痔洗药促进大鼠创面愈合与改善创面微循环的实验研究

痔洗药促进大鼠创面愈合与改善创面微循环的实验研究

杨威李洁琼程丽敏（通讯作者）

黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040

【摘要】目的：探讨痔洗药对大鼠创面愈合和微循环的影响。方法：大鼠造模后随机分为3组：痔洗药组，高锰酸钾组，混合对照组每组25只，痣洗药组动物右侧创面给痣洗药治疗，左侧创面给等量生理盐水作为对照；高猛酸钾组动物右侧创面给高猛酸钾进行治疗，左侧创面给等量生理盐水作为对照，混合组右侧创面给痣洗药治疗，左侧创面给高猛酸钾治疗，均每日给药两次，间隔10小时，于第3，7，14天测定创面新生肉芽组织成纤维细胞数量和新生毛细血管数量；于第3，7，11，21天测定肉芽组织蛋白质含量。经统计学分析，创面新生肉芽组织成纤维细胞数量、新生毛细血管数量和蛋白质含量痔洗药组优于其他两组（P<0.05)。结论：痔洗药能够显著促进大鼠创面愈合，改善创面微循环。

【关键词】痔洗药；熏洗；创面；愈合；实验研究

Hemorrhoidmedicinetopromotewoundhealinginratsandimprovethemicrocirculationofexperimentalstudyofthewound

CHENGLi-ming，YANGWei

HeilongjiangUniversityofChineseMedicine，HAerbin150040，China；TheFirstAiliatedHospitalofHeilongjiangUniversityofChineseMedicine，Heilongjiang150040，China

Abstract:Objective：Itistodiscussthewashhemorrhoidsmedicineonwoundhealinginratsandtheeffectsofmicrocirculation.Methods：80SDratswererandomlypidedintohemorrhoidsmedicinegroup,thepotassiumpermanganategroupandmixedgroup,with25onesineachgroup．Besidethespineofrats1cm,eachdesigndiameterof1.8cmdeepanddeepfasciaandpartofthecircularmusclelayerwound,Washwashmedicinegroupofanimalsontherightsideofthewoundtoneimedicinetreatment(molewashmedicinegroupsamples),ontheleftsideofthewoundtotheamountofnormalsalineascontrolgroup(normalsalinesamples);Highfierceanimalsontherightsideofthewoundtohighacidpotassiumgroupfierceacidpotassiumtreatment(potassiumpermanganatesamples),ontheleftsideofthewoundtotheamountofnormalsalineascontrolsample(normalsalinegroup,mixedgroupontherightsideofthewoundcleaningnevusmedicinetreatment(molewashmedicinegroupsamples),ontheleftsideofthewoundtohighfierceacidpotassiumtreatment(potassiumpermanganategroupsamples),Bothgivemedicinetwotimesaday,eachtimetwice,inthedeterminationof3,7,14dayswoundgranulationtissuefibroblastsnewnumber(FGF)andnewbornbloodcapillarynumber(MVD);3,7,11,21daysinthedeterminationofgranulationtissueprotein(RP).Results:thewoundgranulationtissuefibroblastsnewnumber,newbornbloodcapillarynumber,andproteincontentofwashhemorrhoidsmedicinegroupissuperiortotheothertwogroups.7dayspostoperativelyinwoundgranulationtissueofratsnumberoffibroblastsandnewbornbloodcapillarynumber,washhemorrhoidsmedicinegroupisbetterthanthatofpotassiumpermanganateandnormalsalinegroup,differencehasstatisticalsignificance(p﹤0.05),andpotassiumpermanganategrouphadnostatisticalsignificance.Postoperativeintermsofthetotalproteincontentinwoundtissueinrat,washhemorrhoidsmedicinegroupisbetterthanthatofpotassiumpermanganateandnormalsalinegroup,differencehasstatisticalsignificance(p﹤0.05),andpotassiumpermanganategrouphadnostatisticalsignificance.Conclusion:washhemorrhoidsmedicinecanpromotewoundhealinginrats,improvethemicrocirculationofthewound.

