试论细胞技术在血小板检验中的应用价值

试论细胞技术在血小板检验中的应用价值

王禹

黑龙江省牡丹江市北方医院157011

【摘要】目的：讨论细胞技术在血小板检验中的应用价值。方法：将100例血液标本按照血小板大小的不同分为小、正常和大血小板组，根据血小板数量的不同分为降低、正常、增高血小板组。在其中使用光学法和电阻抗法作比较来对标本进行血小板鉴定，外加手工血小板显微镜技术法做对比，并根据血小板直方图和小红细胞作用来判断影响。结果：从数量组来看，电阻抗法、光学法、手工法血小板技术较为相近；在血小板直方图和小红细胞影响上，光学法和手工法较接近。结论：光学法用于血小板技术对抗小红细胞干扰和不典型形态上技术较准确有一定价值。

【关键词】细胞技术；血小板；应用价值

【中图分类号】R331.1+43【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-07-083-01

细胞技术包括很多种，像光学法、干细胞法、流式细胞技术法等，可见细胞技术在应用上很广泛。血小板检验中血小板技术至关重要，但是否能起到相关临床上的意义，得用事实说话。本次将阐述光学法在血小板检验中血小板技术上的应用。血小板技术是指单位体积血液中血小板所含的数目，现在是临床上常规检查项目之一，在出血性疾病、血栓性疾病治疗上血小板技术的准确性起着至关重要的作用。一般通过血液分析仪器来完成。电阻抗法较常见，但是该方法受到影响的因素较多，像血小板大小、体积差异等。

1.资料与方法

1.1一般资料

我院刚入院的100例静脉血液标本，并且要求清晨空腹采集静脉血标本，并加入抗凝剂封存及时送检验。

1.2方法

将血小板按照大小不同分为大、正常、小，按照数量不等分为降低组、正常组、增高组，并根据形态学血小板直方图和小红细胞影响，使用仪器同时进行光学法和电阻抗法的血小板技术，按照手工显微镜技术法为标准来计算结果准确性。手工法：为PLT计数参考方法，是用1%的草酸铵液作溶血稀释剂，在显微镜下，用血细胞计数板人工计数，严格按照明文规定的要求操作，手工计数3次取均值。仪器法：采用CouLterS-CAL校准品校准CouLterAc-DiffⅡ，再用EDTA-K2抗凝新鲜全血定值，[1]最后用定值的新鲜全血校准SysmexXE-2100全自动血液分析仪，采用高、中、低三个浓度的SysmexXE-check质控品做每日室内质控。然后分别用电阻抗法、光学法对同一标本进行测定，在2h内计数完成。

1.3仪器设备、试剂、统计学处理

血液分析使用XE-2100型血液分析仪器和按照规格原装配套的试剂，按照仪器使用的要求来校准和进行质量的监控。按照全国临床的检验标准进行对手工血小板检验中的技术法的原配试剂配置，该试剂一般采用草酸铵。处理结果：使用专业SPSS的数据统计技术，进行数据分析，所用数据用A表示，血小板生理变化范围大，所有数据使用SPSS10.0软件进行统计分析。在这里便采用相对差异大的做比较，一般要在25%以上，这样结果才具有显著性。

2.结果

对血小板形态大小不均一的血小板，电阻抗法明显高于其他两种万法。手工血小板技术法叫其他两种万法变化差异较大，而且当MCV<55fl电阻抗法数据显然增高。

3.讨论

SysmexXE-2100血液分析仪就是一种采用电阻抗法和光学法两种方法对血小板进行检测的仪器。电阻抗法是根据血细胞相对非导电的性质，悬浮在电解质溶液中的血细胞颗粒，在通过计数小孔时引起电阻的变化为基础，对血细胞进行计数和体积测定。血小板随红细胞一起在同一个系统中进行检测，当各种细胞引起电阻变化，产生的脉冲经数字化后，根据不同的阈值，计算机分别给出血小板和红细胞的数目。血小板分别储存于64个通道，[2]直方图范围在2～28fL。光学法采用的是半导体流式细胞检测原理，对每个血小板从高低角度二维激光扫描，即用前向散射光检测血小板体积，由荧光强度提供RNA信息进行内部结构的确认和计数。

血小板计数是测定全血中的血小板数量浓度，对血液系统疾病的诊断与治疗有重要的参考价值。近年来，准确的血小板计数是血液学和检验医学界的研究热点，这是由于：血小板较易粘附于破损的血管壁上，对其计数检测数值均比实际值低；血小板计数的方法较多，但准确性较差；临床上输注血小板价格高昂，且易发生免疫性输血反应和存在感染的风险，故国外学者多主张降低输血小板的起点（triggerpoint）或阈值（threshold），因此准确计数血小板迫切而且重要。血小板计数可分为目视显微镜计数法和血液分析仪法。目视显微镜计数法是用10g/L草酸铵，显微镜下用牛鲍氏板计数。该法受影响的因素较多，如个体技术差异、试剂量、吸血量是否准确、充池是否均匀以及血小板在计数板上分布误差等，计数技术远不能满足临床的需要，[3]但因为手工法为直接对血小板进行计数，故仍为WHO推荐的血小板计数法。试验中严格按照操作规程，另外采用涂片镜检方法作为辅助检测手段保证误差水平。

由本次研究得出：光学法对血小板的形态鉴别能力强，能够排除一些因素的干扰，可以准确测定混有大血小板、血小板凝集、小红细胞或红细胞碎片等异常血液标本的血小板数，进一步保证了异常血液标本中血小板检测结果准确性。因此，当电阻抗法检测红细胞/血小板出现异常提示时，可选择光学法检测血小板。在血小板检验中使用光学法技术血小板，可以排除血小板形态、血细胞大小和血小板数量对技术造成的干扰，在这万面光学法具有重要意义但在节约成本和血小板直万图、血细胞直万图正常的情况下，可以选用电阻抗法得到准确结果。由此看来，细胞技术中的光学法在血小板检验中血小板和血细胞直方图不正常时为血小板技术提供了方法。

参考文献：

[1]张荣.细胞技术在血小板检验中的应用体会[J].现代养生，2015，14：38.

[2]吴国才.流式细胞技术检测血小板相关抗体在ITP诊断中的应用研究[J].中国实验诊断学，2014，06：945-947.

[3]王之发.基于细胞膜片技术复合富血小板纤维蛋白（PRF）构建可注射的组织工程骨的实验研究[D].第四军医大学，2013.