结核感染t细胞斑点试验检测与PDD在结核性疾病中的临床诊断价值对比

结核感染t细胞斑点试验检测与PDD在结核性疾病中的临床诊断价值对比

杜鸿张立明王立斯陈刚

杜鸿张立明王立斯陈刚通讯作者

重庆市中山医院重庆400020

【摘要】目的：比较结核感染t细胞斑点试验检测与PDD在结核性疾病中的临床诊断价值。方法：选取2012年4月一2014年4月来我院就诊的92名疑似结核病患者，按照随机数字法分为观察组与对照组。观察组患者进行结核感染下细胞斑点试验；对照组患者进行PDD诊断。结合两组患者的微生物、病理结果及临床表现确诊患者是否患有结核性疾病，比较两种方法诊断的敏感性与特异性。结果：观察组的阳性率，敏感率，特异性率分别为82.61%，84.78%，86.96%,均高于对照组的63.04%，63.04%，65.22%,差异具有统计学意义。（χ2=4.44，5.62，5.97，P<0.05）结论：结核感染t细胞斑点试验特异性高，灵敏度好，且相对其他检测方法操作简单，成本低，具有很高的临床诊断价值，可作为确诊结核病的临床首选检测手段。

【关键词】结核感染T细胞斑点试验；PDD；诊断价值

【中图分类号】R825.2【文献标识码】B【文章编号】1674-8999（2015）9-0686-01

目前结核病的临床诊断比较困难,肺结核分歧杆菌的阳性是诊断的黄金标准，但是其检测结果即使使用最先进的培养系统仍可能会推迟一到,两周的时间造成治疗上的延误，可能导致病情的恶化，给病人的身心造成巨大的伤害[1-2]。目前临床常用的诊断方法主要包括结核菌素试验（PDD），结核抗体检测试验等，但均存在各自的局限性，敏感性与特异性不能满足临床需要[3]。结核感染T细胞斑点试验试使用外周血进行单核细胞分离，应用酶联反应检测，是一种新兴的结核检测方式，本实验将结核感染T细胞斑点试验与传统的PDD检测方式相比较，现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料：病例来源于2012年4月一2014年4月来我院就诊的92名疑似结核病患者。纳入标准：（1）符合肺结核诊断标准，分枝杆菌快速培养阳性或涂片抗酸杆菌阳性；（2）有低热、消瘦、咳痰、咳嗽、咯血、乏力等症状及体；（3）影像学（CT，MRI）检查提示有疑似结核体征；（4）病理切片可见凝固性坏死和肉芽肿形成，胸腔穿刺有淋巴细胞浸润，病理诊断提示有结核可能。排除标准：（1）病人已有结核病史；（2）已明确为肿瘤或其他疾病;(3)病人由于各种原因不愿配合实验。随即将病人分为观察组和对照组，每组46人。观察组：男28例，女18例；年龄20～51岁，平均（37.2±4.5）岁；对照组：男26例，女20例；年龄23～55岁，平均（38.9±4.7）岁。经统计学分析，两组患者年龄、性别等一般资料均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2检测方法

观察组进行T-SPOT结核病检测：从外周血全血中分离单核细胞(PBMCs)，清洗样品消除外部干扰信号，每个样品被加入四个孔中，包括一个阴性对照，A孔(ESAT-6),B孔(CFP10),和一个包含植物血球凝集素的阳性对照。PBMCs被抗原孵化，敏感的T细胞分泌的细胞因子被特殊的膜上抗体捕获,其他不需要的材料和细胞被洗掉，最后,细胞因子被酶联免疫试验检测，记数斑点的数量进行评价。

对照组患者进行PPD试验,取0.1毫升PDD溶液注射于左前臂掌侧前1/3中央皮内，72小时后检查反应情况，观察皮位的反应,观察有无硬结节，如有测量浸润硬结的平均直径。

结合两组患者的微生物、病理结果及临床表现和治疗效果确诊患者是否患有结核性疾病，与两种方法的检测结果进行对比。

1.3判定标准

T-SPOT结核病检测[6]：患者在进行检测时若阴性斑点数为0一,个,A检测孔和B抗原检测孔计数一阴性孔计数≥6，或其中一个与阴性孔计数差值≥6可判为阳性结果;若阴性孔计数不为零，阳性空计数为阴性两倍以上也可认为结果为阳性[4]。

