秦志浩陈燕(山东省诸城市中医院262200)
【中图分类号】R733.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)10-0446-02
浆膜腔积液是细胞病理学检查的常用标本之一。检查的首要任务是确定积液中是否存在恶性肿瘤细胞,对于存在的恶性肿瘤细胞进行分型,为临床提供诊疗依据。在诊断中,无论细胞的排列方式如何都必须遵循恶性肿瘤细胞的诊断标准,因为在一些良性病变中间皮细胞的形态是复杂多变的。
1.浆膜腔积液形成的原因
人体有胸腔、腹腔、心包腔、关节腔统称为浆膜腔。由脏层和壁层构成。在生理情况下,有少量起润滑作用的液体。在病变情况下,腔内出现液体,形成浆膜腔积液。
2.浆膜腔积液的处理方法2.1离心沉淀法
体液是临床细胞学检查的常用标本之一,目前利用体液标本收集细胞的方法很多,而离心沉淀法仍是目前普遍使用收集细胞的方法。根据我们的经验认为离心沉淀法制作一张良好的细胞学涂片,应注意的情况如下:
(1)细胞室接受标本后,应立即处理。如标本量较少,应全部离心,如送检标本量多,可以抗凝后,静置一会,将上层液弃去,底部的液体用两玻璃试管分装,2000转/分离心5分钟,去掉上清液,管口的液体可用滤纸吸去。离心速度不要过高,否则细胞聚集变形。
(2)对于含血液较多的标本,可先以1000转/分离心2分钟,使细胞很好的分离,再调至3000转/分离心5分钟,这样有利提取中间层细胞,而不至于混入过多的红细胞成分。注意要先用吸管吸去上清液后,再吸中间层细胞,决不能倾去上清液,防止中间层细胞丢失。
(3)将沉淀物吸在载波片上,以推制血涂片的方法制取,以30至45度角匀速向前推进,一般情况涂片4张即可。对于细胞成分较少的标本,吸取的沉淀物要多一点,推片角度要大一些,速度稍快,可以不留尾部,当推片至片尾时停顿,形成直线段,体积较大的细胞多聚集于此,有利于镜检者观察,反之对于细胞成分多的标本,吸取的标本要少一点,推动的角度要小一点,速度要快一点。胶冻状胸水的沉淀物粘稠,推片法制片较困难,可采用棉签将其涂匀,因含有多量的粘液,细胞成分较少,可多涂几张片子。脑脊液的沉淀物通常较少,可采用血红蛋白吸管吸取。涂片制作完成后自然晾干后固定,可不加热干燥,否则细胞固缩变形。制片良好的涂片应当厚薄适中、四周留有空隙。
3.染色方法
浆膜腔积液涂片的染色方法可根据本室的观察习惯而定,常用的染色方法有巴氏染色、苏木素伊红染色和瑞氏染色。前两种染色方法的染色质量较为稳定、透明度好。缺点是麻烦,时间较长,脱水不彻底、封片易产生雾状和褪色,影响观察和复查。瑞氏染色操作简单耗时短,细胞质内的颗粒清楚,不易褪色。但是染色质量不稳定。
4.浆膜腔积液的良性细胞成分
4.1正常间皮细胞和反应性间皮细胞
间皮细胞对各种各样的刺激很容易产生反应性增生,反应的程度取决于诱因的持续时间和强度。间皮细胞脱落的数量不定,漏出液少、渗出液多。
4.1.1正常间皮细胞细胞大小不等,12-20微米,单个细胞脱落时成圆形或卵圆形,边界清晰或绒毛状;核圆形或卵圆形,居中或偏心,核膜光滑,边界清晰、核染色质分布均匀、核仁单个到多个微核仁,胞浆丰富,着色由核周至边缘由浓渐淡,瑞氏染色胞浆为蓝色不透明。
4.1.2反应性间皮细胞细胞数量较多,单个、成团或组织碎片。细胞大小不一,从小到大可伴有巨型。巨型间皮细胞常为多核伴有正常的分裂相。成团的细胞沿平面连接,单层很少重叠,细胞之间有开窗,不规则的簇状或乳头状排列,带小丘状轮廓,群内细胞核的大小基本一致。核可以增大,着色较深,核仁单个或多个,微小到大,可明显,通常规则。胞浆丰富,瑞氏染色灰蓝色,不透明。细胞外缘可空泡变或绒毛状,偶见胞浆空泡,空泡不挤压细胞核。
4.1.3组织细胞、淋巴细胞、中性粒细胞大家都熟悉。
5.浆膜腔积液中恶性肿瘤细胞形态特征
5.1腺癌腺癌细胞的大小差异较大,排列方式多样,单个散在的癌细胞为圆形或卵圆形,胞体形态较规则:细胞核也如此,核偏位、胞浆透明。成团的细胞可呈腺腔样、梅花样、彩球样、桑椹样排列等,胞浆透明,核突出,核形较规则,分泌粘液是其特征。
5.2鳞癌高分化鳞癌易辨认,单个散在,核和胞体多形性,伴角化和固缩的核;中到低分化鳞癌与腺癌鉴别困难,但其以下特征可供提示:核染色质粗块状,着色较深,核多居中心位,胞浆致密,边界清楚,没有类似腺癌的空泡变化,成团的细胞有形成漩涡状的结构的特点。尽管如此,也常与有类似特点的恶性肿瘤细胞相混淆。
5.3小细胞未分化癌胞质极少,在癌细胞核边缘有少量的胞质或呈裸核样。成团脱落的癌细胞可排列成链状,或堆叠挤压呈镶嵌结构。胞核畸形明显呈多角形、石榴籽棱角分明或呈不规则圆形或卵圆形。染色质粗大分布不匀,有时墨水滴状或椒盐状。
5.4恶性间皮瘤浆膜腔积液中的恶性间皮瘤基本上为上皮型或上皮肉瘤样混合型。恶性间皮瘤细胞从小到大,乃至巨型细胞,形成谱系,圆形或多角形,细胞边界清楚,双核、多核易见,核居中或偏心位,核膜光滑、核边界分明。胞质量少到丰富,灰蓝色不透明,由核周到浆缘由浓转淡,印戒细胞罕见。成团的细胞与细胞之间由开窗。肉瘤型很少脱落,查不到该细胞,脱落细胞不能对此瘤做出诊断。
5.5非霍奇金恶性淋巴瘤涂片中肿瘤细胞形态单一,核形可多样,呈弥漫散在分布,不形成细胞团。仔细观察“单一性”的肿瘤细胞有明显易型性。背景常见退化变形的肿瘤细胞核碎片。
5.6霍奇金淋巴瘤典型的双核R-S细胞双核并列,形如镜中之影,故称镜影细胞。