人类乳头状瘤病毒、阴道毛滴虫与宫颈细胞学的相关性研究

人类乳头状瘤病毒、阴道毛滴虫与宫颈细胞学的相关性研究

姚锋张玉泉张建林杨益梅王姗姗陈程张俊荣

姚锋张玉泉张建林杨益梅王姗姗陈程张俊荣南通大学附属医院妇产科江苏南通２２６００１

【摘要】目的探讨人类乳头病毒或者阴道毛滴虫与宫颈细胞学改变的相关性.方法收集本院８４６０例患者的宫颈脱落细胞及阴道分泌物标本.生理盐水悬滴法鉴定阴道毛滴虫,HCⅡ法鉴定人类乳头病毒,液基薄层细胞术鉴定宫颈细胞学改变.结果高危型HPV感染率(３４．６５％)远高于于阴道毛滴虫的感染率(２．９８％)(P＜０．００１).HPV(OR５０．７１６)、TV(OR３．２５８)单个感染或者HPV、TV(OR１０１．０５８)共同感染均与宫颈细胞学阳性改变有关.HPV感染导致的细胞学检测阳性主要集中在ASCUS３６．４３％(５１３/１４０８)、LSIL４４．８９％(６３２/１４０８)、HSIL１３．８５％(１９５/１４０８).而TV感染导致的细胞学检测阳性主要集中在ASCUS６５．５２％(３８/５８).结论HPV和TV感染均可以导致宫颈细胞学检查阳性,HPV比TV更容易导致宫颈细胞学检查阳性,且细胞学改变比TV较重.【关键字】阴道毛滴虫;人类乳头状瘤病毒;宫颈细胞学;薄层液基细胞术CorrelationstudyofHumanpapillomavirus、TrichomonasvaginalisandcervicalcytologyYaoFeng;ZhangYu－quan;LiHong－yu;ZhangJian－lin;YangYi－mei;Wangshan－shan;ChenCheng;ZhangJun－rongD【eApbasrttrmacetnt】Oobfjgeyctniaveecologyandobstetrics,Affiliatedhospitalofnantonguniversity,Nantong,２２６００１TostudytherelativitybetweenHumanpapillomavirusandcervicalcytology,andtherelativitybetweenTrichomonasvaginaＧlisandcervicalcytology．MethodsExfoliatedcellsincervixuteriandVaginalfluidof８４６０patientswerecollected．Trichomonasvaginaliswasdetectedbythehangingdropmethod．HumanpapillomaviruswasdetectedbyHybridcaptureⅡ．ExfoliatedcellsincervixuteriweredetectedbyThinprepcytolＧogytest．ResultsInfectionrateofHumanpapillomavirus(３４．６５％)washigherthanthatofTrichomonasvaginalis(２．９８％)(P＜０．００１)．InfectionofHumanpapillomavirus(OR５０．７１６)orTrichomonasvaginalis(OR３．２５８)alonecanbethereasonofpositivecervicalcytologydetection．AndInfectionoftwofactorstogether(OR１０１．０５８)also．３６．４３percentofthepositivecervicalcytologydetectionresultscausedbyinfectionofHumanpapillomaviruswasASCUS．４４．８９percentofthatwasLSIL．And１３．８５percentofthatwasHSIL．６５．５２percentofthepositivecervicalcytologydetectionresultscausedbyinfectionofTrichomonasvaginaliswasASCUS．ConclusionBecauseofinfectionofHumanpapillomavirusorTrichomonasvaginalis,theresultsofcerＧvicalcytologydetectionwaspositive．ItiseasierforinfectionofHumanpapillomavirustobringaboutcervicalcytologydetectionpositivethanforinfecＧtionofTrichomonasvaginalis．TheresultofcervicalcytologydetectionbecomingpositivecausedbyinfectionofHumanpapillomaviruswasmoreseriousthant【hKaetybwyoirndfse】ctionofTrichomonasvaginalis．Humanpapillomavirus;Trichomonasvaginalis;cervicalcytology;Thinprepcytologytest【中图分类号】R３７３【文献标识码】B【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１０－０３４１－０２

宫颈癌是常见的妇科癌症,由经子宫颈上皮内瘤样病变、原位癌、浸润性癌缓慢逐渐发展而成,潜伏期长达十几年[１].近年来研究发现,人类乳头瘤病毒(Humanpapillomavirus,HPV)的感染与宫颈癌有非常密切的关系．目前发现有超过１００种以上的HPV亚型,大部分对人体无害,其中可致宫颈癌的亚型被称为高危型,常见的亚型有１６、１８、３１、３３、３５、３９、４５、５１、５２、５６、５８、５９和６８亚型[２].除了HPV外,阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis,TV)感染也是人类常见的性传播疾病.TV感染是影响人类生殖健康特别是妇女身心健康的常见疾病[３].由于一方面,临床过于重视HPV与宫颈癌的相关性,另一方面,TV的感染率远低于HPV感染率.因此,关于TV与宫颈细胞学改变的相关性常被临床忽略.本文选用液基薄层细胞制片术的细胞学检查结果作为宫颈癌筛选监测指标,以观察宫颈细胞学变化与HPV和TV感染的相关性.

