社区综合干预对高血压病患者的影响

社区综合干预对高血压病患者的影响

孙黎丽

宋贵禹1严茂伟2(1宜宾市第一人民医院药剂科644000;2成都中医药大学611137）

【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2010)22-0103-03

【摘要】目的建立安乐胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法鉴别处方中柴胡、甘草、钩藤、首乌藤四味药材；用高效液相色谱(HPLC)法测定甘草中甘草酸的含量，流动相为乙睛-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（25∶75∶0.3），检测波长250nm，柱温30℃。结果薄层色谱斑点清晰，阴性无干扰。甘草酸单铵盐进样量在0.032～0.416μg范围内与峰面积呈很好的线性关系，回归方程及相关系数：Y=1.1385×106X–0.036×104，r=0.9999，加样回收平均回收率为101.2%，RSD=0.34%，表明回收率的重现性较好。结论该法稳定，重复性好，可有效控制安乐胶囊的质量。

【关键词】安乐胶囊TLCHPLC甘草酸质量标准StudyonQualityStandardofAnleCapsule

Songguiyu,yanmaowei(TheNo.1people'shospitalofyibin,Zip644000;ChengduuniversityoftraditionalChinesemedicine,Zip611137)

【Abstract】ObjectiveToestablishthequalitystandardofAnlecapsules.MethodsRaixBupleuri,RadixGlycyrrhizae,RamulusUncariaeCumUncis,CaulifsPolygoniMultifloriwasidentifiedbyTLC.GlycyrrhizicacidwasdetectedbyHPLC.TheHPLCconditionofGlycyrrhizicacidwasasfoliows:themobilephaseconsistedofacetonitrile-0.2mol/LSolutionofammoniumacetate-glacialaceticacid(25:75:0.3),theUVdetectionwavelengthwasat250nmandthecolumntemperaturewas30℃.ResultsThecharacteristicidentificationbyTLCwasdistinctandhighlyspecific.ThequantitativeevaluationofGlycyrrhizicacidwaslinearwithintherangeof0.032～0.416μg,theregressiveequationandcorrelativecoefficient:Y=1.1385×106X–0.036×104，r=0.9999,theaveragerecoverywas101.2%(RSD=0.34%).ConclusionThemethodisexclusive,reproducibleandsuitableforthequalitycontrolofAnleCapsules．

【Keywords】AnleCapsulesTLCHPLCQualitystandard

安乐胶囊系剂改品种，原处方来源于《卫生部药品标准》中药成方制剂第二册104页[标准编号：WS3-B-0274-90]，由柴胡、甘草、钩藤、首乌藤等八味药材组成。原标准中只有各类成分的理化鉴别，无各药味的薄层鉴别及含量测定项，为有效控制其质浚岣咧柿勘晖疲臼匝椴捎帽〔闵追ǘ圆窈⒏什荨⒐程佟⑹孜谔俣ㄐ约穑捎酶咝б合嗌追ǘ愿什葜懈什菟岬暮拷辛瞬舛ā?1仪器与试药

岛津LC-10ATvp液相色谱仪（岛津公司），SPD-M10Avp二极管阵列检测器（岛津公司），SPD-10Avp紫外检测器（岛津公司），sartoriusBP211D电子天平（赛多利斯,感量0.1mg；0.01mg。载量210g；80g）；autoscienceAS5150A超声波清洗器（昆山超声波仪器有限公司）；TGL-16G高速离心机（上海圣科仪器设备有限公司）。

乙腈为色谱纯(FisherChemicals)，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。

甘草酸单铵盐（110731-200205，供含量测定用），中国药品生物制品检定所提供。柴胡对照药材（120923-200006）,中国药品生物制品检定所提供。甘草对照药材（0918-200004）,中国药品生物制品检定所提供。首乌藤对照药材（0921-200104）,中国药品生物制品检定所提供。钩藤对照药材（121093-200001）,中国药品生物制品检定所提供。

安乐胶囊，批号为091001、091002、091003。

2薄层色谱鉴别[1～2]

2.1柴胡的薄层色谱鉴别取本品内容物适量研成细粉，称取8g，加甲醇50ml，回流提取30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣用20ml2%氢氧化钠溶液溶解，用乙醚洗涤3次，每次20ml，弃去乙醚层，水层用水饱和的正丁醇提取3次，每次15ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤3次，每次15ml。正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取柴胡对照药材1g，加甲醇30ml，同法制得对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（8∶2∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对二甲氨基苯甲醛-硫酸-乙醇（1∶10∶100）的混合溶液，在105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

2.2甘草的薄层色谱鉴别取本品内容物适量研成细粉，称取5g，加水80ml使溶解，离心30分钟，取上清液，加乙醚振摇提取2次每次30ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1g，加水40ml，超声处理30分钟，同法制得对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸（14∶4∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，于105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

2.3首乌藤的薄层色谱鉴别取[鉴别]（2.2）项下的供试品溶液，作为供试品溶液。另取首乌藤对照药材1g，加水40ml，煎煮30分钟，滤过，滤液同法制得对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各10～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（10∶1∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