PDD检测[7]：硬结平均直径如小于5mm为阴性，大于等于5mm小于20mm为阳性反应5～9mm为弱阳性，10～19mm为阳性，20mm以上或局部有水疱、坏死、淋巴管炎均为强阳性。

1.4统计学分析

采用SPSS13.0进行数据分析,对计数资料进行χ2检验,按α=0.05的检验水准，以(P<0.05)表示差异具有统计学意义。

2结果

观察组的阳性率，敏感率，特异性率分别为82.61%（38/46），84.78%(39/46)，86.96%(40/46),均高于对照组的63.04%（29/46），63.04%(29/46)，65.22%(30/46),差异具有统计学意义（χ2=4.44，5.62，5.97，P<0.05）

表1两组阳性检测，敏感性检测与特异性检测结果比较［n（%）］

3讨论

结核性疾病是一种主要由结核分枝杆菌引起的传染性病，临床上较为常见[5]。结核病可以感染身体的任何部位,但最常见的是发生在肺部(称为肺结核)。常见的的体征和症状包括发烧、发冷、盗汗、食欲不振、体重减轻等，但大多数感染没有症状,称为潜在的结核病。临床上常用药物抗结核治疗，有研究表明结核病结核分枝杆菌在初始治疗时已经存在耐药性,采用药物治疗后有可能造成耐药性增加，治疗困难[8,9]。而且结核病存在十分之一潜伏感染最终会发展到活动性疾病,如果不及时治疗，可能造成患者死亡[10]。因此，对结核病的早期诊断至关重要。

仅仅根据症状和体征诊断结核病有一定困难的,明确诊断结核病需要在临床样本(如痰、脓、或组织活检)中识别出结核分枝杆菌。然而,这个组织培养的过程需要2–6周，十分缓慢，可能会对治疗造成延误，加重患者的病情，不利于康复[11]。因此,早期的临床鉴别对于结核病的治疗十分重要。目前常用的早期诊断方法包括结核菌素试验（PDD），结核感染T细胞斑点试验（T-spot.tb），

本研究结果发现，结核感染T细胞斑点试验的阳性率，敏感率，特异性率分别为82.61%（38/46），84.78%(39/46)，86.96%(40/46),均高于PDD的63.04%（29/46），63.04%(29/46)，65.22%(30/46),差异具有统计学意义（χ2=4.44，5.62，5.97，P<0.05）。两种方式对比发现，结核感染T细胞斑点试验的临床诊断效果好于较为传统的PDD实验，与陶臻等[12]的实验结果相一致，且该方法操作简单，成本低廉，适宜大规模临床推广。

综上所述,在结核病的临床诊断中，结核感染T细胞斑点试验的特异性高，灵敏度好，诊断价值较高。该方法可进行高通量检测，且检测速度快，价格低廉，可以大范围应用于患者的早起临床检测，指导患者的治疗，为患者争取宝贵的早期治疗时间，一定程度上避免疾病的发展。临床上可将此方法作为疑似结核病患者的首选筛查方式。

参考文献：

[1]DormanSE.Newdiagnostictestsfortuberculosis:bench,bedside,andbeyond.ClinInfectDis.2010;50:S173–7.

[2]TaegtmeyerM,BeechingNJ,ScottJ,SeddonK,JamiesonS,SquireSB,etal.TheclinicalimpactofnucleicacidamplificationtestsonthediagnosisandmanagementoftuberculosisinaBritishhospital.Thorax.2008;63(4):317–21.

[3]杨茜,张伦理,乌肠小萍.结核感染T细胞斑点试验在结核性脑膜炎早期诊断中的意义.中华传染病杂志,2010(8):504一506.

作者简介：

杜鸿，职称：主治医师学历:本科，姓别:女，出生年月：1971.11.23，研究方向：呼吸结核。

通讯作者：

陈刚，职称：副主任医师，出生年月：1971.9.1，研究方向：呼吸结核。