结核感染T细胞斑点试验在疑似结核病患者诊断中的价值研究

结核感染T细胞斑点试验在疑似结核病患者诊断中的价值研究

刘晓辉

(资阳市第一人民医院感染科四川资阳641300)

【摘要】目的：讨论研究结核感染T细胞斑点实验应用于疑似结核患者诊断中的价值与意义。方法：回顾分析我院接收病诊断的疑似结核病患者100例并根据其检查结果及抗结核试验治疗的随访分为非结核组组与结核组。对所有患者均进行核感染T细胞斑点实验及结核菌素试验。比较不同检测方式得出结果对结合诊断的灵敏性、特异性、假阴性率、假阳性率变化。结果：两组患者行结核感染T细胞斑点实验后结核组结果特异度、敏感度均显著高于TST实验（P＜0.05）。结论：结核感染T细胞斑点实验用于诊断结核病具有良好的应用价值，其灵敏度与特异度更高且不受先前卡介苗接种的影响。该实验具有操作简便的优势，检测结果得出快，能够帮助患者尽早获得诊断结果并制定治疗方案，对促进疾病治疗，改善患者生活质量具有重要意义。

【关键词】结核感染T细胞；结核菌素试验；疑似结核患者；价值与意义

【中图分类号】R52【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2017）27-0230-02

结核病主要是由结核杆菌感染所引起的慢性传染病，从古至今一直对人类的健康造成严重威胁[1]。尽早发现病变，明确诊断并制定针对性的治疗方案是防治结核病情进一步发展的关键。既往临床多通过结核菌素试验（TST）进行结核分歧杆菌感染的初步筛查，但该方法受到接种卡介苗或环境中非结核分歧杆菌感染的影响易出现假阳性结果；也可由于患者自身体质较弱，营养状态不佳或使用免疫抑制剂等情况出现假阴性的结果，该检验方法特异性较低。目前临床对结核患者进行确诊除过患者临床症状及影像学检测结果外，还可应用结核菌涂片或培养结果方式进行确诊。但这种方法阳性率偏低且培养时间较长，因此由于敏感性较低而无法及时发现结核菌感染[2]。选用何种检验方式对结核杆菌感染早期进行确诊是目前临床医学人员关注的热点话题。结核感染T细胞实验主要通过可通过单细胞水平对具有分泌抗体或细胞因子功能的细胞进行检测目前已被广泛应用至对疫苗、癌症、各类感染性疾病的诊断当中。本研究为探讨结核感染T细胞实验对疑似结核患者疾病诊断的临床意义与影响，特选取100例本病患者资料进行回顾性分析。现报道如下。

1.资料与方法

1.1临床资料

回顾分析我院2014年1月-2015年1月疑似结核病患者100例作为研究对象。包括男64例，女37例；年龄27～45岁，平均（36.3±9.2）岁。根据其检测结果及抗结核试验治疗的随访分为结核组66例，非结核组34例。100例患者入选标准包括：结核杆菌阴性，胸部CT检查示肺结核征象且患者出现不同程度长期发热、咳嗽、咳痰等症状并经抗炎治疗无效，抗结核试验治疗有效。痰涂片差抗菌酸杆菌至少1次提示阳性或病例证实符合结核改变[3]。结核组66例患者中男41例，女25例；年龄26～46岁，平均（36.7±9.8）岁。非结核组34例患者中男23例，女12例；年龄27～45岁，平均（36.5±9.3）岁。本次研究经我院伦理委员会审核并批准，所有患者及家属均在知晓本次研究目的的前提下自觉签署知情同意书。所有患者一般资料无显著差异具有可比性。

