联合宫颈液基细胞学检查同HPV基因检测PCR技术对宁夏地区宫颈病变的研究

联合宫颈液基细胞学检查同HPV基因检测PCR技术对宁夏地区宫颈病变的研究

孙春涛杨霞李方

孙春涛杨霞李方

（宁夏自治区妇幼保健院检验科宁夏银川750001）

【摘要】目的：探讨宁夏地区宫颈疾病的发病率以及更加有效、准确、经济的诊断方法。方法：自2014年11月至2014年12月，对宁夏地区宫颈癌筛查项目1374例患者进行HPV-DNA检测和液基细胞学检查（TCT），两项检查中有一项检测结果为阳性即在宫颈组织3、6、9、12点分别取材。以病理学检查为标准，对比两种初筛方法的检测结果。结果：高危型HPV阳性率为31.4%，TCT阳性率（≥ASCUS）为32.5%；高危型HPV基因检测的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、正确诊断指数分别为90.2%、72.9%、19.3%、99.0%、0.631；TCT分别为95.7%、72.2%、19.8%、99.6%、0.671，二者联合检测方案的结果为100.00%、71.6%、19.1%、100.0%、0.716。结论：TCT与HPV-DNA检测无明显差异，但考虑到经济及医疗资源方面，仍应以HPV-DNA检测作为首选；TCT和高危型HPV联合检测可以提高宫颈疾病筛查的敏感性、阴性预测值及正确诊断指数。

【关键词】宫颈癌；液基细胞学检查；HPV-DNA检测；病理学检查

【中图分类号】R730.4【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2015）17-0027-02

子宫颈癌是人体最常见的癌瘤之一，不但在女性生殖器官癌瘤中占首位，而且是女性各种恶性肿瘤中最多见的癌瘤，由宫颈上皮不典型增生发展为宫颈原位癌和侵润癌，病理过程可长达十几年[1]，据报道，全世界宫颈癌的发病率由1980年的378000例/每年已增长值至2010年454000例/每年，年增长率约为0.6%[2]。我国宫颈癌患病率和死亡率均占世界的1/3，且疾病呈年轻化的趋势[3]。与此同时，宫颈癌的发病率还存在明显的地区差异。我国宫颈癌的发生，在地理分布上的特点是高发区常连接成片，各省宫颈癌相对高发区的市、县也常有互相连接现象。总的趋势是农村高于城市，山区高于平原。根据29个省、市、自治区回顾调查，我国宫颈癌死亡率占总癌症死亡率的第四位，占女性癌的第二位。宫颈癌的早发现、早诊治能有效的降低死亡率，农村经济落后，为减轻经济负担，因此选择一个高效、准确、经济的方法十分重要。

1.资料与方法

1.1研究对象

本次研究以2014年11月至12月宁夏贺兰、永宁、西吉、海原等市县的35～55岁的农村妇女共1374例为研究对象。

1.2研究方法

1.2.1样本采集由妇科医师在阴道扩张器的协助下充分暴露患者宫颈，用专用宫颈刷从宫颈外口插入宫颈管内约0.8cm，以宫颈外口为圆心，在宫颈鳞-柱上皮交界处及宫颈管内，按顺时针或逆时针方向连续旋转刷取5周，然后将一次性刷头取下，垂直浸泡于保存液中，核对患者信息后送病理科检测。

1.2.2液基薄层细胞学检测（TCT）细胞学诊断标准采用2001年癌症协会的伯塞斯达系统（TBS）。阳性诊断为意义不明的不典型鳞状上皮及腺上皮（ASCUS及ACCUS）以上病变[4]。根据TBS（TheBethesdaSystem）分类报告系统，分为以下6类：①未见上皮内病变及恶性病变（NILM）；②不明意义的非典型鳞状上皮细胞（ASC-US）；③非典型鳞状上皮细胞不能除外高级别鳞状上皮内病变（ASC-H）；④低级别鳞状上皮内病变（LSIL）；⑤高级别鳞状上皮内病变（HSIL）；⑥鳞状细胞癌（SCC）。

1.2.3HPV-DNA检测采用凯普高危型人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒。该试剂盒基于多重荧光技术，通过实时荧光PCR仪，进行同步核酸扩增与检测。可在同一反应管中检测12+2种高危型HPV病毒（31.33.35.39.45.51.52.56.58.59.66、68）并同时分型HPV16、18。样本经HPV-DNA提取，PCR扩增后结果判读。

1.2.4宫颈活检病理学检查液基薄层细胞学（TCT）或HPV-DNA检测阳性的受检者均由妇产科医师进行阴道镜检查，并对宫颈3、6、9、12点分别取材进行宫颈活检。组织病理学诊断分为以下3类：①正常或炎症；②CIN（宫颈上皮内瘤变，包括CINI、CINII、CINIII与原位癌）；③宫颈浸润癌（SCC）。

