时光分辨荧光免疫法对乙型病毒性肝炎检测效果

时光分辨荧光免疫法对乙型病毒性肝炎检测效果

王旭1马可佳1江云飞1李冬梅2

王旭1马可佳1江云飞1李冬梅2

（1黑龙江省农垦总局疾病预防控制中心黑龙江哈尔滨150090）

（2哈尔滨工业大学市政环境工程学院黑龙江哈尔滨150090）

【摘要】目的：时光分辨荧光免疫对乙型肝炎检测效果临床观察。方法：回顾性从我院选取自2014年10月～2015年4月共收治的18例乙型病毒性肝炎患者，分别使用时光分辨荧光免疫法(TRFIA)和酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)进行测试，时光分辨荧光免疫法为研究组，酶联免疫吸附剂测定法则为对比组。检测后对比两组患者乙型肝炎病毒感染情况。结果：研究组检测率达到98%(17人)，对比组检测率达到64%(10人)。采用TRFIA检测法的研究组乙肝病毒阳性率要显著高于对比组。结论：由此可见TRFIA检测法可以更加有效检测患者乙肝病毒感染情况，值得广泛应用。

【关键词】乙型肝炎；FRFIA；ELISA

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2016）09-0063-02

乙型病毒性肝炎主要病因是由乙肝病毒引起的[1]。可以引起多种器官损害的一种严重疾病，属于全球性疾病，其中儿童以及青壮年为高发人群[2]。并且有恶化成肝硬化甚至肝癌的可能，严重威胁了患者的生命安全[3]。我国经济渐渐增强，人们生活质量显著提高，同时乙型病毒性肝炎患者也有明显增高的趋势。该疾病具有传染性，通过汗水，血液，唾液等皆有可能传染，一年四季都有可能发病[4]。主要病症体现为体力不支，水肿，容易疲劳。因为肝脏是消化器官，患有乙型肝炎的患者，有可能会因为胆汁分泌减少，出现食欲不振，恶心等症状。还会出现肝区疼痛等。乙型病毒性肝炎通常是特异血清病原学进行检查，其中主要包括HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc、抗-HBclgm等[5]。本文回顾性的从我院选取自2014年10月～2015年4月共收治的18例乙型病毒性肝炎患者，先后采用时光分辨荧光免疫法和酶联免疫吸附剂测定法进行检测,现将报告总结如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

回顾性从我院选取自2014年10月～2015年4月共收治的18例乙型病毒性肝炎患者，先后使用使时光分辨荧光免疫法和酶联免疫吸附剂测定法，分别成为时光分辨荧光免疫法的研究组和酶联免疫吸附剂测定法的对比组，所有患者均为乙型病毒性肝炎患者。18例患者中男性有9人，女性患者有9人，年龄在34～62岁，平均年龄为57.64±3.8岁，病程3～5年。

1.2方法

18名乙型病毒性肝炎患者先后使用时光分辨荧光免疫法和酶联免疫吸附测定法进行检测。18例患者在清晨时分不可进食，空腹之前抽取静脉血液，并分离血清紧接其后立刻分别采用时光分辨荧光免疫法和酶联免疫吸附测定法进行检测。检测流程严格按照说明书上操作。

2.结果

研究组乙肝核心抗体(HBcAb)阳性率为94%(16/18人)，乙肝e抗原(HbeAg)阳性率为50%(9/18人)，乙型肝炎E抗体(HBeAb)阳性率为34%(6/18人)，乙肝表面抗原(HBsAg)阳性率为98%(17/18人)。对比组患者乙肝核心抗体(HBcAb)阳性率为59%(11/18人)，乙肝e抗原(HbeAg)阳性率为42%(7/18人)，乙型肝炎E抗体（HBeAb）阳性率为32%(4/18人)，乙肝表面抗原(HBsAg)阳性率为64%(10/18人)。由此可见时光分辨荧光免疫法检测阳性率，要高于酶联免疫吸附剂测定法。可以更加准确检测乙型病毒性肝炎患者阳性率，值得广泛应用。

