锦鸡儿治疗大鼠复合物型肾小球肾炎机理的实验研究

锦鸡儿治疗大鼠复合物型肾小球肾炎机理的实验研究

任建梅1胡荫2李婧1吴骏3

任建梅1胡荫2李婧1吴骏3

（1内蒙古包头医学院第一附属医院中心实验室内蒙古包头014010)

(2宁波大学315211；3内蒙古包头医学院麻醉学系内蒙古包头014010）

【中图分类号】R692.3+1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2009)18-0025-02

【摘要】目的用大鼠血清病肾炎的动物模型，探索锦鸡儿煎剂治疗大鼠复合型肾炎的机理。方法牛清血白蛋白诱导建立大鼠复合物型肾炎模型。结果锦鸡儿治组，能降低复合物型肾炎大鼠的尿蛋白含量及血清中IL-6的含量，与模型组比较有显著性差异（P<0.01）。结论锦鸡儿煎剂对大鼠复合型肾炎有良好的治疗作用。其可降低体内细胞因子的含量，应是锦鸡儿煎剂治疗大鼠复合型肾炎的作用环节的机理之一。

【关键词】锦鸡儿煎剂大鼠血清病肾炎尿蛋白IL-6

锦鸡儿是一种植物，具有祛风、活血利湿等功效。中国人民解放军第二九一医院曾报道用锦鸡儿治疗系统性红斑狼疮，取得较好疗效，且无副作用[1]。包头医学院第一附属医院的大夫也曾对锦鸡儿治疗类风湿性关节炎进行了临床观察，证明锦鸡儿属植物在缓解本病的症状上有良好的治疗效果，长期应用未见不良反应[2]。并通过实验药理学研究证明锦鸡儿具有抗炎作用及免疫功能抑制作用[3,4,5]。日本学者SnsumuKitanaka等也证明锦鸡儿乙醚提取夜对小鼠角叉菜胶性足跖肿胀有明显抗炎作用[6]。

慢性血清病肾炎(chronicserumsicknessglmerulonephritis）模型是一种传统而典型的肾炎模型。循环免疫复合物沉积是肾炎主要发病机理之一，血清病肾炎模型就是这种经典肾炎发病机理学说的代表性动物模型，它与临床常见的肾小球肾炎有相似的发病机理及病理过程，广泛用于研究肾炎发生进展机制及观察药物疗效等实验。我们采用此模型探讨锦鸡儿对大鼠血清病肾炎治疗机制，结果如下:

1材料与方法

1.1动物Wistar大鼠，雄性，体重（160±20g），由包头医学院院动物实验中心提供。

1.2试剂取锦鸡儿根切碎后用水煎煮两次，每次30分钟，将两次水煎剂合并后调整浓度为500%。牛血清白蛋白（BSA），考马斯亮蓝，IL-6，美国sigma公司产品，阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA，自制）。

1.2.1肾病模型制作参考文献[7]执行。将1mgC-BSA溶于0.5mlPBS中，与等量不完全弗氏佐剂融化后，给大鼠多点皮下注射预免疫。1周后，隔日1次尾静脉注射C-BSA3.5mg/只，共4周。

1.2.2动物分组与给药预免疫后，取30只雄性大鼠，随机分组，分正常对照组，模型组，锦鸡儿煎剂组，每组10只。正常对照组，隔日1次尾静脉注射等渗盐水，直到5周末；模型组，每次隔日1次尾静脉注射C-BSA前1小时，灌胃给等渗盐水，2ml/100g体重，每天一次，直到5周末；锦鸡儿煎剂组，每次隔日1次尾静脉注射C-BSA前1小时，灌胃给药，2ml/100g体重，每天一次，直到5周末。

1.3观察指标

1.3.124小时尿蛋白定量收集24小时尿液，离心取上清，用考马斯亮蓝比色法测定尿蛋白定量，每周1次。

1.3.2血清中IL-6含量测定采用ELISA夹心法，操作按产品说明进行。

1.3.3肾组织学检查5周末处死大鼠取肾组织固定，常规脱水，石蜡包埋切片，HE和PBS染色后，主要观察肾小球直径和细胞数，肾小球毛细血管壁改变情况及系膜细胞增生，新月体形成的程度几肾小管变化情况。

