白贺莹(黑龙江省电力医院150090)
【中图分类号】R198【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)25-0199-02
【关键词】浅谈尿液分析仪检查
尿干化学分析仪又称尿液分析仪,是用干化学方法检测尿中某些化学成分的自动化仪器,是临床实验室尿液自动化检查的重要工具。它可在一张小小的试纸条上将尿液中许多的化学成分测定出来,具有操作方便、测定迅速、结果准确等优点。随着高科技及计算机技术的高速发展和广泛应用,尿液分析已逐步由原来的半自动分析发展到全自动分析,检测项目由原来的单项分析发展到多项组合分析,尿液分析由此进入一个崭新阶段。
1.尿酸碱度干化学法尿pH检查的原理是采用酸碱指示剂法,其测试模块中含有甲基红(pH4.6~6.2)和溴麝香草酚蓝(pH5.0~7.6)两种酸碱指示剂,在pH4.5~9.0的范围内,颜色由橙红色经黄绿色到蓝色变化。
本参数可因纸条上残留过多尿液使尿蛋白试垫上的酸性缓冲夜污染pH试垫,造成结果偏酸性。细菌繁殖尿样可影响该值结果。
2.尿蛋白采用pH指示剂蛋白质误差原理。即在pH3.2的条件下,溴酚蓝产生的阴离子,与带阳离子的蛋白质结合发生颜色变化。
蛋白质试剂块含有四溴酚蓝、枸橼酸、枸橼酸盐和表面活性剂,四溴酚蓝为酸碱指示剂,同时也为灵敏的蛋白显色剂。当尿蛋白浓度由低至高时,试剂模块发生由黄色经绿色到蓝色的颜色变化,颜色的深浅与蛋白质含量成正比。
试垫只对白蛋白起反应,不与球蛋白、血红蛋白及其他尿蛋白发生反应或仅轻度反应,当尿蛋白含量为150~300mg/L时,定性试验约为±,300mg/L约为+,1000mg/L约为++,3000mg/L约为+++。故尿蛋白阴性并不能排除尿液中其他蛋白的存在,当检验结果与临床诊断不符合时应用其他方法做确认试验。
尿pH≥9时,尿中污染季胺盐或磷酸盐或操作时试条浸入时间过长,可出现假阳性反应。
3.尿糖采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法。葡萄糖试剂模块含有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶和色原等。葡萄糖氧化酶促葡萄糖与氧作用,生成葡萄糖酸内酯及过氧化氢,后者与色原在过氧化氢的作用下,使色原呈现由蓝色经绿色至棕色的色泽变化,呈色的深浅与葡萄糖含量成正比。常见的色原有邻联甲苯胺、碘化钾等。
当尿糖阳性时,试纸显色由黄色、橘黄色至棕色。本法只对葡萄糖起反应,不与乳糖、半乳糖或果糖等其他糖起反应。尿中含有大量维生素可致本试验阴性;高比重碱性尿,可使糖检出偏低。当尿中含过氧化氢、次氯酸盐等强氧化剂时,可呈假阳性反应。
4.尿酮体采用硝普钠法。酮体是脂肪分解代谢过程中的产物。尿酮体包括乙酰乙酸、丙酮和β羟丁酸3种形式。
酮体试剂块主要含有亚硝酸基铁氰化钠、甘氨酸及碱性缓冲剂,这些物质可与丙酮或乙酰乙酸作用形成紫色复合物,颜色由淡棕色至紫色。
试条对乙酰乙酸敏感,敏感度为0.5~1.0mmol/L,对丙酮敏感度较差,与β-羟丁酸不起化学反应。酸性尿液、高比重尿、陈旧尿可使结果呈弱假阳性,尿液中如有酚红或二羟基苯丙胺酸代谢产物可出现假阳性反应。酮体试垫会因受潮而很快失效,故操作时必须在取出试条后立即将盖盖紧,预防垫块受潮失效。
