Stathmin1基因表达对微管药物抑制细胞增殖作用的影响研究

Stathmin1基因表达对微管药物抑制细胞增殖作用的影响研究

张子旸廖欣1王启峰*

1.牡丹江医学院附属红旗医院妇产科，157011）黑龙江省牡丹江市第二人民医院，157013）

摘要：目的：研究Stathmin1基因表达对微管药物抑制细胞增殖作用的影响。方法：分析Stathmin1基因表达与微管药物联合对人肺腺癌细胞A549细胞存活率的影响。结果：0.5μM紫杉醇和去氧鬼臼毒素作用A549细胞时，细胞存活率分别为28.5%、45.8%，Stathmin1与0.5μM紫杉醇、DPPT联合作用A549细胞时，细胞存活率有所下降。结论：Stathmin1基因表达与微管药物结合，能够起到抑制细胞增殖作用，降低肿瘤药物用量。

关键词：Stathmin1基因表达；微管药物；抑制细胞增殖；影响

Stathmin1是一种细胞可溶性磷蛋白，普遍且多数存在于脊椎动物细胞中。基于不同阶段的细胞有丝分裂，其蛋白能够经由磷酸化与去磷酸化的状态进行活性转变调节[1]，可以和微管进行结合，对微管的解聚以及重组过程进行加速，或者和游离微管蛋白进行结合对微管的聚合进行阻止，达到对细胞微管动态系统有效调节的作用，从而对细胞增殖以及分化进行有效调节[2]。本文将研究Stathmin1基因表达对微管药物抑制细胞增殖作用的影响，研究如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

选取2016年5月至2017年8月收集的人肺腺癌细胞A549细胞。

1.2方法

1.2.1人肺腺癌细胞A549培养与转染

将A549细胞培养在器皿中，待其成长到4/5左右，对其进行消化处理，应用0.25%拥有EDTA的胰蛋白酶。后以6×104个/mL细胞浓度，铺设96孔板，待细胞成长到70%左右实行转染，在每个孔里加入0.5μLLipofectamine以及0.2μM干扰质粒，混匀，实行转染。转染5h后更换与之相应的紫杉醇与DPPT培养基，将其放置细胞培养箱内进行培养，1d对荧光表达现象进行观察，2d后对细胞存活率进行检测。

1.2.2MTT法检测细胞存活率

对细胞进行加药物培养2d后，吸掉原有培养基，在每个孔内加入50μL与MTT溶液，放入5%CO2，培养箱调至恒温37℃，置于其中4h，将上清液吸去，每个孔内加入150μLDMSO溶解沉淀，置于摇床上摇30min，在酶标仪上570μm处对吸光值进行检测。

1.3观察指标

①人肺腺癌细胞A549细胞存活率。

2.结果

2.1人肺腺癌细胞A549细胞存活率影响

0.5μM紫杉醇和去氧鬼臼毒素作用A549细胞时，细胞存活率分别为28.5%、45.8%，Stathmin1与0.5μM紫杉醇、DPPT联合作用A549细胞时，细胞存活率分别为21.2%与32.4%。

3.讨论

Stathmin1蛋白能够对细胞周期进行有效调节，也可以在细胞分化中起到一定作用，是一种细胞可溶性磷蛋白。紫杉醇以及DPPT这两类抗癌药物对于肿瘤细胞的抑制都作用于微管。对于紫杉醇而言，其作用是对微管聚合进行有效促进，

并且可以对微管结构进行稳定，以达到阻止抑制微管解聚成为亚单位[3]，造成微管异常排列，导致最终形成平稳的非功能性微管束，阻碍有丝分裂纺锤体的发展与形成。而去氧鬼臼毒素则是通过与微管蛋白进行结合，从而达到对微管聚合的抑制作用，让有丝分裂细胞停止在G2/M期。经由相关研究发现，DPPT应用于人肺腺癌细胞A549细胞中，效果要略差于紫杉醇[4]。

由研究分析以及数据研究结果得到，Stathmin1基因表达对微管药物抑制细胞增殖作用有一定影响，可以对细胞增殖进行降低，从而减少肿瘤药物用量。在0.5μM紫杉醇与去氧鬼臼毒素作用A549细胞时细胞存活率要高于0.5μM紫杉醇、DPPT联合作用下A549细胞存活率，由此可见Stathmin1基因表达与微管药物结合可以对细胞增殖产生良性影响。对Stathmin1基因表达进行降低，同时加入紫杉醇进行共同作用，比单独应用Stathmin1基因表达或单独应用紫杉醇，更能降低细胞生长率，促进癌细胞凋亡，减少用药剂量，效果更好。

综上所述，研究Stathmin1基因表达对微管药物抑制细胞增殖作用的影响，发现紫杉醇可以对Stathmin1基因表达进行抑制，而Stathmin1基因表达则可以对紫杉醇微管聚合进行削弱，因此Stathmin1基因表达与微管药物联合能够对细胞增殖进行抑制，减少肿瘤药物用量，为肿瘤治疗提供新的治疗形式。

参考文献：

[1]张彩凤,夏永华,李贞娟,等.StathminsiRNA抑制人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤的生长并诱导细胞凋亡[J].中国病理生理杂志,2012,28(7):1253-1257.

[2]林芳,高萍,刘昕阳,等.靶向微管解聚蛋白stathminsiRNA对Aβ1-42诱发PC12细胞损伤的保护作用[J].临床与病理杂志,2012,32(5):369-373.

[3]王波,王彬,张连斌,等.TUBB3/STMN1基因表达与非小细胞肺癌EGFR通路的相关性[J].中国肺癌杂志,2013,16(10):547-552.

[4]雷迅,范才文,田晶,等.微管不稳定蛋白stathmin基因沉默影响鼻咽癌5-8F细胞系增殖与凋亡[J].中国病理生理杂志,2012,28(7):1335-1337.