肾阳虚大鼠垂体-肾上腺皮质轴与垂体-性腺轴相关性研究

【摘要】  目的了解肾阳虚大鼠垂体-肾上腺皮质轴及垂体-性腺轴功能之间的相互关系。方法肌肉注射氢化可的松复制肾阳虚大鼠模型，采用分批宰杀的方法观察早期、中期和晚期肾阳虚大鼠垂体-肾上腺皮质轴及垂体-性腺轴功能指标，对测试数据进行相关性分析，探讨垂体-肾上腺皮质轴及垂体-性腺轴之间的变化规律和特征。结果正常组垂体-性腺轴激素中早期T与FSH有相关性且为负相关，晚期CORT与ACTH有正相关，模型组早期ACTH与LH有显著负相关，模型组中期FSH与LH有显著正相关性，CORT与T有正相关性。结论肾阳虚早期时垂体-肾上腺皮质轴与垂体-性腺轴的垂体激素有负相关性，即二轴存在相互抑制作用；但中期时靶腺的激素有正相关性，表现为平行关系，二轴同时受损；证实肾阳虚是一种综合的动态且可转化的功能态。

【关键词】  相关性 肾阳虚 垂体-肾上腺皮质轴 垂体－性腺轴

肾阳虚证涉及神经、内分泌、免疫系统的功能变化，是多系统和器官功能的综合表现。肾阳虚证的基础研究开展较多，许多研究表明肾阳虚证存在着下丘脑-垂体-靶腺轴不同环节、不同程度的功能紊乱，从而引起肾上腺皮质、垂体、甲状腺、性腺功能的改变。然而中医的“证”是一种综合的功能态，是动态、可发展、可转化的，其中相关的因素与指标十分繁杂，且对“证”影响程度不一。目前涉及肾阳虚动物动态变化的研究却少有报道，本文从肾阳虚引起的垂体-肾上腺皮质轴以及垂体-性腺轴激素水平改变入手，动态观察肾阳虚大鼠垂体-肾上腺皮质轴及垂体-性腺轴功能之间的相关性，以获得肾阳虚证本质的更多的认识。

    1  器材

    1.1   试剂与仪器  ACTH（促肾上腺激素）、CORT（皮质醇）、FSH（促卵泡激素）、LH（黄体生成素）、T（睾酮）放射免疫试剂药盒由北京北免东雅生物技术研究所提供；FJ-2008Pγ放射免疫计数器（国营262厂生产）。

    1.2  动物  雄性SD大鼠（由江西省实验动物中心提供，合格证号：医动字第021-97-04号），体重220～250 g，购进后，饲养条件室温为（20±2）℃，自然光照，自由进水进食。

    2   方法

    2.1  　动物分组　取雄性SD大鼠30只，适应环境5 d，随机分为正常对照组和肾阳虚模型组，每组15只。

    2.2  给药方法正常对照组用生理盐水0.3 ml后肢肌肉注射，1次/d，自由饮水、饮食，连续29 d；肾阳虚模型组［1］以氢化可的松注射液充分混匀，按2.5 mg／100 g后肢肌肉注射，1次/d，自由饮水、饮食,连续29 d。

    2.3  动物处理采取毒理实验常用的方法即分批宰杀，并且，为了获得可靠实验数据，对动物采取平行处理，即两组动物分别在第15天（早期，5只）、第23天（中期，5只）、第30天（晚期，5只）处死。

    2.4  生物学指标的测试取动物血清用放射免疫分析法检测：①ACTH；②CORT；③T；④FSH；⑤LH。

    2.5  统计学方法所有的测试数据来源进行正态性检验，然后用Pearson相关分析，计算简单相关系数r，对各组数据的进行相关性分析，所有统计资料在SPSS10.0软件包上完成。 3  结果

    见表1。表1  各组各时期垂体-肾上腺皮质轴与垂体-性腺轴各测试指标相关系数正常组早期FSH与LH比较，* P＜0.01；正常组晚期CORT与ACTH比较， ▲P＜0.05；模型组早期ACTH与LH比较，☆P＜0.01；模型组中期FSH与LH比较，△P＜0.01；CORT与T比较，▽P＜0.05

    结果提示,正常组早期FSH与LH有显著正相关，r=0.825，P＜0.01；正常组晚期CORT与ACTH有正相关，r=0.681,P＜0.05；模型组早期（15d）ACTH与LH有显著负相关，r=-0.885，P＜0.01；模型组中期（23d）FSH与LH有显著正相关性，r=0.911, P＜0.01；CORT与T有负相关性，r=-0.661, P＜0.05；其余测试指标在各组各时期之间均无相关性。

    4  讨论

    现代医学认为，神经内分泌系统与免疫系统之间形成一个网络，信息传递引起的反馈是网络动态平衡的必要条件,而物质的表达与运动是信息传递的基础。研究表明肾阳虚证与神经、内分泌、免疫系统的功能改变密切相关，是多系统和器官功能的综合表现［2］。研究证实肾阳虚的调控枢纽定位于下丘脑 ［3］，肾虚是由于介导网络平衡功能的相关物质基因表达出现异常，使神经内分泌免疫网络的功能失衡［4］。下丘脑- 垂体- 靶腺轴(肾上腺皮质轴、甲状腺轴、性腺轴) 的功能障碍和功能低下是肾阳虚证的基础［5，6］，肾阳虚会引起下丘脑-垂体-靶腺（肾上腺皮质、甲状腺、性腺）不同环节、不同程度的功能紊乱［7，8］，反映这几个轴功能改变的指标是肾阳虚证较为特异的指标［9］。

    肾阳虚动物下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子的信使核糖核酸表达降低，引起下丘脑-垂体-靶腺(甲状腺、肾上腺皮质、性腺)功能的改变［10］。当血中CORT变化时，网络的其他信息传递随之出现异常，与此相关的反馈必将出现复杂变化，垂体-性腺轴的FSH、LH和T的水平可能发生相应的变化。

    本文对肾阳虚时垂体-肾上腺皮质轴与垂体-性腺轴功能的进行相关性分析，计算动物各时期垂体-肾上腺皮质轴与垂体-性腺轴各测试指标相关系数，结果提示：正常组早期FSH与LH有显著正相关，说明二者在垂体-性腺轴的调节中变化一致；正常组晚期CORT与ACTH有正相关，这符合体内激素反馈调节的生理规律；模型组早期ACTH与LH有显著负相关，说明在肾阳虚时二者有一定的相互抑制；模型组中期FSH与LH有显著正相关性，说明肾阳虚时二者地位与变化一致；模型组中期CORT与T有正相关性说明肾阳虚时变化一致；综上说明肾阳虚早期时垂体-肾上腺皮质轴与垂体-性腺轴垂体激素有负相关性，即二轴存在相互抑制作用；但在中期时靶腺激素存在正相关性，是平行关系，二轴同时受损；证实肾阳虚是一种综合的动态且可转化的功能态；而对于晚期各指标无相关性这一结果，考虑可能是模型动物因为氢化可的松累积引起毒性症状，也提示造模时间不宜过长。

【参考文献】
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［8］ 张新民,段元丽,沈自尹,等．三类中药复方对侧脑室内注射IL-1大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴反应状态的影响［J］．中医杂志，2002，43(1)：59.

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［10］ 俞 瑾，陈晓英，毛秋芝. 肾主生殖的实验研究［J］．中西医结合杂志，1989，9(9)：548