LeicaBond-Max全自动免疫组织化学染色仪在临床工作中的应用体会

LeicaBond-Max全自动免疫组织化学染色仪在临床工作中的应用体会

王梅于娜（通讯作者）

王梅于娜（通讯作者）

（四川大学华西第二医院病理科四川成都610041）

【摘要】免疫组织化学技术已广泛应用于病理诊断中，是病理诊断工作必不可少的一项辅助手段。早期免疫组化多采用手工操作，大量涉及手工染色的步骤，增加了系统误差的可能性，随着IHC临床应用和需求的增长，IHC实验标准化已经变得至关重要。

【关键词】免疫组化；全自动；手工操作

【中图分类号】R197.39【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2015）09-0389-02

【Abstract】Theimmunohistochemicaltechniquehasbeenwidelyusedinthepathologicaldiagnosis,anauxiliarymeansisanessentialpartofthepathologicaldiagnosis.Earlyimmunohistochemicalwithmanualoperation,alargenumberofstepsinvolvedinmanualdyeing,increasethepossibilityofasystemerror,asthegrowthoftheIHCclinicalapplicationsandrequirements,IHCexperimentstandardizationhasbecomecrucial.

【Keywords】Immunohistochemical;Automatic;Manualoperation

1.材料和方法

1.1材料

LeicaBond-Max全自动免疫组织化学仪，制备3um防脱片。

1.2试剂

CD10，caldesmon，ki67，Bond-Max自带二抗,显色和复染试剂盒。

1.3方法

将切片装入染色架并盖上covertile，放入染色机并按下锁定键，在电脑上点击开始键即可开始程序，待染色机完成染色步骤，再按下锁定键，即可取出切片，免疫组化的所有步骤从烤片,脱蜡,抗原修复,阻断,标记一抗,标记二抗,显色直到复染都可以由Bond-Max自动完成。

2.结果

CD10棕黄色颗粒定位于细胞膜，caldesmon棕黄色颗粒定位于细胞膜，ki67棕黄色颗粒定位于细胞核。

3.注意事项

在使用Bond-Max全自动免疫组化染色仪时需注意以下几点注意事项：（1）使用前检查缓冲液，蒸馏水，酒精，修复液，脱蜡液，一抗和机器自带的二抗显色及复染试剂盒是否足量。（2）废液缸应及时倾倒。（3）covertile需严格按要求浸泡及清洗，否则会造成交叉污染。（4）染色机应定期清洗加样系统和液流系统。（5）切片上机时要特别注意玻片和covertile放在指定的凹槽内，否则操作时容易卡住，影响染色程序的正常进行。（6）标签粘贴时要注意粘贴端正，否则机器无法识别，当机器无法识别标签时，可以选择手动识别。（7）当机器处于运行状态时，如果打开机器上方的盖子，染色程序将停止。（8）当机身放试剂架的显示灯亮红色时，试剂架不能取出，亮绿灯则可取出。

4.讨论

该机器属于半开放式全自动系统，仅针对一抗完全开放，用户可根据个人的偏好使用任何品牌的一抗，独特的covertile专利技术在玻片表面增加一个塑料罩，为免疫反应提供一个封闭的孵育环境，防止试剂挥发，既确保样品的安全也进一步节省抗体的用量。Covertile会轻轻将液滴铺散到玻片的规定区域，确保试剂均匀分布到组织的表面，即可防止组织的损伤，又使抗体的作用更均匀，尤其是独特的温控技术可实现每张切片独立温控，提供最佳的反应环境，使染色结果更可靠。

全自动免疫组化染色仪与传统手工操作相比，避免了人为因素造成的假阳性和假阴性，不同抗体的孵育时间可以分别控制，缩短了染色时间，更加节约抗体，染色效果更稳定，机器的可控性减少了因人为因素造成的加错加漏试剂，但是，冰冻的机器背后人的因素永远是最根本的要素，仪器的正确使用，离不开使用者的维修和保养。

【参考文献】

［1］吴秉铨，刘彦仿.免疫组织化学病理诊断.北京：北京科学技术出版社,2007，3-6.