1.3.4统计学处理均以表示，两样本均数比较采用t检验

2结果

2.124小时尿蛋白定量与正常对照组和模型组相比，锦鸡儿煎剂组有一定降低尿蛋白的作用（P<0.01）

2.2血清中IL-6含量模型组血清中IL-6含量较正常组大鼠明显升高（P<0.01），锦鸡儿煎剂组IL-6含量下降，与模型组比差异显著（P<0.01）

2.3肾组织病理检查正常对照组未见有任何病理改变，模型组，锦鸡儿煎剂组见肾小球轻度增大，肾小球毛细血管壁有不规则增厚，肾小球见少量系膜细胞增生和炎症细胞浸润，未见新月体形成，肾小管及间质无明显改变。但锦鸡儿煎剂组炎症细胞浸润程度，肾小球囊变窄情况及系膜细胞增殖程度均较模型组轻，其中肾小球直经相差明显。

锦鸡儿煎剂对大鼠复合物型肾炎血清IL-6和尿蛋白的影响

3讨论

锦鸡儿是内蒙地区盛产的一种植物，药用其根和茎。其根性平，味微辛，具有祛风、活血利湿等功能。有研究表明[3-6]锦鸡儿有一定抗炎与免疫抑制作用。临床上用于治疗红斑狼疮[1]、类风湿关节炎[2]均取得良好效果。

IL-6主要由T、B细胞和单核巨噬细胞分泌的细胞因子。有多种调节作用，是机体细胞因子网络中的重要成员，除参与机体的炎症反应和抗感染防御外，还与自身免疫疾病和某些肿瘤发生和转归密切相关。

原发性慢性肾小求肾炎是临床上常见的类型，其病理特征主要为肾小球系膜细胞增生和系膜外基质增加[8]。该发病率高，危害大，其发病机制还不十分清楚。近研究发现，细胞因子，特别是IL-6、TNF-α在发病中占有重要地位，通过降低相关细胞因子活性来抑制系膜增生和系膜外质增加具有重要意义[9]。

本文利用动物模型进行实验研究，实验结果表明，模型组肾小球系膜细胞增生和系膜外基质增生明显，同时伴有蛋白尿，肾功能有一定损害，说明造膜是成功的。模型组与正常组对照组比较，血清中IL-6含量高。此结果进一步说明细胞因子在系膜增生性肾炎的发病中的起的重要作用。

本实验采用蛋白尿、血清中IL-6的含量、肾组织病理学改变为检测指标。结果显示，锦鸡儿可明显降低大鼠尿蛋白、IL-6的含量，改善肾功能。肾组织病理学观察可见，锦鸡儿组较模型组有不同程度改善。锦鸡儿煎剂能降低大鼠血清中IL-6的含量，IL-6参与调整机体免疫功能等作用有关。其机理复杂，值得进一步研究，推广应用。

参考文献

[1]中国人民解放军291医院内二科.锦鸡儿和卤水提取夜治疗红斑狼疮36例初步临床观察.包头科技,卫生版1975,（3-4）：35-38.

[2]杜学武,郭晓玲,郭春林等.锦鸡儿治疗类风湿关节炎临床研究[J].中国民族医药杂志,1998,4（2）：11-13.

[3]张炜平,徐继辉,田德真等.树锦鸡儿抗炎作用的研究.包头医学院学报,1992,9（2）.

[4]张炜平,徐继辉,田德真等.锦鸡儿煎剂对小鼠体液免疫功能的影响.包头医学院学报,1992,9（2）：10.

[5]胡荫,徐继辉,田德真等.锦鸡儿煎剂对小鼠细胞免疫功能的影响.包头医学,1992,16（4）：148.

[6]SusumuKitanaka（＋）－Viniferinananti-inflammatorycompoundfromcaraganachamlaguRootchem.,pharm,Bull.1990,38(2):432-435.

[7]刘杰,杜学海,傅芳婷等.人参皂甙清除反应性氧代谢产物预防大鼠性肾病.肾脏病学与透析肾移植杂志,1995：4（1）：29.

[8]黎磊石,侯凡凡.肾脏病研究进展[J].中华内科杂志,1986,44（4）：232.

[9]VenD,WoudeV,DaHaM,etal.SolubleaggregateofIgGandimmunecomplexesenhanceIL-6productionbyrenalmesangialcells[J].KidneyInt,1993,43,544.