聚酰胺法交叉配血的应用

(整期优先)网络出版时间:2015-12-22
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聚酰胺法交叉配血的应用

张小林张汉乐张晓燕

(宁夏第五人民医院石炭井医院宁夏石嘴山753000)

摘要:目的:探讨凝聚胺交叉配血在临床输血交叉配血中的临床意义方法:通过凝聚胺交叉配血的操作过程讨论凝聚胺交叉配血的稳定性,方便性,重复性结论:凝聚胺交叉配血技术既可检测出完全抗体,又可检测出具有临床意义的不完全抗体

关键词:交叉配血;改良聚酰胺法

[中图分类号]R4[文献标识码]A文章编号:

1.聚酰胺(polymatching)法原理

首先利用低离子介质降低溶液的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,促进血清(浆)中的抗体与红细胞相应抗原结合,再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液,中和红细胞表面的负电荷,缩短细胞间距,形成可逆的非特异性聚集,并使IgG型抗体直接凝集红细胞。加入中和液后,仅由凝聚胺引起的非特异性聚集,会因电荷中和而分散,而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。

2.标本采集

标本种类:抽取受血者静脉血3—4ml待凝固后,离心分离出血浆,将红细胞配成3%—4%生理盐水悬液。供血者血样用上述同法分离血清(浆)和红细胞悬液。

3.试剂

3.1试剂名称:改良聚酰胺试剂

3.2试剂生产厂家:伊诺维盛技术生物有限公司

3.3试剂组成:低离子介质(LIM),聚酰胺溶液(POLYBRENE),假凝集清除液(F.A.E.S)

4.操作步骤和结果判断

在主测管内加入受血者血清2滴和供血者3%—4%红细胞悬液1滴;次测管加入供血者血清2滴和受血者3%—4%红细胞悬液1滴。各管加入低离子介质3滴,混匀,于室温下静置1分钟,各管加入聚酰胺溶液1滴,混匀,3500转每分钟离心15秒,弃去上清液,留约0.1毫升,振荡摇匀,肉眼可见管底出现凝集,各管加入假凝集消除液1滴,轻轻摇动试管混匀后观察结果。若凝集在一分钟内消除成为均匀的混悬液,为阴性,说明配血结果相合;若凝集在一分钟内门源消失,则为阳性,是红细胞抗原抗体结合的特异性反应,说明配血结果不相合。

5.操作性能:

快速简便,特异性强,灵敏度较高,重复性好。

6.超出范围结果处理:

6.1细胞自凝:在冬天气温较低时,某些病人血清中含有冷凝集素而导致交叉配血假阳性;遇此现象可用37℃-40℃生理盐水洗涤红细胞并置37℃水溶中轻轻摇动,观察结果。

6.2若病人血清(血浆)含有肝素,如洗肾患者能影响配血,须多加4-6滴polybrene溶液以中和肝素。

6.3红细胞悬液为5%为宜,过浓或过淡可使抗原抗体比例不适当,反应不明显易误判。

6.4各种原因引起的红细胞溶解,误判为不凝集,部分溶血时,可溶性血型物质中和了相应的抗体。

7.讨论

凝聚胺交叉配血技术既可检测出完全抗体,也可以检测出具有临床意义的不完全抗体,同时可帮助临床诊断出一些自身免疫性疾病,尤其是自身免疫性溶血性贫血。实践证明,凝聚胺试剂稳定性好,操作方便,重复性好,而且不需要特殊设备,大中小医院均可操作,适宜推广普及。

8.方法局限性:

8.1试管,滴管吸头和玻片必须清洁干燥,防止溶血。

8.2操作方法应按规定,先加血清,然后再加红细胞悬液,以便容易核实是否漏加血清。

8.3离心时间不宜过长或过短,速度不宜过快或过慢,以防假阳性或假阴性结果。

8.4观察时应注意红细胞呈特异性凝集,继发性凝固及线状排列的区别

收稿日期:2015-10-13