实验性糖尿病大鼠勃起功能障碍及中药的作用

实验性糖尿病大鼠勃起功能障碍及中药的作用

杨艳梅1朱艳玲2

杨艳梅1朱艳玲2

（1辽宁省沈阳市沈河区第二中医院辽宁沈阳110016）

（2辽宁省沈阳市医学院奉天医院辽宁沈阳110024）

【摘要】本文通过探讨中药复方对糖尿病大鼠勃起功能的影响，得出结论中药复方制剂对糖尿病性勃起功能障碍有防治作用。

【关键词】中药糖尿病大鼠勃起功能

【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）23-0156-02

据文献报道糖尿病患者勃起功能障碍（ED）发病率可达70%左右。糖尿病性ED是糖尿病常见的慢性神经微血管并发症之一，其发病原因复杂。本实验通过酶组织化学方法观察了糖尿病大鼠阴茎组织中一氧化氮合酶（NOS）和乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性变化，并检测勃起潜伏期及中药对其影响。

1材料与方法

1.1实验动物及药品

（1）Wistar大鼠，雄性，体重200±20g，室温18—23℃。

（2）STZ：美国sigma公司产品。临用前低温（0℃）以PH4.2的枸橼酸缓冲液配成2%的溶液。

（3）还原性辅酶Ⅱ。

（4）硝基四唑氮蓝。

（5）碘化乙酰硫代胆碱。

1.2中药复方水煎剂制备

中药复方由女贞子、人参、黄芪、三七、枸杞、淫羊藿等组成。各味中药浸泡1小时后，共煎两次，合并两次滤液浓缩至3.5g/ml。

1.3模型制作及实验方法

大鼠禁食12小时后，2%链脲佐菌素（STZ）溶液按60mg/kg腹腔内一次注射，造模后第7天禁2小时，眶后静脉丛采血测血糖，血糖高于11.1mmol/l者作为实验对象。按血糖随机分为实验对照组，n=16；实验组，n=17。实验组大鼠每天定时以中药复方水煎剂17.7g/kg（1.0ml）灌胃一次。实验对照组同时灌以等量自来水。正常组大鼠自由进食水。给药2个月，分别于给药后第3周，8周测禁食2小时血糖。2个月检测各组大鼠阴茎勃起潜伏期，取病理用酶组织化学方法观察阴茎海绵体NOS和球海绵体肌AchE活性。

1.4大鼠阴茎勃起潜伏期的观察大鼠阴茎根部脱毛后，用多用仪电极刺激其两侧，局部电刺激条件为：电流强度12mA，电压40U，频率128HZ，波宽15ms，观察刺激开始至阴茎勃起需要的时间。采用双盲，每天定时测量一次，连测5天，取平均值。

1.5阴茎海绵体NOS活性测定将阴茎海绵体组织进行恒冷（-40℃）横行冰冻切片，片厚10μm，将其贴于载玻片上，室温干燥后，将切片放入反应液中（NADPH7mg，NBT2.1mg，TritonX—10025ml，TrisHCL缓冲液，PH8.07ml），37℃水浴中反应约90分钟，树胶封片。

1.6球海绵体肌乙酰胆碱酯酶活性测定（Karnovsky—Roots直接染色法）将球海绵体肌取出后放入4%多聚甲醛中固定24小时后进行恒冷（-40℃）纵行冰冻切片，片厚10um，将其贴于载玻片上，室温干燥，放入Karnovsky—Roots液（0.1mmol/L顺丁烯二酸缓冲液6.5ml，1.0mol/L柠檬酸钠0.5ml，30mmol/L硫酸铜1ml，蒸馏水1ml，5mmol/L铁氰化钾1ml，硫代乙酰胆碱5mg），37℃孵育，树胶封片。

1.7酶组化切片采用图象处理与分析系统，在400X光学显微镜下，以切片的空白处为基准进行背底校正，取切片上终板区或平滑肌细胞区测其灰度值，每张切片上取10个视野，计算其平均值。

1.8血糖测定采用葡萄糖氧化酶法。试剂盒由北京精细化学品有限责任公司提供。

1.9统计学处理各实验室数据以x-±s表示，t检验。

2结果

2.1中药复方对阴茎勃起潜伏期的影响与实验对照组比较，中药组阴茎勃起潜伏期明显缩短。

2.2中药复方对阴茎海绵体NOS及球海绵体肌AchE活性的影响与实验对照组比较，中药组大鼠平滑肌细胞及神经肌肉接头着色深。

2.3中药复方对DM大鼠血糖的影响与实验对照组比较，中药组血糖略低（P>0.05），表明本中药复方无明显降糖作用。

3讨论

本实验观察到糖尿病大鼠阴茎勃起潜伏期延长，中药复方煎剂能明显缩短糖尿病大鼠阴茎勃起潜伏期，提高NOS活性，可能通过提高NOS活性，增强NO的作用，促进阴茎海绵体平滑肌松弛，表现出对糖尿病性ED的防治作用。本中药复方还能提高AchE活性，增强球肌收缩，从而增强勃起硬度，因而对DM大鼠ED起到防治作用。本方剂降糖作用不明显，提示其对DM大鼠ED的防治作用不是通过降血糖来完成的。

参考文献

[1]vinikA,RichardsonD.Erectiledysfuntionindiabetes[J].DiabetesReu,1998,6:16-33.

[2]BurnettAL,LowensteinCJ,BredtDS,ChangTS,SnyderSH.NitrilOxide:aphysiologilmediatorofpenileerection.Science，1992，257:401-3.