环磷酰胺与顺铂联合化疗毒副作用的时间依赖性

环磷酰胺与顺铂联合化疗毒副作用的时间依赖性

袁哲

袁哲（哈尔滨市食品药品检验检测中心150525）

【摘要】目的：探索肿瘤联合化疗副作用最小的时间，以确定最佳给药模式。方法：小鼠按昼夜六个时间点(10、14、18、22、02、06h)给予环磷酰胺（20mg•kg-1）与顺铂（2mg•kg-1）联合化疗，以小鼠体重下降百分率及骨髓细胞DNA含量为指标，考察两药联合化疗毒性反应的时间依赖性。结果：环磷酰胺、顺铂联合化疗，环磷酰胺10h给药小鼠体重下降的百分率及对骨髓DNA含量的抑制作用均最大，18h给药抑制作用最小。结论：环磷酰胺、顺铂联合用药毒副作用存在时间依赖性，其在18:00h给药毒性反应小。

【关键词】环磷酰胺顺铂生物节律毒副作用

肿瘤化疗的研究重点是提高抗癌药的选择性，降低其不良反应，寻找抗癌作用强、不良反应小的给药模式。环磷酰胺、顺铂是临床常用的化疗药物[1]，但是，其严重的副作用也给患者带来了新的痛苦。

时间生物学理论认为：人体功能，人体对药物和寄生物的处置均是时间的函数，抗癌药在体内的治疗作用和不良反应也依时间而变化。动物及临床实验证明,环磷酰胺、顺铂药效学、毒理学及药动学均有时间节律特征[2-3]。因此，探索抗癌药应用的最佳时间是充分发挥化疗作用的有效途径。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1药品注射用顺铂（冻干型）齐鲁制药有限公司生产（批号04080212）；注射用环磷酰胺江苏恒瑞医药股份有限公司生产（批号05012221）；0.9%氯化钠注射液沈阳志鹰制药厂生产（批号04113003）。

1.1.2动物雄性昆明种小鼠，体重16～18g，由沈阳药科大学实验动物中心提供，动物合格证号：辽实动字2003008号。所有动物置于温度20℃±24℃、恒湿（55%±5%），12小时光照（08：00～20：00）,12小时黑暗、隔音的动物室内，自由摄食、饮水，同步化10d后用于实验。

1.2实验方法

1.2.1环磷酰胺不同时间用药对小鼠体重的影响

雄性小鼠120只，按体重随机分为六大组，每一大组再分为二小组(1)对照组(2)给药组:每天按昼夜六个不同的时间点(10、14、18、22、02、06:00h)给予环磷酰胺（20mg•kg-1,ip）。连续给药5天。每日上午10：00统一称量体重。

1.2.2环磷酰胺不同时间用药对小鼠骨髓抑制的影响

动物处理同1.2.1。连续给药五天，于第7天上午10:00h统一脱臼处死小鼠，分离双侧股骨，采用紫外分光光度法，测定骨髓DNA含量：分离双侧股骨，用0.005M/LCaCl28ml冲洗骨髓腔，收集骨髓细胞。置4℃冰箱中放置30min，离心15min,弃上清液，沉淀物加0.2mol/LHClO45ml混匀。在90℃水浴中加热15min，冰浴冷却，滤纸过滤。滤液室温放冷，在262nm测紫外吸收值[4]。

1.2.3数据统计

数据以x±s表示两组间均数比较采用t检验统计，多组间均数比较采用SPSS13.0统计软件ANOVA分析进行统计学处理。p<0.05为差异有显著性。

2实验结果

2.1环磷酰胺不同时间给药对小鼠体重的影响

从表1可见，联合化疗五日后，动物体重与给药前相比均显著下降。其中10:00h给药体重下降最严重。之后的各时间点，体重下降有所减轻。6:00h给药对体重的影响最小。

**:p<0.01vsbeforetreatment

2.2不同时间给药对骨髓DNA含量的影响

从图1可见，正常小鼠骨髓DNA含量在24h内具有明显的昼夜节律性。其高峰期在02-06:00h，低谷在10-18:00h。联合化疗后，各给药组小鼠骨髓DNA含量与空白组比较均显著下降，表明环磷酰胺、顺铂对小鼠骨髓DNA合成具有很强的抑制作用。其中10:00h抑制率最大，18:00h抑制率最小。

**:p<0.01vscorrespondingcontrolgroup.

3讨论

大量研究资料证明，人和啮齿类动物对药物的吸收能力、肝血流量、肝药酶活性、血浆蛋白浓度、肾血流量、肾小球滤过率、肾小管重吸收率等均有显著昼夜节律变化[5-7]，这就必然使许多药物的药代动力学过程呈现出昼夜差别，从而导致药物疗效和毒性的时间依赖性。

本文研究证明，环磷酰胺和顺铂不同时间用药，其作用强度和不良反应呈时间依赖性，结果表明，环磷酰胺在10:00-14:00给药毒性反应大，其中10:00h给药小鼠体重下降百分率及对骨髓DNA合成的抑制作用均最大、毒性最强；18:00用药毒性最小，必将为临床两药的时辰化疗提供强有力的理论依据。

参考文献

[1]LeviF.Chronopharmacologyandchronotherapyofcancers[J].Pathol.Biol.(Paris)，1996.Sep;44(7):631-44.

[2]刘广宣,付明耀,张炳仁,等.环磷酰胺药效、副作用和药物动力学依时特征[J].中国优生与遗传杂志，2004，S1：3-5.

[3]刘广宣,杨立夫,张炳仁,徐峰.顺铂药效和毒性作用的依时特征[J].中国医院药学杂志,2004,24(10):609-610.