Keywords:Washhemorrhoidsmedicine;Fumigation;Thewound;He-aling

【中图分类号】R269;R285.5【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）15-219-02

肛门病术后促进创面愈合和提高愈合质量一直是肛肠科面临的重大问题。除术中操作、减小创伤、和术后抗生素应用防止感染外，手术创面的用药也是加快愈合减小瘢痕增生的重要措施。痔洗药（主要由蒲公英、紫花地丁、黄柏、大黄、艾叶、乌梅、元胡、五倍子、芒硝、明矾组成）目前主要用于肛肠病患者或术后患者局部坐浴，能够起到消肿止痛，化腐生肌的作用，特别是对患者手术后伤口的愈合起到一定的积极作用[1]。本实验观察了痔洗药对于创面新生肉芽组织成纤维细胞数量、新生毛细血管数量和血红蛋白含量的影响，具体方法如下：

1药物制备

将精选的公英15g、双花15g、黄柏15g、苦参15g、红花10g、蛇床子15g、丹皮15g、五倍子15g、明矾10g用纱布袋装好，放入盆中，倒入适量开水，浸泡，制成痔洗药液以便浸泡无菌纱布给大鼠创口外敷。

2动物实验

2.1动物分组将健康SD大鼠75只，随机分成痔洗药组、高锰酸钾组和混合组，每组25只。

2.2手术方法大鼠背部剪毛后，再涂脱毛剂脱毛，最后用温水多次清洗脱毛处后拭干。次日，用20%的乌拉坦腹腔注射麻醉，消毒后，在脊柱两侧旁1cm处，各切除直径1.8cm深及深筋膜及部分肌层，形成圆形创面，面积约为2.5cm2。用脱脂棉彻底止血，切口用无菌纱布包扎。

2.3给药方法痔洗药组用生理盐水冲洗创面消毒后，右侧伤口滴入0.2ml的痔洗药液，间隔5分钟每次，同时用面积为2.52㎝2的无菌纱布若干放在痔洗药液中浸泡，平均每隔五分钟给大鼠创口更换外敷一次浸有药液的纱布，使创口始终保持在痔洗药作用的环境中约20分钟，每天两次，间隔10个小时；左侧伤口等体积滴入生理盐水。高锰酸钾组，用生理盐水冲洗创面消毒后，右侧伤口滴入0.2ml的1：5000高锰酸钾，间隔5分钟，同时用浸有高锰酸钾面积为2.54㎝2的纱布外敷在创口上，每隔五分钟给予更换药液纱布一次，使创口始终保持在高锰酸钾药液作用的环境中约20分钟，每天两次，间隔10小时；左侧伤口等体积滴入生理盐水。混合对照组，用生理盐水冲洗创面消毒后，右侧伤口滴入0.2ml的痔洗药液，左侧伤口等体积滴入0.2ml的1：5000高锰酸钾，以上述同样的方式每隔五分钟给予创面更换相应的药物纱布，保持20分钟的药液环境，每天两次，间隔10小时。

2.4检测指标及方法观察每组大鼠在创伤和给药后的进食、活动、精神、情绪有无特异性变化。在每次给大鼠换药时观察创面的颜色，创面的大小，创面的结痂情况，肉芽的生长情况，渗出物和分泌物的多少及性状，有无红肿，有无感染，并记录创面愈合时间。分别于术后第3、7、14天，各组处死大鼠5只，第21天处死各组剩余10只大鼠。取创面皮肤约一半置于10%中性福尔马林溶液中固定。将剩余组织置于冰生理盐水中漂洗，用滤纸吸干，-20℃保存，测定蛋白质的含量，严格按试剂盒说明书操作。取创伤后第7天各组动物的创面组织，戊二醛固定，电镜下观察肉芽组织的超微结构。采用PCNA免疫组织化学染色SP方法（辣根过氧化物酶染色法），读出并记录标本新生肉芽组织成纤维细胞数量。

2.5统计学处理用SPSS10.0软件对所有数据进行统计学处理，所有数据均以（）表示，组间差异显著性检验采用成组设计，样本均数差异性用t检验；计数资料比较采用卡方检验。差异的显著性定为P<0.05。

3结果

3.1创面愈合的形态学改变应用痔洗药后各组大鼠的生活习性无特异性改变，进食状况良好。愈合过程中痣洗药、高锰酸钾两组创面相对较为清洁，肉芽组织红嫩，表面平整，呈现均匀微细的颗粒状，肉芽组织分别在后9、10天充填创面。而生理盐水组创面可见有少量的粘性分泌物，创面边缘上皮及肉芽组织生长较快，表面凸凹不平，个别部位肉芽水肿明显，伤后7天已基本被肉芽组织所充填。

3.2创面新生肉芽组织成纤维细胞数量测定比较术后第3、7、14天，痔洗药组肉芽中成纤维细胞数量优于高锰酸钾组和生理盐水组，特别是在第7、14天痔洗药组肉芽中成纤维细胞数量均明显多于另外两组，并且经统计学分析p﹤0.05，差异显著，有统计学意义。而高锰酸钾组则无统计学意义(图1），见表1。

