血清结核杆菌分泌蛋白desA抗原检测诊断肺结核病的临床意义

血清结核杆菌分泌蛋白desA抗原检测诊断肺结核病的临床意义

吕连珍

（湖北省武穴市三医院435400）

摘要：目的探讨血清结核杆菌分泌蛋白desA抗原检测诊断肺结核病的临床意义。方法回顾性分析2018年1月～2019年1月在我院确诊的69例肺结核病患者临床资料，所有患者均应用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行血清结核杆菌分泌蛋白desA抗原检测，并与痰涂片和痰培养结果进行比较。结果69例患者血清样本均正常完成检测，其中检测结果血清样本阳性共59例，检测符合率达到85.51%（59/69）。血清结核杆菌分泌蛋白desA抗原检测阳性率结果均高于痰涂片和痰培养的阳性结果，其诊断一致性分别达到了92.59%（25/27）和97.30%（36/37）。结论血清结核杆菌分泌蛋白desA抗原检测诊断肺结核病具有操作简单、诊断价值高的优势。

关键词：血清结核杆菌；分泌蛋白；desA抗原；检测诊断；肺结核

[Abstract]objectivetoinvestigatetheclinicalsignificanceofdesAantigendetectioninthediagnosisoftuberculosis.Methods：theclinicaldataof69casesofpulmonarytuberculosispatientsdiagnosedinourhospitalfromJanuary2018toJanuary2019wereretrospectivelyanalyzed.AllpatientsweretestedfordesAantigensecretedproteinofmycobacteriumtuberculosisbyenzyme-linkedimmunosorptiontest（ELISA），andcomparedwiththeresultsofsputumsmearandsputumculture.Resultstheserumsamplesof69patientsweretestednormally，amongwhichatotalof59patientshadpositiveserumsamples，andthecoincidenceratereached85.51%（59/69）.ThepositiverateofdesAantigentestofserumtuberculosisbacillussecretionproteinwashigherthanthatofsputumsmearandsputumculture，andthediagnosticconsistencyreached92.59%（25/27）and97.30%（36/37），respectively.ConclusionthedetectionofdesAantigensecretedbyserumtuberculosisbacillushastheadvantagesofsimpleoperationandhighdiagnosticvalue.

[Keywords]serumtuberculosisbacillus；Secretoryprotein；DesAantigen；Detectionanddiagnosis；Tuberculosis（TB）

结核病是指由于患者受到结核杆菌感染后所引发的慢性传染病，机体各个脏器均可受累，其中以肺部最为常见，患者病灶主要呈现以渗出、增殖和变质等病理改变，严重影响肺部的功能表达，严重影响患者的生活质量和生命安全[1]。尤其是肺结核病早期病情发展缓慢、病程长且临床症状表现不一，这也导致临床诊断容易出现漏诊或误诊。目前临床对于肺结核的诊断主要依据病菌检查，随着检测技术和方法的不断发展和进步，血清学检测肺结核逐渐受到了关注和重视[2-3]。本研究就血清结核杆菌分泌蛋白desA抗原检测诊断肺结核病的临床意义展开回顾性分析，现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料

回顾性分析2018年1月～2019年1月在我院接受肺结核病诊断的102例患者临床资料，纳入标准：①所有患者均因相关体征前来我院接受肺结核相关检查；②患者均为首次诊断明确者；③患者临床资料均完整无缺。排除标准：合并严重心肝肺肾等重要脏器器质性病变者；严重免疫系统疾病者；临床资料不完整者；凝血功能障碍者；参与本研究前7d服用过影响试验结果药物者。69例患者均经病史询问、体征检查、临床表现、相关实验室检查以及影像学检查诊断明确为活动性肺结核患者，其中男43例，女26例；年龄38～68岁，平均年龄（42.22±12.21）岁；平均病程（10.08±4.77）d。

1.2方法

所有患者均于清晨采取空腹外周静脉血3mL，利用德国Sigma公司提供的离心机进行离心并分离血清备用。由专业技术人员严格按照相关实验操作步骤以及仪器和试剂的使用说明书进行实验。其中多功能酶标仪由美国BioTek公司提供，检测试剂盒由美国BD公司提供。技术人员事先将包被孔进行编号并将第1和第2孔留空，分别加入阴性对照和阳性对照各100ul，其余各孔则加入100ul的样品稀释液；将20ul血清分别加入上述各孔（除第1和第2孔），并利用微量振荡器进行震荡，30s后放置37℃恒温水浴箱内并保持30min；洗板6次后再将100ul酶结合物加入到除第1和第2孔外的其余各孔；再按照上述步骤进行进行震荡和温育；将显色剂和底物各50ul分别加入到所有孔，轻晃摇匀在37℃下进行避光反应；10min后将50ul的终止液加入到各孔中，再次轻轻震荡，确保摇匀后利用酶标仪进行各孔吸光值的测定，波长选择为450nm和630nm。

