尿液细胞定量环涂片活体染色载玻片计数法

尿液细胞定量环涂片活体染色载玻片计数法

肖学文

肖学文（广东省湛江市徐闻县第二人民医院检验科524100）

【摘要】目的探究尿液细胞定量环涂片活体染色载玻片计数法在计算尿液中的细胞数目方面的临床价值，从而为医学提供借鉴意义。方法通过计算板法和载玻片计数法比较、载玻片计数法对检测结果的影响以及载玻片计数法和传统的离心法间比较这三个方面，来研究尿液细胞定量环涂片活体染色载玻片计数法的可行性，并总结实验经验[1]。结果在第一组比较中，研究表明这两种方法在计算细胞数目方面并没有明显的差别；载玻片计数法对检测结果会有一定程度的影响，尤其是对细胞数目比较少的标本；和传统的离心法相比，本次研究的计数方法更容易做到定量描述尿液细胞数，即使染色之后，细胞也能够识别出来。结论此次研究的载玻片计数法计算出的细胞数目结果比较准确，而且达到了临床上的需求，值得临床推广。

【关键词】活体染色活细胞检测载玻片计数法尿沉渣传统离心法

【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）16-0377-01

活体染色是指一个获得动物或植物的细胞活组织被染色，利用某些无毒或毒性很小的染料来显示细胞内某些天然结构，而不影响细胞的生命活动或产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。主要的活细胞检测法有台酚蓝排除法和中性红法。目前对尿液的细胞计数方法有多种，比如直接镜检法，离心沉渣镜检法和微升尿液计数法等[2]。而本次研究的尿液细胞定量环涂片活体染色载玻片计数法是一种新型的计数方法，也是通过三个方面做了主要分析与研究，现将研究结果报道如下。

1设备与材料

1.1此次研究所用的设备：普通医学显微镜、载玻片和盖玻片、血球计数板。

1.2特殊用具：10uL的一次性接种定量环（生命科学试验中常用的一种实验室工具，由柔软而富弹性的材料制作而成），也可以把载玻片置于下面绘制一个半径为5mm的圆形案台上，然后用定量环均匀地涂布尿液。

1.3由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料即瑞氏染液。

1.40.9%的生理盐水（浓度的选择标准：用于两栖类动物时是0.67～0.70%，用于哺乳类动物和人体时是0.85～0.9%），也可以是氯化钠注射液。

2方法

2.1事先制作好人工血尿液：采用正常人的尿液与血混合并稀释，产生不一样浓度的人工血尿液，然后分别用计数板计数，记录在不同浓度下的计数，每一浓度计数10次。最后求平均数。

2.2载玻片计数法：采用10uL的接种定量环蘸取10uL的混合尿，然后在载玻片上存在染料膜处涂布，产生10mm的圆形计数形状。等到尿和染液混合2-3min后，用显微镜观察开始10视野细胞计数。另一方面，用此种方法计数事先制作好的人工血尿液，并且计数细胞数，再对两组标本细胞数量进行比较。在制好的含有瑞氏染液膜的载玻片上（挥发干后使用）滴入尿液，然后用显微镜计数10视野细胞数，和以上相同的手法计数事先知道的人工尿液中的细胞数，最后用一下公式计算样本中的每uL的细胞数目：尿液细胞数=载玻片计数法10视野细胞数目×人工尿液10视野细胞数目[3]。

3结果

3.1计算板法和载玻片计数法比较：在计算细胞数目方面并没有明显的差别。详见表1。

表1计算板法和载玻片计数法比较

型别次数载玻片计数法（个/uL）计数板法（个/uL）

SCV%SCV%

Ⅰ200.165.620.133.74

Ⅱ200.044.860.553.60

Ⅲ203.884.034.204.33

Ⅳ2012.54.0012.763.97

Ⅴ2080.23.9981.104.04

3.2载玻片计数法对检测结果的影响：载玻片计数法对检测结果会有一定程度的影响，尤其是对细胞数目比较少的标本。

3.3载玻片计数法和传统的离心法间比较：选取两组中等浓度的血尿模型，通过对比显示，本次研究的计数方法和传统的离心法相比，更容易做到定量描述尿液细胞数，即使染色之后，细胞也能够识别出来。详见表2。

表2载玻片计数法和盖玻片法的比较

ⅠⅡⅢⅣⅤ

载玻片计数法（个/uL）51113181225321

盖玻片法（个/uL）0-33-55-87-99-15

4讨论

4.1尿沉渣就是尿液中的有形状成分，是原尿经过离心后，形成的沉渣。是尿液有形成分质和量的组合。包括细胞、管形、结晶、细菌等各种有形成分。尿沉渣的检查指标通常包括对红细胞、白细胞、肾小管上皮细胞、管型检测。尿沉渣的检测可以成为诊断一些肾病的基础，检查泌尿系统疾病的常用工具。常用的尿液细胞计数法直接镜检法，离心沉渣镜检法和微升尿液计数法，而这些方法需要比较费用较高的设备，一般的医院难以配置。在此次研究中，发现盖玻片法在加盖盖玻片时会有气泡产生，离心法会耗费时间，而且离心之后很容易导致尿有形成发生伤害，从而引起检测数据有所差别[4]，所以有相关学者不建议采用这种方法。

4.2本次研究的载玻片法可以在很大程度上改善传统离心法的弊端，在检测泌尿性疾病的效果上较高，而且费用不大，工作人员很容易掌握。通过尿液细胞定量环涂片活体染色载玻片计数法的研究，关于如何能更准确计数细胞数还需要相关单位进一步考量，希望本文能够提供借鉴意义。

参考文献

[1]丛玉隆，马骏龙．尿液细胞成分定量分析方法学研究[J]．中华医学检验杂志，2006(3)：249.

[2]玉隆，马骏龙．中国健康人尿液显微镜检测法有形成分结果调查[J]．临床检验杂志，2006(2)：161-164.

[3]可粱．尿液有形成分的识别与检查方法的选择[J]．中华检验杂志，2005(6)：14-16.

[4]江华.尿液细胞定量环涂片活体染色载玻片计数法[J].现代医院，2009，7（9）：162-163.