乙型病毒感染的检验分析

乙型病毒感染的检验分析

张新友1侯卫红2(1新疆吐鲁番地区鄯善县人民医院检验科

1形态结构

HBV具有双层衣壳，直径42nm的球形颗粒又称Dane（丹尼）颗粒，其结构特点为：

1.1外衣壳相当于病毒包膜，上面含表面蛋白（S蛋白）、前S1蛋白（Pre-S1）、前S2蛋白（Pre-S2），三者构成表面抗原（HBSAg）；

1.2内衣壳主要含核心抗原（HBCAg）、e抗原（HBEAg）。

1.3核心含双股非闭合状环状DNA和DNA聚合酶（DNAP）。

2抗原结构（着重介绍前S1蛋白）

2.1HBSAg为HBV的外衣壳蛋白，广义的HBSAg包括S蛋白、前S2和前S1分别组成的小分子、中分子和大分子HBSAg，而狭义的HBSAg是指S蛋白。

2.2前S1蛋白（亦称前-S1Ag）可与S蛋白，前S2构成大分子HBSAg，它位于HBV的最表面，可直接与肝细胞粘附，介导HBV的吸附。

3重点探讨

前S1抗原（Pre-S1Ag）与HBV其它标志物的互补性及ALT的关系。

3.1资料1某医院统计的285例中：

HBSAg（+）者，前S1Ag141例，占49.5%

大三阳58例中，前S1Ag（+）45例占77.6%

分析：（1）HBSAg阳性有以下特点：

a、说明HBV的复制，具有污染性；

b、HBV感染后的潜伏状态；（无污染性）

c、慢性肝炎（迁延性或活动性）；

d、肝炎的肝硬化或肝癌；

e、HBSAg携带者（无污染性）。

也就是，HBSAg的阳性并不是都说明HBV在复制，有污染性，部分病人的HBSAg因为其HBV，S基因码区与人肝细胞DNA单独整合或病毒整合后，即使HBV已消除，肝细胞仍可不断复制HBSAg（但此HBSAg已无临床意义），再者，若感染的病毒发生变异，可使HBSAg合成障碍或HBSAg的低表达（提醒注意：广大的HBSAg的含义，三种外衣壳蛋白的缺乏均可导致HBSAg合成障碍或低表达）。

上述情况说明：前S1Ag不仅与病毒复制及传染性有关，它也不与肝C、DNA整合，还有一点，它没有潜伏的特点。

3.2Pres1Ag与HBeAg

资料2、有人认为：HBeAg有与HBcAg75%的氨基酸序列，被普遍认为与HDV——DNA水平尚一致，是临床上表达病毒复制较实用的血清标志物指标。

那么，前S1Ag与HBeAg有何关系呢？

有报道：65例HBeAg（+）组中，前S1（+）51例，占78.46%220例HBeAg（—）组中，前S1Ag（+）89例，占40.45%

分析：220例HBeAg（—）中，前S1Ag（+）89例，占40.45%这种现象，有学者认为：这是HBV为逃避宿主的免疫反映，其C基因前C区常发生变异导致HBeAg的不表达现象。因此，这种模式（即HBeAg（—））的出现，并不意味着HBV的清除或复制水平的减低，两者S1Ag检测恰好填补了这个空白，使HBeAg（—）的感染不易漏检。使得HBeAg系统因常产生变异而产生的阴性结果对临床诊疗的误导。

3.3前S1AgG与ALT的关系

资料3：有报道150例ALT检测中（临床资料完整，指种类肝功能异常者）ALT异常47例，其中前S1Ag（+）45例，占95.7%（45/47），而前S1Ag（—）只占4.3%（2/47例）；

前S1Ag（+）、HBeAg（+），ALT异常占63.87%（30/47）

前S1Ag（+）、HBeAg（+），ALT异常仅占31.9%（15/47）

上述资料充分说明：

（1）S1Ag出现在乙型肝炎的早期，对肝细胞损害严重，次标志物的检出优于HBeAg。

（2）乙肝的发病集中表现在肝功的异常，其中ALT增高是肝功异常最敏感的指标，前S1Ag（+）的检出与ALT增高高度相关（达95.7%），而HBeAg（+）导致的ALT异常只有63.87%，那么余下的31.9%就有可能被临床漏查。

3.4PCR、两对半、前S1抗原之间的关系

西安市中心医院检测了148例阳性标本，其中大三阳48份，小三阳68份，1.5阴性12份，结果如下：

模式例数阳性数百分率测值范围阳性数百分率

大三阳484696%10-103573%

小三阳681725%10-101014.7%

1.5阳性12433%10-10541%

上表说明以下几个问题：

（1）HBeAg（+）种，HBV—DNA阳性百分率为96%，而HBeAg（—）种，HBV—DNA阳性百分率仅为29%（21/80，小三阳加1.5阳性）；

（2）HBeAg（+）种，前S1Ag阳性占73%（西安市第四医院报道为78.46%，这与样本量不同有关）；

（3）HBeAg（—）者，前S1Ag为28%（西安市第四医院报道为40.45%，可能与其样本量和所测乙肝模式不同所致。我仍准备用大量样本量做一统计）。尽管如此，还是可以说明一个问题，HBeAg（+）中有70%以上的阳性率，这个70%以上，在病毒本身除大量复制外，还有临床意义，即传染性。那么，另外20%左右的HBV，虽然HBeAg阳性，但它由于前S1Ag是阴性，所以它没有复制，不具备临床意义。这样就HBeAg（+）的解释就更有证据了。对于HBeAg（—）者，过去我院只有将其辨为无病毒复制，无临床意义。其实不然，至少还有28%—45.45%HBeAg（—）者，前S1Ag阳性，它可以复制，它有临床意义。只是HBV的含量（kb/ml量）略少而已。另外，特别提出的一点，HBeAg虽不像HBsAg那样可与肝C发生整合，但它易变异而产生阴性（除低表达外）。

总之，HBV由于其结构中的抗原的复杂性，决定了临床上常见的各个模式（至少数十个）这些模式的临床解释，也由于HBsAg的特点（如隐匿HBV的携带或与肝C的整合变的无临床意义，再如HBV中的HBeAg的变异或低表达），使得HBV的临床结果变的扑朔迷离，叫人费解。但我认为，目前一般实验室对乙肝的解释，只要抓住HBsAg、前A1Ag，HBeAg和抗HBC加上肝功能中的ALT，已经足够了，再无必要解释它的模式，以免费力不讨好。因为，要想HBV的结构弄得更加明了，除上述检测外，更好的检测手段是利用PCR技术和生物芯片技术。