右旋布洛芬残留溶剂乙醇GC检测方法的建立和验证

右旋布洛芬残留溶剂乙醇GC检测方法的建立和验证

曹晓红彭捷

曹晓红彭捷

四川科伦药物研究有限公司（四川成都610500）

【摘要】本文建立一种用气相色谱内标法分析右旋布洛芬中残留乙醇的检测方法。试验结果表明在用聚合乙二醇为填料的毛细管色谱柱（DB-624）上乙醇与溶剂丙酮及内标物正丙醇分离良好，各峰分离度均＞4.0。在浓度为6.08μg?ml-1～1216μg?ml-1的范围内，相关系数R=0.99998，乙醇浓度与响应值的线性关系良好，乙醇的检测限为0.0009%，定量限为

0.002%。该方法操作简便、快速、准确性高，重复性好，平均加标回收率为102.2%，对同一

样品的精密度试验结果表明，不同时间及平行操作的RSD均＜1.0%。该方法的耐用性试验也

表明，该方法的适用范围较宽，方法耐用，可用于右旋布洛芬质量控制方法。

【关键词】气相色谱法；乙醇；右旋布洛芬

［中图分类号］R969［文献标识码］A［文章编号］1810－5734(2012)4-05-04

DeterminationofEthanolinS(+)-ibuprofenbyGasChromatographyCaoxiao-hong，PengJie(SichuanKelunPharmaceuticalResearchCO.LTD,Chengdu610500China)

【Abstract】GaschromatographymethodwasemployedforthequantitativedeterminationofethanolinS(+)-ibuprofen.Experimentalresultsshowedthatagoodseparationofethanolwithacetoneand1-propanolwasachievedonDB-624column,andtheseparationdegreewasmorethan4.0.Thelinerangewas6.08μg?ml-1～1216μg?ml-1withR=0.99998,andtherelativestandarddeviationwaslessthan1.0%.Themethodwassimple,rapid’accurateandprecise,andthelimitofdetection(LOD)was0.0009%,thelimitquantity(LOQ)was0.002%.Theaveragerecoveryofthemethodwas102.2%.ThemethodcanbuusedinthequantitativedeterminationofethanolinS(+)-ibuprofen.

【Keywords】Gaschromatography;ethanol;S(+)-ibuprofen

布洛芬是由等量的右旋布洛芬与左旋布洛芬组成，作为抗炎和镇痛药临床应用已有30余年，被认为是最安全的非甾体类抗炎药（NSAID），并且是一个非处方药。但是消旋布洛芬仍然由包括胃肠道毒性、水钠潴留、肾灌注降低及过敏反应等多种副作用。为开发更安全的NSAID，两种药物被。

推荐：环氧化酶-2（Cyclooxygenase-2,COX-2）抑制剂和NSAID的纯空间对应体，尤其是右旋布洛芬［１］。右旋布洛芬在临床有效剂量下有抑制环氧化酶（COX）的作用，而左旋布洛芬没有此作用，因此这两种空间对应化合物在药理学上完全不同，可以看作两种不同药物［２］。右旋布洛芬于1996年在奥地利开始广泛用于治疗类风湿性关节炎，作为一种新的非甾体类抗炎药（NSAID），由于它是布洛芬的纯空间对应体，而且人们对布洛芬已有大量临床经验，因此很快被接受认可［３］。

由于右旋布洛芬熔点只有49℃～53℃，并且难溶于水，在开发GC方法测定右旋布洛芬中的有机残留溶剂的过程中，只能选择右旋布洛芬的良溶剂作为溶剂或顶空进样法测定，本文通过实验选定右旋布洛芬的良溶剂丙酮作为溶剂，开发了右旋布洛芬残留溶剂检测方法，并全面验证该方法。

1实验部分

1.1仪器及试剂

色谱仪为agilent6890N气相色谱仪，配置氢火焰检测器；丙酮、正丙醇、乙醇均为分

析纯，右旋布洛芬样品由本公司制备。

1.2色谱条件

色谱柱：DB-62430m×0.53mm3μm；柱温50℃，保持时间20min，汽化温度150℃，检测器温度250℃，载气为氮气，柱流量2.0ml/min，检测器火焰离子化检测器（FID），进样量1μl。

1.3样品及标准溶液的制备方法

样品溶液：准确称取右旋布洛芬供试品约1.0g（精确至0.0001g）与10ml容量瓶中，准确加入1.0ml正丙醇内标溶液（含正丙醇约500μg·ml-1），在加丙酮定容，振摇至样品完全溶解，用于样品检测；

乙醇储备液：精密称取无水乙醇约0.5g，至100ml容量瓶中，加丙酮定容，摇匀即得；内标储备液：精密称取正丙醇约0.5g，至100ml容量瓶中，加丙酮定容，摇匀即得；标准溶液：分别精密移取乙醇储备液和内标储备液各1.0ml，同置10ml容量瓶中，丙酮定容，摇匀即得。