1.3统计学方法

采用SPSS13.0统计学软件进行数据分析，数据资料采用描述性统计方法，计算敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值来描述统计学指标。

2.结果

2.1液基薄层细胞学检测（TCT）

在1374例受检者当中，液基薄层细胞学检测阳性结果444例，阳性率32.5%，包括：223例ASC-US，55例ASC-H，109例LSIL，57例HSIL。

2.2HPV-DNA检测

1374例受检者中，431例高危型HPV阳性，阳性率31.4%。

2.3病理学检查

所有受检者中，病理CINⅡ级以上病变共92例，TCT阳性者中CINⅡ级以上病变共88例，HPV-DNA检测阳性者中CINⅡ级以上病变共83例。两种初筛方法在各病理等级下的阳性及阴性例数详见表1、表2。

3.讨论

人乳头瘤病毒（HPV）是一种无包膜的双链闭环小分子DNA病毒，主要感染人的皮肤或粘膜上皮细胞，引发感染部位的良、恶性病变。高危型HPV的持续性感染已被确定为宫颈癌发生的最主要原因。大量研究表明，超过百分之九十九以上的宫颈癌患者都存在人乳头瘤病毒感染[5]。因此对高危型HPV进行检测，能够及早发现宫颈病变。在我国，全国性宫颈HPV感染发生的情况还没有确切资料；已报道的区域性研究资料表明，山西省宫颈HPV阳性率为14.8%[6]，深圳市为18.4%[7]，台湾南部为19.3%[8]。本研究结果显示，经HPV-DNA检查，宁夏农村地区妇女，HPV感染率为31.4%，高于文献中报道的其他地区，分析原因应为，本次的研究对象为农村妇女，符合我国宫颈癌及HPV感染的流行趋势。

子宫颈液基薄层细胞学检测（TCT）是早期宫颈癌筛查的基本方法，目前国内多数医院均采用了TCT（或LCT）和TBS分类系统做诊断。该技术相较于传统的巴氏涂片法诊断准确性更高，使得宫颈癌筛查的准确性得到了较好的发展。

综合比较上述两种检测方法可以看出，TCT和HPV-DNA检测在敏感度、阳性预测值、阴性预测值、正确诊断指数均较高，特异性略差，且二者间没有明显差异。然而，由于中国医师资质水平参差不齐，多数地方没有经验丰富的阅片医师使得TCT用于宫颈癌筛查时受到了很大制约，无法进行大规模筛查且筛查准确率无法得到保证。因此在经济条件不发达，医师水平有限的地区，仍应以HPV-DNA检测为首选，HPV-DNA也逐渐成为早期筛查宫颈癌及癌前病变的必要检查项目，是最受关注和推崇的新技术[9]。而在经济条件发达，且拥有较多医疗资源的地区，由于联合筛查可以显著提高敏感度、阴性预测值、正确诊断指数。因此，二者联合筛查是最为理想的筛查方法。

【参考文献】

[1]任维.宫颈上皮内瘤变的诊治现状及进展[J].中国现代药物应用，2012,6（5）:122-123

[2]ForouzanfarMH,etal.Breastandcervicalcancerin187countriesbetween1980and2010:asystematicanalysis[J].TheLancet,2011,378(9801):1461-84.

[3]HerzogTJ,WrightJD.Theimpactofcervicalcanceronqualiyoflife-thecomponentsandmeansformanagement[J].GynecolOncol,2007,107(3):572-577.

[4]朱新霞.液基细胞学检测对宫颈感染病变的价值[J].现代医学，2013.13（2）:55-56.

[5]杜媛媛，张秩清，张莉亚.薄层液基细胞学检查联合人乳头瘤病毒检测在宫颈癌前病变筛查中的应用[J].淮海医药，2012,03；199-201.

[6]DaiM,BAOYP,LiN,etal.HumanpapillomavirusInfectioninShanxiProvince,Pepole,sRepublicofChina,apopulation-basedstudy[J].BrJCancer,2006,95:96-101.

[7]WuRF,DaiM,QiaoYL,etal.HumanpapillomavirusInfectioninwomeninShenzhenCity,Pepole,sRepublicofChina,apopulationtypicalofrecentChineseurbanization[J].IntJcancer,2007,121:1306-1311.

[8]MunozN,etal.Againstwhichhumanpapillomavirustypesshallwevaccinateandscreen?theinternationalperspective[J].IntJCancer,2004,111(2):278-285.

[9]李红娟，王雅莉，张颖.中原地区妇女宫颈癌患者人乳头瘤病毒（HPV）感染各亚型分布特点[J]。中国医学创新，2012,9（2）：83-85.