1.3评价指标

本研究结果有效性的判定标准为阳性孔OD值＞0.8，阴性孔OD值＜0.1；CUTOFF值为阴性对照组平均OD值+0.1。阳性标准：待检测血清OD值大于等于CUTOFF值；阴性标准：待检测血清OD值小于CUTOFF值。注意，若阴性对照组平均OD值不足0.05则视为0.05。

1.4统计学处理

所有数据均由2名研究人员进行记录和核对，并共同录入到研究所有电脑中，利用Excel软件进行保存以及相关结果的计算和比较。

2结果

2.1血清结核杆菌分泌蛋白desA抗原检测一般情况

69例患者血清样本均正常完成检测，其中检测结果血清样本阳性共59例，检测符合率达到85.51%（59/69）。

2.2血清结核杆菌分泌蛋白desA抗原检测结果与痰涂片和痰培养的结果比较

血清结核杆菌分泌蛋白desA抗原检测阳性率结果均高于痰涂片和痰培养的阳性结果，其诊断一致性分别达到了92.59%（25/27）和97.30%（36/37）。见表1。

3讨论

目前临床对于肺结核的诊断主要有病菌检查，该方法主要是痰涂片和痰培养，也是当前最为常用的实验室方法，但该方法最大的缺点便是时间较长，且实验结果与设备以及操作之间存在密切相关[4]。由于肺结核缺乏有效疫苗且目前尚无高特异性和高敏感性的诊断试剂，尤其是各种抗生素类药物的滥用使得耐药性结核菌不断出现，因此亟需更高完善和便捷的检测方法出现[5]。虽然也有研究指出分子生物学检测能够提高对肺结核的诊断和鉴别，但该技术对设备和技术人员的要求较高，难以全面推广尤其是基层医院；而X线检测虽然作为当前临床诊断肺结核的重要辅助手段，但由于其结果无特异性，因此也不能作为直接诊断依据。

本研究选择了血清结核杆菌分泌蛋白desA抗原检测，结果显示检测符合率达到85.51%，而且与痰涂片和痰培养的阳性结果相比，不仅阳性诊断率升高，其诊断一致性也分别达到了92.59%（25/27）和97.30%（36/37）；这说明该检测方法具有较高的临床诊断价值，而且ELISA法作为临床实验常用技术，不仅操作较为简单而且耗时不多，有利于临床各级机构开展和应用；而且随着实验诊断技术和设备的不断更新和进步，越来越多的研究表明通过对血清结核杆菌分泌蛋白进行相关检测能够显著提高肺结核的诊断率[6]。

综上所述，血清结核杆菌分泌蛋白desA抗原检测诊断肺结核病具有操作简单、诊断价值高的优势，因此值得临床推广应用。

参考文献

[1]刘毅，张旭霞，张雨晴，等.结核分枝杆菌三种蛋白在结核病血清学诊断中的评价研究[J].中国防痨杂志，2017，39（8）：815-820.

[2]罗巧，李霜君，肖彤洋，等.结核分枝杆菌4种新抗原的克隆表达及血清学评价[J].中华流行病学杂志，2018，39（4）：514-518.

[3]徐礼锋，余旭良，张峰，等.液体分枝杆菌培养管培养联合结核分枝杆菌分泌蛋白64免疫胶体金检测法在快速鉴定结核分枝杆菌中的应用[J].中国卫生检验杂志，2017，27（4）：48-50.

[4]段爱云.结核分枝杆菌T细胞斑点试验技术在结核性胸膜炎诊断中的价值分析[J].中国处方药，2018，16（5）：12-13.

[5]唐晓萌，王大成.结核分枝杆菌ESX-1分泌蛋白EspB结构和功能分析[J].生物化学与生物物理进展，2017，44（5）：414-421.

[6]袁阳，陈玲.结核分枝杆菌特异性抗原ELISA法诊断肺结核的研究进展[J].海南医学，2018，29（2）：233-235.