山楂水提物对心衰大鼠心功影响的研究

山楂水提物对心衰大鼠心功影响的研究

于晶肖成涛

于晶肖成涛（黑龙江哈药集团三精医药商贸有限公司150008）

【中图分类号】R541【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）19-0145-03

【摘要】目的研究山楂水提物对阿霉素诱导的心衰大鼠心功能改善作用，并通过对心肌NO的测定，探讨其作用机制。方法腹腔注射阿霉素复制心衰大鼠模型。随机分为模型组、空白组、卡托普利组、山楂水提物高、中、低剂量组，给药4周后，测定大鼠左心室内压、最大上升（下降）速率；心肌NO含量。结果山楂水提物可改善心衰导致的左心室收缩压、最大上升（下降）速率绝对值的降低（P<0.01；P<0.05）；并可以抑制模型大鼠心室舒张压的增高（P<0.05）；降低心肌NO的含量(P<0.01)。结论山楂水提物可改善心衰症状，其机制可能与正性肌力作用和抗氧化等作用有关。

【关键词】山楂水提物心衰NO心室内压心功

心力衰竭亦称为心功能不全，是指在有足量静脉回血情况下，由于心脏功能障碍，心脏的输出血量不能满足正常代谢需要的疾病。临床上常用强心、扩血管、利尿药及神经内分泌拮抗剂进行治疗。近年来，中医药对心衰的临床治疗研究取得了较大的进展，疗效显著，且副作用少。中药山楂来源于蔷薇科植物山里红的干燥成熟果实，具有活血化瘀的功效。近年临床亦用于心衰、冠心病等疾病的治疗。本实验就山楂水提物对阿霉素诱导的心衰SD大鼠心功的改善作用进行了实验研究，通过对心衰大鼠心肌NO含量、心室内压等指标的测定，探讨其治疗心衰的作用机理。

1材料与方法

1.1实验材料

1.1.1实验动物SD大鼠72只，雄性，体重180～200g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，动物合格证号SCXK(黑)2008004。实验环境：温度20-22℃，相对湿度：30-35%。

1.1.2实验药物及试剂山楂(北京同仁堂制药集团哈尔滨药店，经鉴定来源为蔷薇科植物山里红，CrataeguspinnatifidaBge.Var.majorN.E.Br.)将山楂药材1000g用十倍水煎煮二次，每次1h，合并滤液浓缩至1000mL，定容。每毫升供试药液相当于1g原药材，保存于4℃冰箱。临用前，按生药量计算，配制成0.25g/ml(低剂量组)、0.5g/ml(中剂量组)、1g/ml(高剂量组)三个浓度。阳性对照药：卡托普利（海南普利制药有限公司，批号5103-10-047A）加水研磨，配制成1mg/ml的混悬液，每次使用前摇匀。注射用盐酸阿霉素(深圳万乐药业有限公司，批号:0905E1)用生理盐水配制成2mg/ml溶液。戊巴比妥钠(上海泰瑞尔生物技术有限公司批号:060928)。NO试剂盒(购自南京建成生物工程研究所)。

1.1.3实验仪器十六导生理记录仪MP150；HUMALY-ZER2000型半自动生化分析仪；恒温水浴箱；高速低温离心机R21；匀浆器(均由黑龙江中医药大学实验中心提供)。

1.2实验方法

1.2.1模型制备取SD大鼠60只，按阿霉素诱导心衰方法[1]复制模型。大鼠腹腔注射2mg/kg盐酸阿霉素,每周1次,共6周。

1.2.2分组及给药将造模大鼠随机分成模型组、阳性对照组、山楂水提物高、中、低剂量组，每组12只，未造模的12只大鼠为空白组。进行造模的第5周开始灌胃给药（在给予试药的同时，继续注射2周阿霉素），阳性对照组每天给予卡托普利水溶液20ml/kg、山楂水提物高、中、低剂量组分别按20ml/kg给予相应浓度试药，空白组和模型组同步给予等体积生理盐水，1次/d，给药4周，至第8周检测指标。

1.2.3大鼠心室内压、最大上升（下降）速率测定于末次给药1h后，将所有实验大鼠，按文献方法[2]用2%戊巴比妥钠生理盐水溶液注射麻醉。在操作台上固定，分离右侧颈总动脉,将PE50管沿颈动脉插入左心室。插管与压力传感系统、十六导生理记录仪相连接，根据心室内压波形确定PE50管的位置，稳定后测量收缩末期心室内压(LVESP)、舒张末期心室内压(LVEDP)、心室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)。

1.2.4心肌NO值测定将测完心功数据的大鼠处死，迅速取出心脏，取1/3心脏(包括左右心室肌各半)，先用磷酸缓冲液(PH7.2～7.4)冲洗3次，再加该缓冲液用匀浆器低温研磨，制成10%匀浆，将匀浆低温离心10min，取上清液，按照NO试剂盒说明书方法，测吸光度值。