2.4钩藤的薄层色谱鉴别取本品内容物适量研成细粉，取10g，用浓氨试液湿润后，加乙醚100ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用5%盐酸溶液萃取2次，每次20ml，合并萃取液，用浓氨试液调pH值为9，再用乙醚萃取2次，每次20ml，合并乙醚萃取液，挥干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取钩藤对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各10～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮-氨水(50︰20︰0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

3含量测定[3-7]

3.1色谱条件色谱柱为岛津VP—ODSC18柱(4.6μm×250nm，5μm)；乙睛-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（25∶75∶0.3）为流动相；检测波长为250nm。理论板数按甘草酸峰计算应不低于2500。

3.2对照品溶液的制备精密称取甘草酸单胺盐对照品适量，加乙睛-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（25∶75∶0.3）溶液制成每1ml含32μg的溶液，即得（每1ml含甘草酸单铵盐对照品0.2mg，折合甘草酸为0.1959mg）。

3.3供试品溶液的制备取本品中粉约0.3g，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相约45ml，超声处理（功率150W，频率50KHz）30分钟，取出放冷，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，离心，即得。

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。对照品、样品及缺甘草阴性样品

3.4线性关系考察精密称取甘草酸单铵盐对照品适量，加乙睛-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（25∶75∶0.3）溶液制成每1ml含甘草酸单铵盐32μg的溶液，摇匀，作为对照品溶液（C=0.032mg/ml），分别精密吸取对照品溶液1、3、5、7、10、13μl，按正文色谱条件进行分析，测定峰面积。甘草酸单铵盐进样量在0.032～0.416μg范围内与峰面积呈很好的线性关系，回归方程及相关系数：Y=1.1385×106X–0.036×104，r=0.9999(X为甘草酸单铵盐进样量，单位μg，Y为峰面积)；以进样量（μg）为横坐标（X），峰面积（A）为纵坐标（Y）绘制标准曲线。

3.5精密度试验精密吸取对照品溶液(0.032mg/ml)10μl，注入液相色谱仪，按上述分离条件进行分析，测定5次，测定峰面积。结果对照品峰面积平均值为365032.9，RSD为0.67%，表明仪器精密度良好。

3.6稳定性试验取091001批样品与甘草酸单铵盐对照品适量，按甘草酸单铵盐的含量测定方法分别制备供试品溶液与对照品溶液，室温下保存，于制备完成后放置不同时间，分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，按正文测定条件进行测定，考察其稳定性，结果对照品溶液及供试品溶液的RSD分别为：1.63%、1.70%，表明稳定性良好。

3.7重复性试验取091001批样品0.4g，共5份，精密称定，按样品含量测定方法进行测定，含量平均值为2.42mg/g，RSD=0.83％，重复性良好。

3.8加样回收率试验精密称取样品（样品批号091001，甘草酸含量为2.42mg/g）适量，5份，分别精密加入甘草酸单铵盐对照品溶液（C＝0.159mg/ml）3ml，再分别加乙睛-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（25∶75∶0.3）约20ml，按甘草酸含量测定方法测定，计算其回收率。本方法加样回收平均回收率为101.2%，RSD=0.34%，表明回收率的重现性较好。

3.9样品测定按甘草酸含量测定方法对三批样品的甘草酸含量进行了测定，每批平行测定2次，结果三批样品以甘草酸计含量均值为(mg/g)：2.34、2.31、2.36。

4结论

本品系剂改品种，在原质量标准基础上，对方中药味均进行了薄层色谱鉴别研究。其中当归、川芎、茯苓、白术薄层色谱鉴别阴性有干扰，经反复试验都无法排除干扰，故其薄层鉴别未列入标准正文。由于原标准中无含量测定项，新增含量测定项。考虑含量测定以首乌藤中的主要成分大黄素作为指标成分进行含量控制，采用高效液相色谱法对大黄素进行含量测定，但经测定后，安乐胶囊中大黄素的含量很低（16.10μg/g），故不选大黄素作为含量测定项的指标成分。甘草在本方中益在补中，调和诸药，选其有效成分甘草酸作为指标成分进行含量测定，经查阅文献，采用HPLC法对甘草有效成分甘草酸进行测定。试验结果确证，柴胡、甘草、钩藤、首乌藤鉴别方法简便，重现性和专属性良好，该标准可作为安乐胶囊含量测定标准，用以控制其质量。

参考文献

[1]中国药典2005年版一部[M].北京:化学工业出版社.附60.

[2]王宝琴主编.中成药质量标准与标准物质研究[M].中国医药科技出版社.1994:145-158.

[3]郭淑莹,董伟林.HPLC法测定复方甘草合剂中甘草酸的含量[J].天津药学.1996,8(3):85～86.

[4]杜海燕,徐晓阳,金兆祥等.HPLC法测定牛黄清心丸中甘草酸含量[J].中草药.1999,30(7):507～508.

[5]朱兰,孔德云,吴晓明.HPLC法测定胃脘舒冲剂中甘草酸的含量[J].中草药.1999,30(5):339～340.

[6]王荣,杨拴喜,胡晓丽等.甘草复方制剂中甘草酸含量的HPLC测定研究[J].中国药学杂志1996,31(9):548～550.

[7]裘飞君,裘学强,陈仁兴.HPLC法测定胃炎宁颗粒中甘草酸的含量[J].中国药业.2002,11(9):39～40.