直肠癌患者化疗前后T淋巴细胞亚群变化分析

直肠癌患者化疗前后T淋巴细胞亚群变化分析

曾梦如1李伟征1（通讯作者）罗潇1黄丽霞2黎阳1

1湛江中心人民医院检验科广东湛江524037；2湛江中心人民医院体检中心广东湛江524037

摘要：目的：直肠癌患者化疗前后T淋巴细胞亚群变化分析。方法：运用流式细胞仪检测直肠癌术后患者化疗前及化疗15天后外周血T淋巴细胞亚群变化。结果：直肠瘤患者化疗后CD3+、CD4+及CD4+/CD8+较化疗前升高不少、只有CD8+较化疗前稍微降低，CD3+、CD4+及CD4+/CD8+差异有统计学意义（P<0.05），CD8+却差异无统计学意义（P>0.05）。结论：通过了解直肠癌患者化疗前后的免疫功能状态，以确保化疗的治疗的效果。

关键词：直肠癌；化疗；T淋巴细胞亚群

T淋巴细胞（TL）是由骨髓的淋巴样干细胞在胸腺中发育而来，因此也称胸腺依赖性淋巴细胞（TDL）。参与了机体免疫系统防御，发挥了很重要的作用。近几年，肿瘤免疫治疗的应用在肿瘤治疗方面取得迅速的发展，势必加快强了对肿瘤患者的免疫功能状态的了解。目前肿瘤科都是通过测定T淋巴细胞亚群来判断肿瘤患者的免疫功能状态。本研究通过了解直肠癌患者化疗前后T淋巴细胞亚群变化，便以掌握直肠癌患者化疗前后的免疫功能状态。

一、材料与方法

1.标本来源：收集2014年1月至2016年1月在我院肿瘤科直肠癌患者标本58例，所有患者均经病理学确诊，其中男性35例，女性23例，年龄29～74岁，平均55.16岁。

2.仪器试剂：贝克曼公司流式细胞仪FC500，以及其配套试剂CD45/CD4/CD8/CD3四色组合试剂，在有效期内使用。

3.检测方法：在检测管里加入20ul荧光标记单克隆抗体100ulEDTA-k2抗凝全血，再加入100ulEDTA-k2抗凝全血，室温避光孵育15min，溶血10min，然后洗涤2遍，待测。流式细胞仪分析用Flow-check进行光路一流路校准，每个样本检测5000个细胞，采用散射光（FSC／SSC）阈值设门，检测活性T淋巴细胞。

4.统计学处理：应用SPSS20.0统计软件进行t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

二、结果

结果表明，直肠瘤患者化疗后CD3+、CD4+及CD4+/CD8+较化疗前升高不少、只有CD8+较化疗前稍微降低，CD3+、CD4+及CD4+/CD8+差异有统计学意义（P<0.05），CD8+却差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

三、讨论

肿瘤免疫学机制表明，肿瘤的发生、发展和机体的免疫功能状态存在着非常密切的关联，这种关联对肿瘤的发生、发展、转移、疗效及预后有直接影响[1]。目前在肿瘤科细胞免疫治疗成为抗肿瘤免疫的一种重要方式，因为T淋巴细胞具有免疫监视功能，能够有效地识别肿瘤，细胞，待肿瘤细胞刺激T淋巴细胞之后，T淋巴细胞能够转化为可以攻击并杀伤肿瘤细胞的致敏淋巴细胞。所以说，T细胞亚群是抗肿瘤免疫中重要的一类淋巴细胞。机体免疫功能状态的变改变是引起恶性肿瘤的主要原因之一。有学者的研究报道指出：CD3+、CD4+淋巴细胞减少将会导致机体免疫力的下降，而CD8+则可通过自身和抑制因子在免疫反应中起到负向作用，抑制CD4+细胞和B细胞的功能，产生细胞免疫反应，故而当机体的CD8+细胞呈现出明显增多现象时，机体的肿瘤细胞也在持续增长，而肿瘤细胞增殖过程中又会诱导以及促进CD8+细胞的增殖，进而又导致肿瘤细胞的增殖。而CD4+和CD3+细胞则具有一定的抗肿瘤效果，抑制机体的免疫应答，因此当机体患肿瘤后，机体的免疫系统出现紊乱现象，而外周血T淋巴细胞亚群也开始发生变化。

本研究结果表明，直肠瘤患者化疗后CD3+、CD4+及CD4+/CD8+较化疗前升高不少、只有CD8+较化疗前稍微降低，CD3+、CD4+及CD4+/CD8+差异有统计学意义（P<0.05），CD8+却差异无统计学意义（P>0.05）。肿瘤与免疫的关系复杂，一般认为免疫功能低下或抑制均有可能导致肿瘤发生，本研究提示了直肠癌患者在化疗前确实存在免疫功能低下表现，符合了免疫力低下的人群肿瘤发生率高。本研究提示了直肠癌患者在化疗后免疫功能相应提升，有学者认为化疗药物诱导凋亡的肿瘤细胞能够有效诱发免疫应答，增加抗肿瘤免疫性并与免疫治疗起协同作用，促进T细胞免疫功能的恢复[2]，因此机体在化疗后免疫系统得以重建，淋巴细胞自稳增生及诱生记忆样表型T细胞，使淋巴细胞逐渐恢复正常。，故化疗一段时间后细胞免疫功能可逐步恢复。

总而言之，直肠癌患者在化疗15天后其免疫功能得到一定程度的改善，表明外周血T淋巴细胞亚群水平与细胞免疫功能存在一定关联，我们通过检测直肠癌患者T淋巴细胞亚群化疗前后的变化，了解机体的免疫功能状态，对直肠癌的诊断、治疗、预后、疗效均有一定的指导作用。

参考文献：

[1]于渊，李岩，荣风年，等．自体CIK细胞治疗对卵巢癌调节性T细胞的影响[J]．山东大学学报（医学版），2010，5：026．

[2]冯勤梅，狄文．化疗对肿瘤免疫功能影响的研究进展[J]．国际妇产科学杂志，2009.36（6）：462—464．