１资料与方法

１．１研究对象２０１０年１月至２０１５年５月我院就诊和健康体检的妇女８４６０例,年龄２６~６２(平均４３．８±７．２)岁１．２研究方法１．２．１液基细胞术用ThinPrep专用采样器收集宫颈外口及宫颈管的脱落细胞,洗入装有ThinPrep保存液的小瓶中;经ThinPrep２０００自动制片系统处理,由专门的细胞学医师阅片,采用２００１年国际癌症协会推荐的TBS(TheBethesdaSystem)诊断系统进行描述[４,５].细胞学分类分为未见癌细胞或者癌前病变(negativeforintraepitheliallesionsandmalignancies,NILM);无明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞(atypicalsquamouscellsofundeterminedsignificance,ASCUS);不典型上皮细胞(atypicalglandularcells,AGC);低度鳞状上皮内病变(low－gradesquamousintraepitheliallesions,LSIL);不典型鳞状上皮,不除外高度上皮内病变(atypicalsquamouscellsofundeterminedsignificance,cannotexcludehigh－gradesquamousintraepitheliallesions,ASCH);高度上皮内病变(high－gradesquamousintraepitheliallesions,HSIL).

１．２．２TV鉴定由妇产科医生采集受试对象阴道分泌物,先用无菌生理盐水清洗外阴及阴道口或用无菌干棉球将阴道及宫颈口周黏液彻底去除,再用２根无菌棉拭子采集患者阴道壁下三分之一处尽可能多的分泌物标本,放在盛有灭菌生理盐水的试管内立即送检.在洁净载玻片中央滴１~２滴生理盐水,用无菌棉签取就诊女性阴道分泌物,置载玻片上生理盐水中涂抹,厚薄应均匀,厚度以染色后不见重叠细胞为宜,然后加盖片在低、高倍镜下检查,可疑标本进一步作革兰染色或者培养确认,同时每位调查对象检查三片.１．２．３HPV鉴定使用窥器暴露宫颈,用专用的HPV采样刷置于宫颈口,逆时针方向转３圈,并停留１０s.把采样刷放入专用的标本储存瓶里,折断采样刷多余的部份,将采样刷留在标本储存瓶里,以保留足够量标本.盖好盖子,作好标记送检.高危型HPV的DNA测定应用杂交捕获法(HybridcaptureⅡ,HCⅡ),检测仪器采用美国Digene公司制造的HybridCaptureRSystem基因杂交信号放大系统(型号DML２０００TM),HPV测定试剂盒购于上海健仪公司,操作方法严格按试剂盒说明书进行.判断标准:光量读数与阴性测定值比值(RLU/CO)＞１．０为阳性.１．２．４统计学方法所有数据均采用SPSS１７软件包进行处理,组间比较采用四格表资料的卡方检验或者Fisher确切概率法检验,P＜０．０５表示有统计学意义.计算每个因素的OR值.２结果本研究共收集到标本８４６０例,高危型HPV感染率为３４．６５％(２９３１/８４６０),TV感染率为２．９８％(２５２/８４６０).HPV远高于于TV的感染率(P＜０．００１).HPV感染的中宫颈细胞学检查阳性率为４８．５２％(１４２２/２９３１),TV感染的宫颈细胞学检查阳性率为２３．０２％(５８/２５２).HPV感染的宫颈细胞学检查阳性率高于TV感染的宫颈细胞学检查阳性率(P＜０．００１).

