新疆母菊多糖含量测定

新疆母菊多糖含量测定

王莹

王莹(新疆维吾尔自治区中医医院药学部830000)

【摘要】目的测定新疆母菊多糖含量。方法用苯酚-硫酸法测定母菊中多糖的含量。结果新疆母菊多糖含量为7.92%。结论该方法简便、重复性和稳定性好、结果可靠，可用于测定母菊多糖含量。

【关键词】母菊多糖含量测定

【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）34-0253-02

母菊（Matricariachamomilia）又称“洋甘菊”，为菊科甘菊属的花序或全草，年生或两年生草本植物。原产欧洲，主要分布在欧、英、法、德、摩洛哥、比利时、匈牙利、保加利亚、捷克、南斯拉夫等国，为一种重要的药用植和香料植物[1]。

目前，对母菊的化学成分含量测定研究甚少，本文用苯酚-硫酸法对母菊多糖的含量进行测定，为母菊的化学研究奠定基础。

1、材料及仪器

母菊采自新疆昆仑山北麓，和田地区策勒县博斯坦乡，样品由策勒县人民政府提供，经新疆医科大学中医学院中药资源教研室李永和主任中药师鉴定的德国母菊（Matricariachamomilia）头状花序。

透析袋(MWCO:500)(上海绿岛科技发展有限公司)，其他试剂均为分析纯;UV-2550紫外光谱仪(岛津)、EYELASB-1000型旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司)等。

2、方法与结果[2]

2.1.母菊多糖样品溶液精密称取母菊精制多糖0.1015g，以蒸馏水为溶剂，加热使其完全溶解，放至室温后移入200mL容量瓶中，蒸馏水定容到刻度。然后把该溶液稀释2倍得母菊多糖样品溶液。

2.2.葡萄糖标准品溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品100mg，置于100mL的容量瓶中，即得浓度为1mg?mL-1的葡萄糖标准溶液。

2.3.测定波长的选择吸取多糖样品溶液2.0mL，葡萄糖标准品溶液0.05mL蒸馏水补充体积至2.0mL，分别置于25mL比色管中。在最佳测定条件下(即分别加入质量分数为5%的苯酚溶液1.0mL，摇匀，再滴加浓硫酸5.0mL，迅速振荡摇匀，90℃下显色30min，然后用冰水混合物迅速冷却)，以2.0mL蒸馏水按同样显色操作为空白，用可见-紫外分光光度计在波长为200～700nm处扫描，两者均在487±1nm处有最大吸收峰，故487nm为母菊多糖的检测波长。

2.4.标准曲线的制作分别吸取稀释10倍后的标准葡萄糖溶液0.4，0.6，0.8，1.0，1.2mL，均用蒸馏水补充至2.0mL。在最佳测定条件下，以2.0mL蒸馏水按同样显色操作为空白，测定吸光值。标准曲线的回归方程为:A=0.0154+0.04336Cr=0.9998，样品检测量在5.0～15.0μg﹒mL-1范围内与吸光度线性关系良好。

2.5换算因子的确定精密称取干燥至恒重的新疆母菊精制多糖0.0030g，置于20mL容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度。取该样品液1.0mL，蒸馏水补充至2.0mL，最佳条件下测定吸光值，平行测定3次。计算换算因子，3次测得换算因子的平均值f=4.94，RSD=0.27%。

2.6多糖含量的测定取多糖样品液2.0mL，最佳条件下测定其吸光值，平行测定3次，含量分别为7.92%、8.04%、7.79%，平均为7.92%。计算出母菊中多糖的含量。

2.7精密度实验取母菊多糖样品液2.0mL，最佳条件下测定吸光值，平行测定6次，计算相对标准偏差RSD=0.15%，说明精密度良好。

2.8稳定性实验取母菊多糖样品液2.0mL，最佳条件下测定其吸光值在10，20，30，40，50，60min后的变化，计算相对标准偏差RSD=0.35%，说明稳定性良好。

2.9重现性实验平行取母菊多糖溶液2.0mL(n=6)，最佳条件下测定吸光值。计算其相对标准偏差RSD=3.52%，说明重现性良好。

2.10回收率实验采用加样回收法测定回收率。分别取精制母菊多糖样品溶液0.5，0.6，0.7，0.8，0.9，1.0mL，然后分别加入葡萄糖标准液0.5mL，分别用蒸馏水补充至2mL，在最佳条件下测定吸光值，根据葡萄糖的检出量，计算其回收率。计算得平均回收率为108.25%，RSD=2.79%。

3、结论

多糖(Polysacharide)广泛分布于动物植物和微生物中，是一类结构复杂的天然高分子化合物，对动植物的生命至关重要。大量的药理和临床研究表明，多糖具有广泛的药理及生物活性，如免疫促进、抗肿瘤、抗病毒、降血糖、降血脂、抗衰老等，且作为药物其毒副作用极小[3]。

本研究根据母菊在487nm波长处有特征吸收，且吸光值与糖浓度呈线性关系这一特点，在优化条件的基础上，建立了苯酚-硫酸法测定母菊总多糖含量的方法，测得母菊总多糖含量为7.92%，取得了比较满意的结果。本法简便，显色稳定，灵敏度高，重现性好。为其质量标准的研究提供实验依据，并为母菊多糖的进一步研究奠定了基础。

参考文献

[1]郑金臣，全山丛，张虹，等.值得重视的归化药用和香料植物-洋甘菊(母菊)[J]，中草药，1996，27(9):568-571.

[2]张彦丽，阿布都热合曼?合力力，阿依吐伦?斯马义.苯酚-硫酸法测定维吾尔药昆仑雪菊多糖含量的研究[J]，药物分析杂志，2010，30(11)：2205-2207.

[3]庞春红.多糖药理作用研究进展[J]，浙江中医药大学学报，2011，35(4):639-640.