3.讨论

乙型病毒性肝炎是全球性重大疾病之一，据相关文献表明全球大概有2.8亿人，有发展成肝硬化，肝癌等严重威胁患者生命安全的疾病[6]。同时有着易复发的特点，一旦发展成肝癌将变得极其难以治愈，即便是进行手术治疗，依然有着较高的可能性复发，并且损害了患者肝组织有较高的可能出现肝功能不全的情况，因此尽早的发现病情对治疗极为重要，越早的确诊医治对治疗乙肝有着极大的影响。因此如何准确的检测乙型病毒性肝炎显得极为重要。时光分辨荧光免疫分析简称为（TRFIA），是非同位素免疫分析技术同时也是新兴生物学技术[7]。具有高灵敏度和试剂有效期长等优势，缺点是产生反应的时间较长。近几年来此检测方法被广泛运用在检测乙型病毒性肝炎应用上。这类检测方法用镧系元素来标记抗原以及抗体，并且具有发光的特点，通过时间分辨技术可以测量荧光。使用检测波长以及时间参数进行分辨。该检测方法的前身是荧光分析简称(FIA)，在FAI的基础上逐渐发展起来。并且时光分辨荧光免疫分析还具有一个特点是线性范围比较宽，在定量方面有着一定帮助。酶联免疫吸附剂测定法简称法(ELISA)，该检测技术是被Engvall和Perlman在1971年成功建立的一种生物活性物质微量测定技术。此检测技术具有价格低廉以及操作简单的优点，但是灵敏度较低，没有办法对血清学标志物采取动态监测。而时光分辨荧光免疫法可以在一定程度上弥补酶联免疫吸附剂测定的缺点。乙肝核心抗体(HBcAb)也叫做抗-HBc，若是患者被检测出抗-HBc阳性，则证明乙肝病毒此时正在复制繁殖。如果呈现弱阳性则说明以前感染过乙肝病毒，但目前已经康复，也有可能表面隐性乙肝病毒感染的表现。乙肝e抗原(HbeAg)是乙肝病毒核心颗粒中的可溶性蛋白质，若检测出HbeAg在乙肝活动期间升高，那么则表明肝细胞有着较为严重的损伤，而且具有较强的感染性。乙型肝炎E抗体(HBeAb)根据相关文献表面能，慢性乙型肝炎患者HBeAb阳性占44.6%，发生肝癌的情况可高达80%以上。通过HBeAb阳性率的增高，则证明乙型肝炎患者病毒感染时间已经长达了8～25年左右，并且也说明该患者具有一定传染性[8]。乙肝表面抗原(HBsAg)是检测时较为重要的着重点，它是乙肝病毒的外壳蛋白。虽然它本身没有传染性，但是它的出现则表明乙肝病毒有极大的可能存在。一般检测方法主要针对这四点进行检测。而时间分辨荧光免疫分析法可以准确的检测出患者乙型肝炎病毒，值得广泛应用。

【参考资料】

[1]钟水清,楼克忻.阿德福韦对慢性乙型病毒性肝炎患者血浆细胞因子及肝纤维化指标的影响[J].中国全科医学,2010.13(36):4074-4076.

[2]李莉,孙海霞,李刚.慢性乙型病毒性肝炎抗病毒治疗方案的新探索[J].广东医学,2012.33(9):1333-1335.

[3]温小凤,蒋忠胜,徐念,张鹏,柯柳,覃川,李敏基,韦静彬,莫胜林.慢性乙型病毒性肝炎肝组织炎症活动度无创诊断模型的研究[J].中国全科医学,2010.13(17):1854-1857.

[4]李刚,周立夫,张颖.彩色多普勒超声半定量评分诊断早期乙型病毒性肝炎肝硬化[J].临床误诊误治.2010.23(9):842-843.

[5]梁森,张顺祥,马起山,肖和卫.乙型病毒性肝炎病人经济负担调查问卷的信效度研究[J].中国初级卫生保健,2010.24(9):48-49.

[6]吕睿.慢性乙型病毒性肝炎抗病毒治疗进展[J].现代医药卫生,2013.29(2):220-224.

[7]刘洋铭.乙型病毒性肝炎的垂直传播机制及其防治[J].重庆医学,2011.40(16):1644-1646.

[8]袁雯霞,黄建荣.重型乙型病毒性肝炎的临床治疗现状及进展[J].现代实用医学,2010.22(1):2-4.