丹皮酚和芍药苷配伍对急性心肌缺血大鼠心肌miRNA表达谱的影响

丹皮酚和芍药苷配伍对急性心肌缺血大鼠心肌miRNA表达谱的影响

郭齐刘龙窦兴欣霍东方邹志云李永金王志

（江苏大学医学院江苏镇江212013）

【摘要】目的：探讨丹皮酚和芍药苷（丹芍）配伍对急性心肌缺血大鼠心肌miNRA表达谱的影响。方法：采用在体结扎大鼠心脏冠状动脉前降支法建立大鼠急性心肌缺血模型。实验分为假手术组、模型组、丹皮酚100mg/kg+芍药苷25mg/kg配伍组。连续给药5天，假手术组和模型组给予等量生理盐水。5天后，取各组大鼠心肌组织进行miRNA表达谱检测。结果：与假手术组比较，模型组共筛选出13个与差异表达的miRNA，8个表达上调，5个表达下调。丹配伍治疗后有3个miRNAs表达上调，4个表达下调。结论：丹芍配伍可能是通过影响相关miRNA的表达来调控急性心肌缺血的主要信号通路，从而发挥对心肌的保护作用。

【关键词】丹皮酚；芍药苷；急性心肌缺血；miRNA；基因芯片

【中图分类号】R541【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2016）34-0188-02

1.引言

心肌缺血导致的猝死严重威胁着人类的生命。药物干预心肌缺血损伤的作用及机制研究一直以来都是心血管领域研究的热点和重点。miRNA是近年在真核生物中发现的一类具有调控功能的非编码RNA，在心肌缺血损伤的发生发展过程中发挥重要作用[1]。笔者将丹皮酚和芍药苷配伍，对缺血心肌发挥了良好的保护作用[2-4]。本研究将从二者对miRNA表达的影响探讨丹芍配伍干预心肌缺血损伤的机制。

2.材料与方法

2.1材料

健康Wister大鼠30只（江苏大学医学实验中心）；药品：丹皮酚和芍药苷由常州神马药业有限公司提供；大鼠miRNA芯片由Affymetrix公司提供。

2.2方法

2.2.1分组与给药Wister大鼠每组10只，分为假手术组、模型组、丹芍组，连续给药5天，假手术组和模型组给予等量生理盐水。

2.2.2造模末次给药后麻醉大鼠，记录心电图。稳定后参照文献[5]，在体结扎大鼠冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌缺血模型。

2.2.3总RNA抽提及miRNA芯片检测将缺血区心肌组织磨成粉末，按TRIzol说明抽提总RNA。采用miRNA芯片进行检测，PredictionAnalysisforMicroarrays分析工具筛选差异表达的miRNA。

2.2.4统计学分析应用SPSS13.0统计软件进行单因素方差分析，P＜0.05有统计学意义。

3.结果

使用GenePix4000B系统及其软件分析原始数据。与假手术组比较，共筛选出13个差异表达的miRNA，见表1。与模型组比较，丹芍组共筛选出13个差异表达的miRNA，见表2。

4.讨论

miRNA在心肌缺血损伤的发展过程中发挥了重要作用，正在成为临床治疗的靶点。基于miRNA调控网络途径探讨中药干预心肌缺血损伤的作用机制将为临床防治心肌缺血损伤提供新的视角和思路，具有重要的理论意义和应用前景[6]。

本课题前期实验结果显示，丹芍配伍在心肌保护方面可协同增效。本研究利用miRNA芯片筛选出给药前后差异表达的miRNA，从miRNA调控网络途径初步探讨丹芍配伍干预心肌缺血损伤的作用机制。后续研究将对筛选的miRNA进行实验验证和生物信息学分析，以构建丹芍配伍干预心肌缺血损伤的miRNA调控网络。

【参考文献】

[1]季倩，李小波，张瑶俊.MicroRNA在急性心肌梗死中的研究进展[J].中华临床医师杂志，2015，9（9）：1694-1698.

[2]郭齐，田昕，杨傲然，王志国.丹皮酚和芍药苷配伍对大鼠心肌缺血损伤的保护作用[J].中国实验方剂学杂志，2012，18（18）：229-232.

[3]郭齐，郝伟，王蕊，李连达，赵乐.牡丹皮有效成分重组复方对犬实验性急性心肌梗死的影响[J].中国中医药信息杂志，2010，17（4）：39-40.

[4]李贻奎，宁可永，梁嵘.大鼠冠状动脉结扎心肌缺血模型方法的改进[J].中国新药杂志，2005，14（2）：427.

[5]王阶，李敏，刘咏梅，段练.miＲNA在冠心病治疗中的作用及与中医药的相关性[J].中国实验方剂学杂志，2015，（18）：221-224.