标本存放时间对乙肝血清标志物检测结果的影响

标本存放时间对乙肝血清标志物检测结果的影响

张利英

张利英（自贡市沿滩区人民医院检验科四川自贡643030）

【中图分类号】R512.6【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）37-0066-01

【摘要】目的探讨标本存放时间对乙肝血清标志物检测结果的影响。方法选择294例乙肝血清标志物检测标本，将标本分为强阳性组和弱阳性组。用ELISA法检测不同储存时间的标本，比较检测结果。结果弱阳性组血清标本在第7天开始变化，HBsAg变化最为显著，阳性率为93.1%。至第14天，HBsAg、HbsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb阳性率分别为93.3%、75.0%、86.8%、94.5%和87.0%。强阳性组存放7日内检测结果无变化。结论标本存放时间可影响乙肝血清标志物的检测结果，乙肝血清标志物标本尽量及时检测。

【关键词】乙型肝炎病毒血清标志物标本存放时间

乙肝标志物酶联免疫吸附法(Enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)仍是目前临床实验室检测乙肝标志物定性的常规方法，其检测结果常作为临床诊断和治疗乙肝的依据之一。乙肝标志物的检测的准确性和灵敏度直接影响乙肝病人的诊断和治疗[1]。ELISA法检测乙肝血清标志物受多种因素的影响，如方法、试剂、加样和加试剂重复性、孵育温度的均衡性、孵育时间的长短、标本的溶血、RF的增高等都可能影响检测结果。在乙肝血清标志物日常检测工作中，由于标本数量及工作日程安排，常需将标本存放一段时间再进行检测。此外标本常存放一定时间以备复查之用。标本的存放时间对ELISA法检测乙肝血清标志物往往被忽视。为了探讨标本存放过程中时间对检测结果的影响，本文将本院检验科294份乙肝阳性标本置2～6℃条件下在不同的时间对同一份标本的乙肝标志物进行重复检测，所得结果报告如下。

1材料和方法

1.1标本来源

检测血清所有标本来自本院门诊及住院患者清晨空腹静脉血，采用密闭真空管采血，4000r/min离心分离血清。选用无脂血、无溶血标本，年龄为3～67岁，男性患者150例，女性患者144例，共294例。

1.2方法

根据患者初次检测结果，依据S/CO值的大小分为2组。A组为弱阳性组，共160例，HBsAg、HBsAb、HBeAg的S/CO值为1.0≤S/CO＜4.0；HBeAb、HBcAb的S/CO值为0.40≤S/CO＜1。B组为强阳性组，共134例；HBsAg、HbsAb、HBeAg的S/CO值均>4.0，HBeAb、HBcAb的S/CO值<0.40。A、B两组均在置2～6℃冰箱保存。检测方法为酶联免疫吸附测定法（ELISA）。乙肝标志物检测试剂盒(英科新创(厦门)科技有限公司)，HBsAg、HBeAg检测采用ELISA双抗体夹心法，结果判定以S/CO≥1.0为阳性；HBsAb检测采用ELISA双抗原夹心法，以S/CO≥1.0为阳性；HBeAb以及HBcAb采用ELISA竞争法，以S/CO＜1.0为阳性；

2结果

2.1弱阳性组标本存放时间对结果的影响

结果如表1所示，弱阳性组血清标本在第7天开始变化，HBsAg变化最为显著，阳性率为93.1%（即有6.9%检测结果转阴）。至第14天，乙肝五项血清标志物检测结果均有变化，阳性率分别为93.3%、75.0%、86.8%、94.5%和87.0%。

表1弱阳性组血清标本存放时间对乙肝血清标志物检验结果的影响

2.2强阳性组标本存放时间对结果的影响

强阳性组血清标本在2～6℃冰箱保存7天时各项标志物阳性数无变化。第14天时有2例HBsAb变为阴性，其他阳性数无变化，但HBsAg、HBsAb、HBeAg的S/CO值开始下降，HBeAb、HBcAb的S/CO值开始上升。

3讨论

我国属于乙型肝炎病毒(HBV)感染高流行区，一般人群的HBsAg阳性率高达9.09%。接种与未接种乙型肝炎疫苗人群的HBsAg阳性率分别达4.51%和9.51%[2]。HBV血清标志物的检测已有几十年的历史，在乙肝的诊断和治疗过程中占有重要的地位[3]。HBV血清标志物检测的准确性受到各种因素的影响，如：患者血清各项标志物的含量高低，所用试剂的质量、酶标仪的稳定性以及标本采集、处理保存等因素密切相关。

本研究结果表明，在不知血清HBV各标志物含量高低的情况下，2～6℃冰箱保存的标本不能超过5天。保存至第7天时其弱阳性标本S/CO值会下降，尤其是抗HBs出现假阴性结果引起漏检。保存至第14天时，乙肝五项标志物检测结果均有一定程度的假阴性。所以对乙肝血清标志物标本尽量在当天内完成检测，如果在当日对HBV标志物不能检测者，应将标本在2～6℃的冰箱内保存于次日内完成检测，最长不超过5天。另外，由于标本在冰箱保存时间过长易导致血清IgG聚合，使ELISA间接法在显色时本底加深。故对于一些需要长时间保存的标本或有可疑结果，需要在以后较长时间内重新复检的标本，都应于-20℃冰冻保存，以尽可能做到与新鲜检测标本结果的一致。

参考文献

[1]祝继华,严立,陈瀑,等.ELISA法在检测乙肝标志物中的应用和评价[J].重庆医科大学学报,2009,34(10):1397-1399.

[2]梁晓峰,陈园生,王晓军,等.中国3岁以上人群乙型肝炎血清流行病学研究[J].中华流行病学杂志,2005,26(9):655-658.

[3]刘伟平,殷明刚,马盛余.HBV血清标志物与Pre-S1抗原及HBVDNA联合检测研究[J].医学研究杂志,2010,39(3):121-123.