乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV-DNA和HBeAg的相关性分析

乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV-DNA和HBeAg的相关性分析

王敏

王敏(黑龙江省大庆油田总医院集团龙南医院163453)

【中图分类号】R512.6+2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2010）32-0249-02

既往研究中显示前S1抗原主要存在于血清HBV表面，前S1抗原与HBV-DNA、HBeAg检测率高度符合，是一项十分重要的病毒复制指标，可作为HBeAg和HBV-DNA检测的补充和对照。本实验通过荧光定量PCR检测HBV-DNA及用酶联免疫法(ELISA)检测HBeAg，Anti-HBe及前S1抗原，对前S1抗原与HBV-DNA，HBeAg进行相关性分析，探讨前S1抗原在乙型肝炎病毒检测中的意义。

1材料和方法

1.1对象

本组对象为在我院治疗的207例乙型肝炎患者，乙肝表面抗原(HB-sAg)阳性，年龄12～70岁，中位年龄42岁。对照组为80例健康体检者，年龄22～60岁，中位年龄40岁，乙型肝炎病毒标志物均为阴性。且ALT，AST水平在正常范围内。

1.2标本采集

空腹下取静脉血3mL，3000r／min离心10min，分离血清检测用。

1.3仪器和试剂

采用深圳匹基生物工程有限公司的HBV-PCR荧光定量检测试剂盒，用RocheLightCycler荧光PCR检测仪检测HBV-DNA；用上海科华生物有限公司提供的试剂盒检测HBeAg、Anti-HBe；用上海复星长征医学科学有限公司提供的试剂盒检测前S1抗原。

1.4检测方法

1.4.1HBV-DNA的检测

HBV-DNA采用实时荧光定量PCR法检测。①标本处理。②扩增试剂制备及加样：HBV-PCR反应液、Taq酶及VNG。③PCR扩增：扩增产物与特异的寡核苷酸探针进行杂交。④测定与探针结合的扩增产物，测定的线性范围为1.0×103～5.0×107copies／mL，若检测标本大于5.0×107copies／mL，报告为>5.0×107copies／mL。

1.4.2前S1抗原、HBeAg、Anti-HBe的检测：采用酶联免疫法。

1.4.380名乙肝病毒标志物均为阴性的健康人血清再测前S1抗原。

1.5统计学方法

采用SPSS11.0软件进行相关统计学分析。两种标志物的显著性关联性采用配对资料的X2检验。

2结果

2.1前S1抗原与HBeAg相关分析

在HBV-DNA阳性的患者中，HBeAg阳性、Anti-HBe阴性的血清中，前S1抗原的阳性率占69.5％；Anti-HBe阳性、HBeAg阴性的血清中，前S1抗原的阳性率占61.5％，两组经X2检验，差异无统计学意义(P>0.05)见表1。

表2207例HBV-DNA阳性与HBeAg、前S1抗原相关分析

从表2可以看出，HBsAg阳性、HBeAg阳性、Anti-HBe阴性的患者HBV-DNA的拷贝数一般在107及107cpoies／ml以上。而在HBV-DNA的低拷贝(103～106copies／ml)中，前S1抗原的阳性率要明显高于HBeAg的阳性率，经X2检验，P<0.05，具有统计学意义，提示对无条件检测HBV-DNA而HBeAg阴性的血清，检测前S1抗原，可对乙肝病毒的复制起到补充作用。

2.2对照组前S1抗原检测结果

80名乙肝病毒标志物均为阴性的健康人血清前S1抗原结果均为阴性。

3讨论

HBV外膜蛋白包括S、前S2和前S13种成分，前S1蛋自在病毒侵入肝细胞中起重要作用，含有前S1的蛋白主要存在于Dane颗粒和管型颗粒上，前S1蛋白在病毒感染、装配和刺激机体产生免疫反应等方面起十分重要的作用。从表l可以看出，HBeAg阳性、Anti—HBe阴性的血清、HBeAg阴性、Anti—HBe阳性的血清前S1抗原的阳性检出率相似，两组经X2检验，差异无统计学意义(P>0.05)与文献报道一致。说明前S1抗原与HBeAg无明确的相关。

目前临床上用于评估HBV复制的指标主要有HBV-DNA和HBeAg。HBeAg与HBVDNA含量呈正相关，HBeAg阳性表示HBV活动性复制，提示完整病毒颗粒存在。虽然定量PCR法检测HBV-DNA已成为目前判定HBV复制最重要和可靠的指标，但由于需要较高的实验条件，许多基层医疗单位尚不能开展。传统上认为HBeAg阴性，即可代表病毒复制已停止。从本实验可以看出HBeAg阴性的血清，并不代表病毒没有复制(见表2)。在病毒高拷贝数的状态下，HBeAg的阳性率和前S1抗原的阳性率几乎没有差异；但在低拷贝数的状态下(103～106copies／mL)，前S1抗原的阳性率要明显高于HBeAg的阳性率，且经过X2检验，具有统计学意义。研究证实，HBeAg阴性的慢性乙肝患者存在前C区末端1896位发生G—A点突变，产生一个新的终端密码子，阻断HBeAg形成。虽然HBV前C区变异导致不能产生HBeAg，但不影响HBV的复制和传播。所以在HBeAg阴性的血清中，HBV-DNA仍可为阳性。另外，乙型病毒肝炎血清标志物全阴性的健康人血清中，前S1抗原的检测全为阴性，说明前S1抗原的假阳性率并不高。因此，在没有条件使用PCR方法进行HBV-DNA定量检测的情况下，建议常规检测乙型病毒血清标志物应包括前S1抗原，这样对临床诊断会更有价值。