5.尿胆红素采用偶氮反应法。胆红素试剂主要含有2,4-二氯苯胺重氮盐及缓冲液,与胆红素作用后试垫可呈浅黄色至棕黄色反应。维生素C或亚硝酸盐可降低该法的灵敏度,氯丙嗪可致假阳性反应,尿液会因暴露于阳光下而呈假阴性。
6.隐血尿隐血主要用于肾脏、泌尿道疾病及其他相关疾病的诊断、治疗。干化学尿隐血检测采用血红蛋白类过氧化物酶法,血红蛋白能使有机过氧化物显色,根据血红蛋白的含量不同,垫块颜色由橘黄色变为绿色或深蓝色,试垫不仅与游离的血红蛋白起反应,而且还可与完整的红细胞起反应,在试垫上出现绿色斑点,提示为完整红细胞所致。
垫块检出游离血红蛋白敏感度为150~300μg/L。高比重尿、蛋白质尿会降低该法敏感度,维生素C、甲醛可出现假阴性反应。肌红蛋白、强氧化剂,如次氯酸钙或某种可产过氧化物酶的微生物污染,可呈假阳性反应。
7.亚硝酸盐采用亚硝酸盐还原法。亚硝酸盐试剂块主要含有对氨基苯砷酸、N-萘基乙二胺物质。当尿液中感染的具有硝酸盐还原酶的细菌增加时,如大肠埃希菌,可将硝酸盐还原为亚硝酸盐,并可将模块中的氨基苯砷酸重氮化而成重氮盐,以此重氮盐再与N-奈基乙二胺偶联,使模块呈现由黄色至红色的变化,颜色的深浅与亚硝酸盐含量成正比。
8.尿胆原对二甲氨基苯甲醛与尿胆原在酸性条件下,可形成红色化合物。
尿胆原是一种不稳定成分,很快被氧化成尿胆素,从而不与试垫反应而出现假阴性。故检测时尿液必须新鲜,正常新鲜尿液尿胆原呈弱阳性反应。该法可受许多因素干扰,如甲醛防腐剂的尿液或尿液中含大量亚硝酸盐时可出现假阴性。
9.白细胞采用白细胞酯酶法。白细胞试剂块主要含有吲哚酚酯、重氮盐及其他物质。粒细胞中存在酯酶,它能作用于模块中的吲哚酚酯,使其产生吲哚酚,吲哚酚与重氮盐发生反应形成紫包缩合物,试剂模块区发生由黄色至紫色的颜色变化,颜色的深浅与白细胞含量成正比。该项试验只对完整的粒细胞起反应,不与淋巴细胞和其他细胞起反应,健康尿液该试验为阴性,其检出白细胞的灵敏度为(5~15)×106/L。妇女在留取标本时注意不要被白带污染,尿糖、头孢菌素或草酸增加都可降低该项反应的敏感度。
10.尿比重采用多聚电解质离子解离法。尿比重试剂块含有甲基红(pH4.6~6.2)和溴麝香草酚蓝、酸碱指示剂及缓冲物。经过处理的多聚电解质的pKa改变与尿液中离子浓度相关。在测试过程中,尿液中以盐类形式存在的电解质(M+X-)在水溶液中解离出M+阳离子,并与离子交换体中的H+置换,释放出H+溴麝香草酚蓝pH6.2~7.0以分子型和离子型两种形式共存,不同的比例呈现出不同的色泽变化。分子型居多时呈黄色,离子型居多时呈蓝色。尿比重偏高时,尿液中所含盐类成分较多,试剂带中电解质多聚体释放出的H+增多,溴麝香草酚蓝为分子型,呈现黄色;尿比重偏低时,尿液中所含盐类成分较少,试带中电解质多聚体释放出的H+减低,溴麝香草酚蓝多为离子型,呈现蓝色。这种尿液中所含盐类成分的高低可由试剂块中的酸碱指示剂变化显现出来,颜色由蓝色经绿色、茶绿色至黄色变化,进而换算成尿液的比重值。
参考文献
[1]梁秀兰;张洁;尿干化学分析仪检测胆红素对白细胞结果的影响[J];实用医技杂志;2007年36期
[2]丛玉隆,马骏龙;尿液干化学分析与显微镜检查[J];中华医学检验杂志;1997年03期