1.2检测方法

结核感染T细胞斑点试验：应用CPT细胞制备管进行真空采集外周血8ml并进行淋巴细胞分离。将单个核细胞层从分离管中转移到新的干无菌尖底心管并使用无血清培养液AIM-V洗涤细胞，去除内源性γ干扰素[4]；加入10mlAIM-V培养液后使用离心机进行7分钟离心并将上清进行去除，轻缓重旋细胞沉淀。取10μl细胞混合悬液加入血细胞计数板并进行活细胞计数。之后将培养板从铝封袋中取出后按顺序并标记加入50μlAIM-V至阴性对照孔，50μl抗原A至抗原A孔、50μl抗原至抗原B孔、50μl阳性对照至阳性对照孔。在孔中分别加入已制备的细胞稀释工作液100μl并将培养板放入培养箱进行孵育16至20小时。抛弃孔内液体并加入50μl新鲜配置的酶标抗体工作液，将培养板在2～8℃孵育1小时并记录患者的结核感染T细胞斑点试验检测结果。结核菌素试验：抽取0.1ml的结素纯蛋白衍化物对患者行前臂尺侧皮内实验，约2至3天后对结果进行观察。均径＜5mm为阴性；5～9mm均径位一般阳性；10～19mm为中度阳性；均径不低于20mm或不足20mm但有水疱或坏死为强阳性。

1.3疗效观察

对所有患者均进行核感染T细胞斑点实验及结核菌素试验。比较不同检测方式得出结果对结合诊断的灵敏性、特异性、假阴性率、假阳性率变化。

1.4统计学方法

采用SPSS15.5统计软件进行统计分析，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1两组实验人员不同检测方式得出结果比较

两组患者行结核感染T细胞斑点实验后结核组结果特异度、敏感度均显著高于TST实验（P＜0.05）。详情见表。

3.讨论

我国作为结核患者人数较多的国家，伴随着艾滋病及耐药结核病增多及人口流动等问题的出现，对抗结核病的形势异常严峻。既往临床多通过TST实验对结核进行筛查，但由于实验中所使用的结素纯蛋白衍生物是多种抗原的混合物，极易出现交叉反应；若患者曾感染过结核菌或对结核菌有免疫力时，TST实验结果可表现为阳性，不代表患者有结核病，主要是由于该项实验对接种过卡介苗或环境中的非结核菌感染可产生假阳性的结果；若患者未感染结核菌则TST实验可表现为阴性，不代表患者无结核病，该测试也可由于患者自身体质较弱等原因出现假阴性反应。目前临床对成年疑似结核患者除应用TST实验外还需结合影像学检查共同进行诊断。本次研究中使用的结核感染T细胞斑点试验，其结果的敏感性与特异性均显著高于TST检测。该实验是由酶联免疫斑点发展而来用于检测结核病的新方法，其作用原理是通过使用结核分枝杆菌特异性抗原刺激PBMC，在通过细胞干扰素的分泌对抗原特异性T淋巴细胞的反应应答情况进行监测从而对结核发展情况进行判断；同时，该实验的敏感性不受机体免疫状态的干扰[5]。目前已有诸多临床研究证实全血或血清的检测在活动性肺结核、肺外结核的敏感度与特异度方面显著优于TST实验；尤其在合并免疫抑制剂结核潜伏感染的诊断中，极有可能代替原有的TST实验用于疾病筛查[6]。

综上所述，结核感染T细胞斑点实验用于诊断结核病具有良好的应用价值，其灵敏度与特异度更高且不受先前卡介苗接种的影响。该实验检测结果得出快，能够帮助患者尽早获得诊断结果并制定治疗方案，有助于促进疾病治疗，改善患者生活质量。同时，做好饥饿和疾病的防治工作，培养良好的卫生习惯，接种卡介苗，定期进行肺部健康检查对减少结核发生概率，避免传播与扩散均具有重要意义。

【参考文献】

[1]范伟光，孟娟，苏苗苗，等.结核感染T细胞检测应用于结核杆菌感染的研究[J].中国实验诊断学，2017，19（02）：220-222.

[2]郑臻，黄海，邹毅，等.抗结核抗体与结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用[J].中华医院感染学杂志，2016，21（10）：2232-2234.

[3]宋巍，朱可玉，孙艳华，等.结核感染T细胞斑点试验在结核性疾病中的诊断价值分析[J].中华医院感染学杂志，2016，16（09）：1934-1935+1957.

[4]于丹，刘宁.结核感染T细胞斑点试验在疑似结核病患者诊断中的价值[J].热带医学杂志，2016，21（01）：45-47+54.

[5]石慧，崔丽英.结核感染T细胞斑点试验诊断结核性胸膜炎的应用价值[J].中华肺部疾病杂志（电子版），2015，22（02）：195-199.

[6]赵长生.结核感染T细胞斑点试验在结核诊断中的应用[J].中国实用医药，2014，13（13）：58-59.