３讨论

子宫颈癌是妇科常见恶性肿瘤之一,目前宫颈癌前病变的筛查仍是降低宫颈癌发病率的关键.表五HPV＋因素影响导致细胞学阳性的OR值宫颈细胞学技术的发展为早期发现宫颈病理学改变成为了可能.２０世纪９０年代之前,细胞学技术依然沿用最早巴氏制片法,它是用刮板沿宫颈口旋转取材,将获取的标本均匀涂在玻片上,固定染色后观察.２０世纪９０年代以后,制片技术突飞猛进,薄层细胞学检测系统大大提高了制片质量,明显提高了异常细胞检出率,减少假阴性出现.液基细胞术的出现为早期发现宫颈细胞学异常,为早期成功干预宫颈癌发生提供了有利条件[６].早期发现宫颈癌感染因素和宫颈癌细胞学鉴定同样重要.基于HPV与宫颈癌相关性极高,HPV筛查已被很多国家重视[２].HCⅡ法是目前唯一经美国食品和药品监督管理局和中国食品药品监督管理局共同认证的领先检测技术,这项分子酶联免疫吸附技术通过将核糖核酸探针与单束HPV脱氧核糖核酸杂交,随后通过化学发光检测到核糖核酸/脱氧核糖核酸杂交物.HCⅡ的临床敏感度很高,大多数发表的结果显示敏感度超过９５％[７].它弥补了细胞学检查的不足,使宫颈癌在感染期而尚无细胞病变时即敲响警钟,使检验者远离宫颈癌健康地生活.此方法科检测HPV１６、１８、３１、３３、３５、３９、４５、５１、５２、５６、、５８、５９、６８共１３种高危险亚型.随着我国社会生活的更加开放和自由,性传播疾病如HPV、TV、梅毒、淋病等发病率增长速度也更快.HPV和TV同样是性传播疾病,因此它们与宫颈细胞学改变的相关性有可能具有一定的相似性,但是由于TV的在人群中感染率远远低于HPV感染率,因此TV与宫颈细胞学改变的相关性很容易被临床忽视.本研究共收集到标本８４６０例,高危型HPV感染率为３４．６５％(２９３１/８４６０),TV感染率为２．９８％(２５２/８４６０).高危型HPV远高于于TV的感染率(P＜０．００１).HPV感染的中细胞学检查阳性率为４８．５２％(１４２２/２９３１),TV感染的细胞学检查阳性率为２３．０２％(５８/２５２).HPV感染的中细胞学检查阳性率高于TV感染的细胞学检查阳性率(P＜０．００１).由表二至表六的数据可知在不同的背景下计算出的HPV和TV阳性感染得到细胞学阳性的OR值不同.表二中HPV、TV双重因素影响导致细胞学阳性的OR值最高.若考虑一个感染因素的感染背景,计算另一感染因素导致细胞学阳性的OR值,OR值反而降低.如表四中的OR值低于表三中的OR值.表六中的OR值低于表五中的OR值.由此可判断HPV和TV感染因素导致细胞学检测阳性没有协同效应.但是由表一中OR值远比其他表格中OR值较高,可知HPV和TV感染因素导致细胞学检测阳性具有叠加效应.表五中OR值比表二中OR值高,可以得出HPV比TV更容易导致宫颈细胞学检查阳性.由表一看出HPV感染导致的细胞学检测阳性主要集中在ASCUS３６．４３％(５１３/１４０８)、LSIL４４．８９％(６３２/１４０８)和HSIL１３．８５％(１９５/１４０８).而TV感染导致的细胞学检测阳性主要集中在ASCUS６５．５２％(３８/５８).HPV感染比TV感染更容易导致LSIL和HSIL,即HPV感染比TV感染更容易导致宫颈上皮内瘤变(cervicalintraepithelialneoplasia,CIN).LSIL对应的宫颈病理学改变是CINⅠ,HSIL对应的宫颈病理学改变是CINⅡ和CINⅢ.这就说明HPV更容易导致宫颈癌癌前病变.TV感染主要导致ASCUS,即细胞核增大、染色质轻度增加和核周晕等,还不是上皮细胞的非典型增生.综上所述,HPV和TV感染均可以导致宫颈细胞学检查阳性,HPV比TV更容易导致宫颈细胞学检查阳性.TV感染导致的细胞学改变轻微,而HPV感染导致的细胞学改变相对TV感染较重.参考文献[１]SreedeviA,JavedR,DineshA．EpidemiologyofcervicalcancerwithspeＧ[cialfocusonIndia．IntJWomensHealth．２０１５Apr１６;７:４０５－１４．２]WatermanL,VossJ．HPV,cervicalcancerrisks,andbarrierstocarefor[lesbianwomen．NursePract．２０１５Jan１６;４０(１):４６－５３３]LuoL,ReillyKH,XuJJ,WangGX,DingGW,WangN,WangHB．PrevalenceandcorrelatesofTrichomonasvaginalisinfectionamongfemalesexworkersinacityofYunnanProvince,China．IntJSTDAIDS．２０１５May７．[Epubaheadofprint][４]KitchenerHC,GittinsM,DesaiM,SmithJH,CookG,RobertsC,TurnbullL．Astudyofcellularcountingtodetermineminimumthresholdsforadequacyforliquid－basedcervicalcytologyusingasurveyandcountingprotocol．HealthTechnolAssess．２０１５Mar;１９(２２):[５]BharVS,GuptaN,SinghMP,NijhawanR,SrinivasanR,SuriV,BarＧwardA,SoodS,RajwanshiA．Humanpapillomavirus(HPV)types１６and１８inliquid－basedcervicalcytologysamples．VirchowsArch．２０１５Mar１１．[Epubaheadofprint][６]OgemboRK,GonaPN,SeymourAJ,ParkHS,BainPA,MarandaL,OgemboJG．PrevalenceofHumanPapillomavirusGenotypesamongAfriＧcanWomenwithNormalCervicalCytologyandNeoplasia:ASystematicReviewandMeta－Analysis．PLoSOne．２０１５Apr１４;１０(４)[７]YuS,KwonMJ,LeeEH,ParkH,WooHY．ComparisonofclinicalperformancesamongRocheCobasHPV,RFMPHPVPapilloTyperandHybridCapture２assaysfordetectionofhigh－risktypesofhumanpapilＧ