenX,CheifEd.Methodologyofpharmacologyexperiments[M],the3rd.BeijingPeople′sMedicalPublishingHouse,2005,1270-1273

[3]QuinnC,HillJ,HasscunaH.Aguideordiagnosisofpatientswitharterialandvenousthrombosis[J].ClinLabSci,2000,13(3):229-238

[4]汪海.以内皮细胞为靶标的新型抗血栓天然药物的研究[J].世界科学技术-中药现代化,2001,3(6):37-41

[5]杨煜,吕文伟,宋瑛士,等.白芍总苷抗血栓形成作用[J].中草药,2006,37(7):1066-1068