1.2.5统计学处理计量资料用x-±s表示。用SPSS13.0统计软件进行统计学处理，组间比较用t检验。实验过程中有部分大鼠死亡，不纳入统计计算，n值见各表。

2结果

2.1心室内压测定

阿霉素诱导的心衰模型组与空白组比较，心室收缩压明显降低，差异有显著性意义（P<0.01）；心室舒张压明显升高，差异有显著性意义（P<0.05）。各给药组心室收缩压较模型组均有升高，其中，阳性组差异有显著性意义(P<0.01)，高剂量组、中剂量组与模型组比较，差异有显著性意义(P<0.05)；高剂量组与阳性组比较，差异无显著性意义(P>0.05)。各给药组心室舒张压较模型组均有降低，其中，阳性组、高剂量组、中剂量组与模型组比较，差异有显著性意义(P<0.05)；高、中、低剂量组与阳性组比较，无显著性差异(P>0.05)。见表1。

表1大鼠左心室内压组间比较（x-±S）

组别数量（n）左心室收缩压左心室舒张压

LVSP(mmHg)VDP(mmHg)

高剂量组974.1±11.1△▲9.1±4.6△▲

中剂量组1072.4±10.9△9.9±3.3△▲

低剂量组868.3±10.710.8±3.6▲

阳性组1082.7±11.1△△9.9±3.9△

模型组1061.4±12.913.8±3.9

空白组1194.1±8.3△△7.4±2.1△

注：1）与模型组比较△P<0.05，△△P<0.01；2)与阳对组比较▲P>0.05。

2.2心室内压最大上升和下降速率测定

模型组与空白组比较，心室内压最大上升和下降速率绝对值明显降低，差异有显著性意义（P<0.01）。各给药组心室内压最大上升和下降速率绝对值均有回升。心室内压最大上升速率，阳性组与模型组比较差异有显著性意义(P<0.05)；山楂水提物各剂量组与模型组比较，回升的差异无显著性意义(P>0.05)，但与阳性组比较亦无显著性差异(P>0.05)。心室内压最大下降速率绝对值，阳性组及山楂水提物各剂量组与模型组比较，差异均有显著性意义(P<0.05)；山楂水提物各剂量组与阳性组比较差异均无显著性意义(P>0.05)。见表2。

表2大鼠左心室内压最大上升和下降速率（x-±S）

注：1）与模型组比较△P<0.05，△△P<0.01；2)与阳对组比较▲P>0.05。

2.3心肌NO含量测定

心肌细胞NO含量，模型组明显高于空白对照组，差异有显著性意义(P<0.01)；阳性对照组和山楂水提物高、中、低浓度组明显低于模型组，差异有显著性意义(P<0.01)；山楂水提物高、中剂量组与阳性对照组比较，差异无显著性意义(P>0.05)。见表3。

表3大鼠血清NO含量组间比较（x-±S）

组别数量（n）NO含量（μmol/L）

高剂量组975.7±9.8△△▲

中剂量组1077.0±10.1△△▲

低剂量组880.9±9.2△△

阳性组1068.9±8.8△△

模型组1095.5.6±10.7

空白组1138.5±6.9△△

注：1）与模型组比较△△P<0.01；2)与阳对组比较▲P>0.05。

3讨论

用阿霉素复制心衰大鼠模型是多因素多途径毒理作用的结果[3]。采用该模型研究山楂水提物对心脏的保护作用的实验结果表明，山楂水提物各剂量组均可显著减少心肌NO产生，可能通过抗氧化、抗自由基，抑制心肌脂质过氧化[4]，对阿霉素诱导的心肌损伤产生保护作用。另外，山楂水提物各剂量组均能增强模型大鼠心肌收缩力、提高心室内压最大上升和下降速率，从而改善心衰症状，其机理可能与β-肾上腺素受体和Ca2+通道有关[5]。与卡托普利比较，山楂水提物正性肌力作用较弱，提高心室内压最大上升速率效果不明显，但对舒张压的降低效果明显。临床报道其具有较好的强心疗效和安全性[6]。这可能是其抗心肌缺血、降血脂、扩血管、降血压等综合作用的结果[7]。

参考文献

[1]杨建业.阿霉素诱导大鼠心衰模型的建立[J].郧阳医学院学报,2005,24(5):269-271.

[2]雷立权,韩启德,高广道等.关于大白鼠左室心肌收缩性能指标的测定和评价[J].西安医学院学报,1981,2(3):326-332.

[3]MinottiG,MennaP,SalvatorelliE,eta.lAnthracyclines:molecularadvancesandpharmacologicdevelopmentsinantitumoractivityandcardiotoxicity[J].PharmacolRev,2004,56:185.

[4]叶希韵,张隆,张静,王耀发.山楂叶总黄酮对乳鼠心肌细胞缺血缺氧损伤的实验研究[J].中国现代应用药学,2005,22(3):202-204.

[5]LiQZH,ChenXJ.AstudyontheactionofCrataeguspinnatifidaflavonesonisolatedfrogmyocardiumJinan[J].DaxueXuebao(ZiranKexueYuYixueban),1996,17(3):86-89.

[6]ZapfeGjun.ClinicalefficacyofCrataegusextractWS1442incongestiveheartfailureNYHAclassII[J].Phytomedicine,2001,8(4):262-266.

[7]江爱龙,刘荣华,陈兰英等.山楂药理与临床研究进展[J].武警医学院学报,2009,18(2):154-158.