献血者ABO血型正反定型不符8例分析报告

献血者ABO血型正反定型不符8例分析报告

高虹余福桥

高虹余福桥（抚顺市中心血站113006）

【摘要】目的分析街头无偿献血者ABO血型正反定型不一致的原因。方法应用ABO血型正反定型、吸收-放散试验，借助其他抗血清和不规则抗体检测，对8例街头无偿献血者ABO血型正反定型不符的标本进行ABO血型鉴定。结果街头无偿献血者13338人，经对采集的血液再次进行ABO血型鉴定时，有8例ABO血型正反定型不一致,经血型室系统检测确认，其中3例为人为差错,4例血清中含有不规则抗体，1例为A2亚型。结论ABO血型正反定型不相符时,首先应排除人为的实验差错和抗A、抗B血清效价因素，然后再考虑ABO亚型或存在不规则抗体的可能，并对正反定型不一致的标本再次进行ABO血型正反定型、吸收-放散试验等实验,以确定红细胞上是否有弱抗原或血清中是否含有不规则抗体。

【关键词】街头无偿献血者血型正反定型不符ABO血型鉴定

ABO血型检测是街头无偿献血前的基本检测项目，但由于非予体检献血者献血前的ABO血型检测一般只做正定型实验，当采血后再次进行ABO血型检测时，时有正反定型不符的现象发生。我们对本血站2012年在13338名街头献血者中发现的8例ABO血型正反定型不符的标本进行了系统的血清学鉴定，现将结果分析报告如下。

一、材料与方法

1、街头献血后ABO血型正反定型不符的血液标本8例（其中男性5例,女性3例）。

2、试剂及仪器

抗-A、抗-B试剂（河北医科大学生物医学工程中心）；

抗-AB、抗-H、抗-A1、抗球蛋白试剂、标准A细胞、B细胞、O细胞、A2细胞、不规则抗体筛选细胞(上海输血技术有限公司)

TL-4.7W细胞洗涤离心机（上海市离心机槭研究所）

3、方法

3.1ABO血型正反定型实验[1]

正定型：取5支试管，分别加抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H、抗-A1，标准血清各0.1ml，再加入3-5％待检者三洗红细胞悬液0.1ml混合，离心3300r/min,15s观察结果。

反定型：取4支试管,各加待检者血清0.1ml，再加入A细胞、B细胞、O细胞、A2细胞各0.1m混合，离心3300r/min,15s观察结果；另取1支试管，加待检者血清0.1ml，再加入3-5％待检者自身三洗红细胞0.1ml为自身对照，离心后观察结果。

3.2间接抗人球蛋白试验

取3支试管，分别加受检者血清2滴、阳性对照2滴、阴性对照2滴，再各加入5％己知三洗红细胞1滴，37℃水浴1小时，生理盐水洗涤三次后扣干，加抗IgG2滴，离心观察结果。

3.3吸收放散试验

抗血清标化：抗-A与Ac呈4+的最大稀释倍数为1:32，取待检者三洗后的压积红细胞1ml与标化后的抗-A血清1ml混合置4℃1小时，每10分钟混匀一次，3300r/min离心1分钟，分离上清液，为吸收后的抗-A。浓缩红细胞留做放散试验。取标化的抗-A和吸收后的抗-A，分别用Ac对其作效价测定，离心观察结果。

3.4不规则抗体筛选细胞试验

取3支试管，分别加入待检者血清2滴，再加入OI细胞、OII细胞、OIII细胞各1滴混合，离心后观察结果。

二、鉴定结果

1、在8例街头献血前ABO血型正定型结果与献血后ABO血型正反定型结果不符的标本中，有3例是因街头初筛化验人员工作失误所致。追踪分析原因是由于初筛实验人员工作中冲忙，看错标本实验位置等原因造成。经回站后对血袋样本再次检测，正反定型完全一致，予以及时纠正。

2、在8例标本中，有4例经间接抗人球试验和不规则抗体筛选细胞试验确认为含有ABO以外的不规则抗体。

3、在8例标本中，有1例街头正定型初筛为A型，检验科复检正定型为A型，反定型为O型，正反定型不符。

血型室进一步检测结果，正定型：抗-A(2＋)、抗-B(-)、抗-A1(-)、抗-AB(2＋)、抗-H(＋)。反定型：A1c(+)、Bc(3＋)、Oc(-)、A2C(-)。经吸收-放散试验进一步确证有弱A抗原，鉴定为A2亚型[2]。

A2亚型1例实验结果见表1和表2

表11例A2亚型实验检测结果

表21例A2亚型细胞与抗-A的凝集强度

三、讨论

ABO血型检测的操作方法虽然简单，责任却非常重大。引起血清学ABO血型正反定型不符的原因有很多，其中包括技术性问题或红细胞和血清本身问题，如：实验者操作错误（街头标签贴错、检测样本错放和电脑录入错误等）、红细胞标本相关问题、血清标本的问题和亚型（抗原性或抗体减弱）等。在本站初筛8例正反定型不符的血样中，除了一例亚型和4例含有不规则抗体外，其余的3例都和操作人员有直接关系。

ABO亚型往往红细胞表面的抗原表达性较弱，在街头初筛检测时，由于实验反应时间不足、抗体试剂效价因素、工作人员冲忙等原因易被误判，或由于其血清中含有相关抗体，往往在站内复检时，通过ABO血型正反定型实验才能发现正反定型不符。本站确证的1例A2亚型，就是由于街头献血前ABO血型初筛为A型，经检验科进行ABO血型正反定型检测，发现正定型为A型，反定型为O型，后经血型室进行ABO正反定型、不规则抗体的筛选、吸收和放散等实验，证实该血液标本红细胞表面有A抗原和H抗原，血清中含有抗-A1，与O筛细胞呈阴性，经吸收和放散实验进一步确认为A2亚型[1]。

综上可见，对献血者血型初筛检验时，要确保避免人为操作失误的因素。在加强抗血清试剂效价质控的前提下，检验人员在滴加试剂和血液样本时，应确保加样量适当、混合充分，保证充分的反应时间，并注意试剂的保存和结果的复核。在发现ABO正反定型不符时，要认真进行各项血清学鉴定，在各种温度下进行冷凝集素及不规则抗体的检测，并结合吸收与放散实验等实验项目鉴定亚型，以确保血型鉴定的准确，保证临床输血安全。

参考文献

[1]王培华.《输血技术学》.（人民卫生出版社,1998年6月第一版,136-137页）.

[2]李勇，杨贵贞.《人类红细胞血型学实用理论与实验技术》.（中国科学技术出版社,1999年第1版,第37页）.