1.4系统专属性试验

取乙醇、正丙醇适量，用丙酮溶解分别配制成一定浓度的单标储备溶液；另取乙醇、正丙醇两种溶剂，用丙酮溶解制成一定浓度的混合标准溶液，在标准溶液中加入右旋布洛芬适量；分别取丙酮、乙醇-丙酮溶液、正丙醇-丙酮溶液剂混合标准溶液及家养的标准溶液分别进样，记录色谱图，考察各化合物的保留时间及各成分的分离情况。结果显示丙酮不干扰右旋布洛芬各组分的检测，各峰分离情况良好，图1：作为溶剂的丙酮的色谱图，图2：乙醇-丙酮溶液的色谱图，图3：乙醇-丙酮溶液的色谱图，图4：混合标准溶液的色谱图，图5加入右旋布洛芬样品的混合标准溶液的色谱图。

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图3正丙醇的色谱

Fig3Chromatogramof1-propanol〖JZ)〗

图5标准溶液+样品的色谱

Fig5Chromatogramofstandard+sample〖JZ)〗

1.5检测线与定量限

取乙醇标准储备液逐级稀释，考察信噪比为3±1，和10±1时的浓度即为相应的检测限与定量限，方法的检测限为0.0009%，定量限为0.002%。

1.6线性范围

分别称取乙醇和正丙醇各约0.5g，分置100ml容量瓶中，用丙酮定容，作为乙醇和内标溶液，准确移取乙醇储备液0.01ml、0.1ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml、2.0ml分置10ml容量瓶中，分别加入内标储备液1.0ml，加丙酮定容，在继承7份浓度范围为6.08μg·ml-1～

1216μg·ml-1的线性溶液，分别进样测定，以乙醇峰面积与内标峰面积的比值为纵坐标，乙醇浓度为横坐标，进行线性回归，结果表明：在浓度为6.08μg·ml-1～1216μg·ml-1的范围内，乙醇浓度与检出响应值的线性关系良好，相关系数R=0.99998，乙醇浓度与检测峰面积的线性回归方程为Y=0.00143389X+0.00267592。

1.7精密度试验

为了考察方法的精密度，同一批样品进行6次平行测定，测定结果之间的相对标准偏差（RSD）为0.03%。

1.8中间精密度

中间精密度考察在连续3天时间内，同一批样品的平行测定结果之间的差异，测定结果之间的相对标准偏差（RSD）为0.04%。

1.9准确度（回收率）试验

精密称取右旋布洛芬样品12份，每份约1.0g，分别置于10ml容量瓶中，其中3份中不加入乙醇储备液，作为右旋布洛芬乙醇残留量空白本底，另外9份分成3组，第一组3份中分别加入约标准浓度的80%的乙醇储备液,第二组3份中加入约标准浓度的100%的乙醇储备液,第三组3份中加入约标准浓度的120%的乙醇储备液。分别测定9份样品加入乙醇的回收率，考察方法的准确性。其中回收率按一下公式计算：

回收率=（测定含量-平均含量*样品称样量）/稀释倍数*加入浓度*100%。

结果3个不同加入浓度，9份样品的乙醇回收率均在95%～105%之间，平均回收率为102.2%，详细结果如下表1：

表1乙醇回收率试验结果

1.10耐用性试验

取标准溶液，考察初始柱温在45℃、50℃、60℃，载气流速在1.5ml?min-1、2.0ml?min-1、2.5ml·min-1,气化温度在120℃、150℃、180℃条件下，各溶剂的分离度，结果见表

2。在各项色谱条件在上述范围进行调节，各峰的分离情况良好，不影响乙醇的检测，方法耐用性良好，结果见表2。

表2耐用性试验结果

2结果与讨论

本文建立了一种用气相色谱内标法检测难溶于水的低熔点药物右旋布洛芬中残留乙醇的检测方法。右旋布洛芬难溶于水，因此无法采用水作为溶剂检测其中的有机残留。本文用丙酮为溶剂解决了右旋布洛芬的溶解问题。本方法采用直接进样法测定样品，通过专属性试验发现，右旋布洛芬在该方法中不干扰乙醇的检出，所以采用直接进样法测定样品。试验结果表明乙醇与溶剂丙酮及内标物正丙醇分离良好，各峰分离度均＞2.0。在浓度为6.08μg·ml-1～1216μg·ml-1的范围内，相关系数R=0.99998，乙醇浓度与响应值的线性关系良好，乙醇的检测限为0.0009%，定量限为0.002%。该方法操作简便、快速、准确性高，重复性好，平均加标回收率为102.2%，对同一样品的精密度试验结果表明，不同时间及平行操作的RSD均＜1.0%。该方法的耐用性试验也表明，该方法的适用范围较宽，方法科学耐用，可用于右旋布洛芬质量控制方法。

参考文献

［１］ZuutmondWWPaintreatmentwithNSAIDS,primaryfocusonibuprofen［Ｊ］.ClinRbeumatol,2001,20(suppl1):6-8.

［2］EvansAM.ComparativepharmacologyofS(+)-ibuprofenand(RS)-ibuprofen［Ｊ］.ClinRbeumatol,2001,20(suppl1):9-14.

［3］BonA.JongejanRC.Treatmentofnon-malignantpainintheDutchGPpopulation:ananalysisoftreatmentstandards,prescriptionhabitsandbasicattitudes［Ｊ］.ClinRbeumatol,2001,20(suppl1):2-5.

［4］中华人民共和国药典委员会，中国药典（2010年版第二部）［Ｍ］.北京：中国医药科技出版社，2010:120。

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