四川省广安市武胜县人民医院病理科638400
什么是免疫组化?免疫组化是利用抗体与抗原的特异性的结合(少部分有非特异性结合),通过化学实验得出的反应促使抗体在显色剂作用下显现出不同的颜色,从而确定组织细胞内的抗原,对其结果进行研究,研究它的属性及定量等。免疫组化方法的价值非常高,具有非常强的识别能力、对于抗原抗体的定位非常准确、特异性很强的诸多特点,还可以把功能性的研究、形态方面的研究巧妙地结合到一起,因为它的特殊性在很多方面都得到广泛的应用,比如医学方面的研究、生物学方面的研究等,这项技术都表现得非常出色[1]。对于肿瘤来说,免疫组化的运用对于肿瘤的病理研究提高了一个新的水平,在免疫组化技术还没出现之前,对于肿瘤的诊断和肿瘤的分类仅仅停留于对于组织结构及细胞的研究水平,而现在有了免疫组化技术后,除了停留在组织学细胞的水平外,已经深入到分子免疫和生物化学的水平。在现代科学飞速发展的时代,核酸分子的杂交技术有也有了巨大的突破,而使免疫组化变得更加强大,甚至到达了研究基因的科学水平。
在最近这十年时间,这项技术更是迅猛发展,对于现代的医疗和现代的临床研究来说非常的重要。对于肿瘤和疾病的诊断、鉴别诊断,分类、分型、定性等都起着决定性的作用。但是随着免疫标记物的增多,原来被定为特异性的标记物也出现了交叉反应和标记异常的情况,所以对于标记物的结果也不能绝对化,要结合其他检查合理的应用免疫组化技术。
一、免疫组化标记的形态和特征
1、阳性标记色度的特征,免疫组化标记阳性的细胞时,着色的程度取决于细胞内抗原的含量是多少、细胞分布的密度、敏感性和标记的方法所决定[2]。正常状态下,细胞内抗原的多少,分布的密度越集中,免疫组化标记的越敏感,显示阳性结果的着色就会特别明显。根据被标记阳性的着色度可以分为,出现深棕色属于强阳性,棕黄色属于中度阳性,这两项结果可以再最后作为判断的依据。
2、出现阳性标记物组织学的特征,1)、局部病灶型阳性细胞多见于小病灶分布的情况,没有固定的排列和不规则的形态,标记着色也是不太明确。2)、弥漫型阳性细胞分布不均匀,细胞和细胞之间没有任何连接,可以单独一个细胞分散着存在。3)、较常见的是片块型,细胞和细胞之间的边界比较清楚,如果互相融合之后,会呈片状、团状的结构结合在一起。4)、网状型属于细胞的密度比较大的肿瘤,一般都标记于膜抗原[3]。5)、腺管型标记多发生腺癌和有相似结构的胚胎瘤中。6)、腔缘型主要表现细胞的阳性颗粒主要位于腺体癌的边缘的绒毛处,一直延伸到腺管腔缘型表面一层黄色颗粒处。7)、菊花性,恶性的肿瘤细胞的排序更菊花一样,一团一团的聚在一起。
二、免疫组化剂在病理诊断中的作用
1、能确定组织细胞的类型,免疫组化能通过特殊的抗体辨别出被检测物体细胞内是什么类型的抗原,通过被检测出来的抗原来辨别属于什么类型的细胞。但是有些极个别的细胞表面非常的细腻光滑没有纹路,在镜下特别难以辨别出来,但是免疫组化剂可以,它可以清楚地辨别出细胞的形态属于哪种类型。
2、辨认出细胞所产生的物质,可以利用一些特殊细胞所产生的产物作为被检测的抗体,可以作为这种产物所产生的特殊标记。
3、了解分化程度,有很多被标记物都合理的进行分布,也有明确的位置,比如上皮细胞的膜抗原标记着色的位置都在细胞的外膜上,而差分化乳癌胞浆的里面也有可能出现显示着阳性的颗粒,角蛋白的其中的含量也是与它的分化程度有直接关系,未分化和低分化的癌的含量也比较低,染色也是较弱的[3]。
4、肿瘤的分化类型,在医学领域有很多恶性或者良性的肿瘤,它的发病因素是非常不明确的,只能根据研究发现它的发病与什么因素有关,但是现在能通过免疫组化剂得出结论,通过免疫组化剂的标记取得进展。比如之前发生的的颗粒性的细胞瘤,一度被科学家认为是属于肌源性的,但是这种肿瘤被免疫组化剂标记为肌源性阴性,而神经性的被免疫组化剂被标记为阳性,出乎人们的意料,证明了此项肿瘤的来源为神经性。
5、能发现微小病灶的变化,比如有些患者的癌症最早期的转移往往与淋巴结上表皮增生相似,容易混淆。运用以前病理学的诊断,如果在一个组织内发现一个转移肿瘤或者是同时发现几个转移性肿瘤是不可能发生的事,但是采用免疫组化的办法之后,可以根据发现正在转移的微小病灶找出恶性肿瘤的根源,比如在骨头的组织内发现了前列腺性的阳性标记,可以表示患者患有前列腺癌并发生转移。
6、肿瘤的分期,判断肿瘤是什么类型、有没有发生浸润、发现位置是否是原位以及有没有淋巴管和血管的浸入,这些都与肿瘤的分期有着密切的关系。用以前的病理手段判断是不理想的,难度也很高,但是却可以通过免疫组化的标记方法明确的得出相应的结论。
7、帮助诊断疾病和疾病的分类,人体内发生的免疫性疾病,主要还是由于自身的免疫系统疾病引起,比如肾炎就可用免疫组化的办法来帮助细胞组织标记,从而辅助诊断。而且免疫组化可以帮助肾炎进行免疫学的分类。
8、帮助寻找疾病的病因,在人体发病时,有的导致疾病的微生物用常规的手段不易被发现,尤其是病毒性所导致的致病微生物,由于其分子结构紧密所以很难被发现确诊,但是通过免疫组化的方法就可以明确致病微生物的抗原在什么部位等。
免疫组化技术在病理诊断中的作用其实挺复杂,但是对于临床医学的诊断起着决定性的作用,由此可见,随着科学的进步发展,在进行免疫组化的技术时,必须要了解当中存在的问题,同时具备相应的紧急措施给予纠正,要明确标准化的含义,要知道只有各个环境中实行标准化,就可以保证免疫组化技术的质量和准确程度,才能充分的发挥免疫组化辅助于病理检查的必要性和准确性,减少因为老的病理检查方法而导致对于疾病的误判,影响患者的一生。
参考文献:
[1]王雅萍.免疫组化技术和常规技术在肿瘤病理诊断中的效果对比分析[J].临床研究,2019,27(1):139-141.
[2]孙建平,杨晓昂.宫颈癌病理诊断的免疫组化技术的最新分析进展[J].临床医药文献电子杂志,20196(12):147.
[3]WangZengCards.ThevalueofImmunohistochemicalstaininginthediagnosisofpleuraleffusionsbyImmunohistochemicalstaining[J].JournalofAerospaceMedicine,2019,30(2):172.