3.5不良反应三组均未见局部致敏和全身不良反应。

4讨论

中药熏洗坐浴法是中医传统疗法，亦是中医学外治法的一个重要方法[2]。现代医学研究证明[3]，中药熏洗坐浴对改善局部血液、淋巴循环，减轻组织水肿，改善上皮、肉芽的生长环境等方面有明显疗效。术后坐浴，可借蒸腾的药气，熏灼患处，依靠药力和热力的作用，直接接触病变部位，使药力直达病所，荡涤污浊毒邪，使经气血脉通畅，气机调和，腠理疏通而诸症自愈[4]。

目前部分患者肛肠手术后采用高锰酸钾清洗，高锰酸钾为强氧化剂，遇不饱和烃即放出新生态氧，有杀灭细菌作用。其杀菌力极强，可用于肛门病术后可止痒止痛、防止感染。但由于高锰酸钾是一种强氧化剂，对人体具有较强的腐蚀性，使用不合理还会加重病症。痣洗药是以治疗压疮、肛门部疮疡和痔疮术后恢复为主要作用的临床经验方剂。痔洗药为我院院内制剂，全方苦寒并用，共奏清热活血，消肿止痛，收敛生肌之功。对肛门病术后的止痛、促进创面愈合作用明显。

创伤愈合过程中，肉芽组织（成纤维细胞和血管内皮细胞是构成新生肉芽组织的两种主要细胞。）生成与退缩是伤口愈合、组织重建的关键步骤。其中成纤维细胞是肉芽组织中含量最多的修复细胞，它可以通过自分泌和旁分泌机制产生生长因子作用于自身及其它修复细胞调控修复过程，另外，成纤维细胞生长因子可以促进已损伤血管的生长与修复[5-6]。成纤维细胞生长因子（FGFs）有着广泛的生物学活性，它能促进神经再生，对神经元具有营养支持作用，可分泌细胞外基质影响细胞的形状,控制细胞的迁移、增生分化和代谢,还可分化为肌成纤维细胞参与创面收缩和瘫痕形成。（它经过增殖、迁移，分泌胶原蛋白，细胞外基质和大量的生长因子，与新生血管等构成肉芽组织，填补创面，帮组表皮细胞覆盖。）在中枢神经系统创伤修复以及血管生成、创伤修复等方面亦具有重要的作用。FGFs作为创伤愈合的组织修复因子已广泛应用于皮肤损伤、烧烫伤、溃疡（例如角膜溃疡、胃溃疡、十二指肠溃疡、溃疡性结肠炎等）、褥疮、整形美容后伤口等各种创伤创面的治疗[7]。故研究中测定成纤维细胞数量可以判定肉芽组织的生成，间接评估创面愈合程度。新生毛细血管，可以使创面组织获得充足的营养物质和氧，有助于创面快速愈合。

通过本实验研究表明：我们将痣洗药敷于创面，药液进入创面肉芽组织中，与组织中的成纤维细胞作用，促进血管生成的速度。在造模后第7天，痔洗药组样本创面肉芽组织中血管内成纤维细胞数显著高于其它两组，因此促进血管新生，故而使总血红蛋白含量显著升高，有利肉芽生长。本实验结果表明：痔洗药作用机理之一就是提高创面成纤维细胞数量、毛细血管数量及蛋白含量。痔洗药,便于携带,使用方便,经济实惠,疗效肯定,值得临床推广使用。

参考文献

[1]王永胜.自制痔洗药在肛肠科的应用研究.中国医药指南.2013，11（6）：256-257.

[2]李树民,王晓伟,张琳.金玄痔科熏洗剂治疗炎性外痔的临床观察[J].中国肛肠病杂志,2006，26（12）：37.

[3]宁泽璞,宋杰.实用中医药浴疗法[M].上海：上海远东出版社，2003,1：15.

[4]丁玲.中药外用促进创面愈合机理的研究进展[J].江苏中医药,2006，27（12）：71-72.

[5]BjornssonTD,DryjskiM,TluczekJ,etal.Acidicfibrob-lastgrowthfactorpromotesvascularrepair[J].ProcNatlAcadSciUSA,1991,88(19):8651-8655.

[6]PanditAS,FeldmanDS,CaulfieldJ,etal.StimulationofangiogenesisbyFGF-1deliveredthroughamodifiedfibrinscaffold[J].GrowthFactors,1998,15(2):113-123.

[7]李校堃,肖倩,韩静,肖健.基因工程药物开发热点——成纤维细胞生长因子家族.中国医药生物技术，2010，10（5）：325-334.