反相高效液相色谱法同时测定丹参中5种成分含量

反相高效液相色谱法同时测定丹参中5种成分含量

代吉英

（榆中县贡井中心卫生院甘肃兰州730118）

【摘要】目的：通过反相高效液相色谱法实施同时测定丹参5种成分的具体含量。方法：通过反相高效液相色谱法，其中色谱柱是WelchromC18，结合乙腈（A）-0.1%（磷酸（B）作为其中的流动相梯度实施洗脱，然后对丹参5种成分实施测定。结果：乙腈（A）-0.1%磷酸（B）具有良好的洗脱能力，而且保留的时间短，同时还可以充分促进各种指标有效分离，能够有效地、全面地掌握丹参的质量。结论：运用反相高效液相色谱法进行测定，具有良好的准确性，同时速度快而且重复性较好，能够控制好丹参的质量。

【关键词】反相高效液相色谱法；测定；丹参；5种成分；含量

【中图分类号】R284【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2018）07-0341-02

丹参作为重要的药物之一，在近年研究中将其运用在治疗许多心血管方面的疾病取得良好的效果，例如帮助患者降血压、降血脂以及抗血栓等，同时HIA可以有效改善患者的血液循环情况[1]。丹参主要的成分是丹参素，同时还含有两大成分，第一种是水溶性成分，第二种是脂溶性成分，其中脂溶性的成分是丹参酮类的成分，主要有丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA以及二氢丹参酮Ⅰ等；而水溶性的成分中是丹参酚酸类，如紫草酸、丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸以及丹酚酸B等。但是由于当前丹参产地角度，而且栽培的方式也不同，因此，其质量难以保证。为了能够有效掌握丹参的质量[2]，下文从2017年1月到12月选取的丹参进行研究，结合测定的方式掌握丹参5种成分的具体含量情况。具体如下。

1.选定仪器

1.1选定仪器

在本次测定工作中主要采用的是美国WatersE2695高效液相色谱仪泵，其中包含：样品以及四元泵的处理器、柱温箱、PDA检测器以及Empower色谱工作站；其中超声波的清洗机型号是SB26-13DT（生产厂家：天津新芝科技公司）；而色谱柱是WelchromC18（型号是250mm×4.6mm，5??生产厂家：北京月旭科技公司）。

1.2试药和试剂

其中乙腈是色谱纯（生产厂家：德国Merck公司），测定中所采用的水是Millipore的超纯水。而其他的试剂都是分析纯，主要包括隐丹参酮、丹酚酸B、丹参素钠、丹参酮IIA以及迷迭香酸，以上试剂均由青岛春秋生物公司所产生，纯度大于98%。在本次测定中，丹参主要从市场采购，时间从2017年1月到12月选取，所有的丹参样品都通过我院药师鉴定，都是唇形科的植物，并根和根茎都保持干燥。

2.测定方法

第一，制备样品溶液；丹参取0.5g，然后研磨成粉末，通过精密称定，然后加甲醇（75%）大约50mL，并摇匀，其中超声处理时间大约是30min，最后提取并再次称定质量，通过甲醇（75%）补足质量以及摇匀，实施过滤，孔径是0.45?m，放置环境为4℃，并避光保存；第二，对照品容液，通过精密称定一定量的对照品，（主要包括：丹酚酸B、丹参素钠、隐丹参酮、迷迭香酸以及丹参酮ⅡA），然后加甲醇（75%）而制成对照溶液，浓度是59.6?g/mL，655.6?g/mL，346.2?g/mL，220.1?g/mL，414.2?g/mL；第三，色谱，参照WelchromC18以及检测的波长大约是280nm；而柱温是30℃；然后增加流动相乙腈（A）-0.1%磷酸（B），控制流速为1.0mL/min，而进样量是10?L；第四，通过精密度进行试验，其中吸取同一对照品，实施连续6次，并测定具体的峰面积值，通过测定可知，丹参素钠是1.22%，丹酚酸B是0.94%，丹参酮ⅡA是0.65%，迷迭香酸0.85%以及隐丹参酮是0.84%；第五，做好线性范围以及考察，结合“2.3”的项色谱可知，取混合对照品分别是1?L，2?L，5?L，10?L，15?L，20?L以及40?L，各成分情况见表1。

表1线性范围情况

4.讨论

近年研究中，丹参在治疗许多心血管方面的疾病，例如降血压、降血脂以及抗血栓等方面取得良好的效果[3]，同时还可以有效改善患者的血液循环情况。主要是由于丹参中存在如下的成分，一种是丹参素，同时还含有两大成分，第一种是水溶性，第二种是脂溶性分，其中脂溶性的成分是丹参酮类的成分[4]，主要有丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA以及二氢丹参酮Ⅰ等；而水溶性的成分中是丹参酚酸类，如紫草酸、丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸以及丹酚酸B等[5]。但是由于当前丹参产地角度，而且栽培的方式也不同，因此，其质量难以保证。为了能够有效掌握丹参的质量[6]。通过本次研究可知，测定结果中乙腈（A）-0.1%磷酸（B）具有良好的洗脱能力，而且保留的时间短，同时还可以充分促进各种指标有效分离，能够有效地、全面地掌握丹参的质量。

综上，运用反相高效液相色谱法进行测定，具有良好的准确性，同时速度快而且重复性较好，能够控制好丹参的质量。

【参考文献】

[1]王国丽,祝洪艳,林海成,匙坤,姚玉莹,张连学.反相高效液相色谱法同时检测不同样品中6种五味子木脂素[J].食品安全质量检测学报,2014,5(08):2470-2475.

[2]赵飞,高广慧,王凤娇.微波萃取-反相高效液相色谱法测定钙片中维生素D_3的含量[J].中国食品卫生杂志,2015,27(01):30-33.

[3]翟锐锐,周丹,陈丽珍,刘平怀.反相高效液相色谱法测定吉非替尼原料药含量及有关物质[J].中南药学,2015,13(04):422-425.

[4]曾诚,赵文惠.反相高效液相色谱和超高效液相色谱法测定饮料中咖啡因含量的比较研究[J].食品安全质量检测学报,2015,6(06):2337-2341.

[5]李红卫,王开萍,吴娱,唐正江,汤飞,刘国庆.柱前衍生-反相高效液相色谱法检测富硒米曲霉中有机硒形态[J].食品科学,2015,36(22):137-141.

[6]赵岩,侯莹莹,郭帅,徐莹,沈彦龙,韩玲玲,朱晓富,唐国胜,郜玉钢.反相高效液相色谱法测定白屈菜种子中挥发油成分分析及氨基酸含量[J].食品安全质量检测学报,2015,6(12):5053-5060.