列精海鞘化学成分研究

【摘要】  目的研究列精海鞘Amaroucium sp.的化学成分。方法采用多种分离技术对列精海鞘乙醇提取物的正丁醇部位分离纯化，根据其理化数据和光谱数据进行结构鉴定。结果分离得到5个化合物，结构鉴定为尿嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶核苷、尿嘧啶脱氧核苷和胸腺嘧啶脱氧核苷。结论以上5个化合物均为首次从该海洋动物中分离得到。

【关键词】  海鞘 列精海鞘 化学成分 结构鉴定

海鞘(Ascidian)属于原索动物海鞘纲。近年的研究表明，海鞘中含有许多结构奇特的生理活性物质，是人类可以利用的重要生物资源。目前，已从海鞘中分离得到多种结构复杂多变的活性成分，如大环内酯［1］和生物碱［2］等，这些化合物大多数都具有强烈的生理活性。因此，海鞘中生理活性成分的研究越来越受到众多研究者的重视。我国海鞘资源丰富，种类繁多，目前已经对多种海鞘进行了化学成分研究［3～7］。本文首次报道采自青岛海域的列精海鞘Amaroucium sp.的化学成分，从中分离得到5个核苷类化合物，应用IR，MS，1HNMR，13CNMR等现代波谱学方法确定了它们的化学结构，分别为尿嘧啶①，胸腺嘧啶②，尿嘧啶核苷③，尿嘧啶脱氧核苷④和胸腺嘧啶脱氧核苷⑤。

    1  器材

    XT-4显微熔点测定仪，Nicolet impact 400型傅立叶变换红外光谱仪，Inova 300型核磁共振仪，Autospec-Ultima ETOF型质谱仪，BüCHI B-687型中压柱色谱仪，薄层色谱硅胶GF254和柱色谱硅胶(160-200目)均为青岛海洋化工有限公司产品，凝胶Sephadex LH-20为Pharmacia公司产品，所用其他试剂为分析纯。

    2  方法

    列精海鞘(湿重3 kg)于2002-01采自青岛附近海域，由中国科学院海洋所黄修明研究员鉴定。新鲜样品切碎后用95%的乙醇室温浸泡提取3次，48 h/次，提取液合并，减压浓缩得褐色浸膏201 g。将浸膏悬浮于2 000 ml蒸馏水中，依次用醋酸乙酯（2 000 ml×3）和正丁醇萃取(2 000 ml×3)，浓缩得醋酸乙酯萃取物14.3 g，正丁醇萃取物45.3 g。正丁醇部分进行中压反相硅胶柱色谱分离，以H2O-CH3OH梯度洗脱。H2O-CH3OH (2∶1)洗脱部分经过凝胶Sephadex LH-20和正相硅胶柱层析分离纯化得到化合物1～5。

    3   结果与讨论

    化合物1：白色结晶, mp 335～337℃; IRKBrνmax (cm-1): 3 100, 2 930, 2 852, 1 985, 1 708, 1 500, 1 448, 1 411, 1 386, 1 232, 991, 823, 760; FAB-MS : 111［M-1］－; 1H NMR(DMSO-d6) δ: 11.0(s, 1H), 10.8(s, 1H), 7.37(d, J=7.8 Hz, 1H), 5.43(d, J =7.8 Hz, 1H); 13C NMR(DMSO-d6) δ: 152.1(s), 165.0(s), 142.8(d), 100.9(d)。以上波谱数据与文献［8］中尿嘧啶的数据一致。

    化合物2：白色结晶, mp 315～317℃; IRKBrνmax (cm-1): 3 207, 3 062, 2 929, 1 732, 1 676, 1 483, 1 446, 814, 762;  FAB-MS : 125［M-1］－; 1H NMR(DMSO-d6) δ: 10.99, (s, 1H), 10.57(s, 1H), 7.24(s, 1H) , 1.71(s，3H); 13C NMR(DMSO-d6) δ: 164.8(s), 151.3(s), 137.5(d), 107.7(s), 11.7(q)。化合物2的波谱数据与文献［8］中胸腺嘧啶的数据一致。

    化合物3：白色结晶, mp192～193℃; IRKBrνmax (cm-1): 3 350, 2 925, 2 802, 1 697, 1 682, 1 668, 1 269, 1 209, 1 097, 1 055, 982, 906, 831, 768; FAB-MS : 243［M-1］－; 1H NMR(DMSO-d6) δ: 11.3(s), 7.87(d, J =8.1 Hz, 1H), 5.63(d, J =8.1 Hz, 1H), 5.76(d, J =5.7 Hz, 1H), 5.09(m, 1H), 4.01(m, 1H), 3.95(m, 1H), 3.58(m, 2H); 13C NMR(DMSO -d6) δ: 151.4(s), 163.8(s), 102.4(d), 141.4(d), 88.3(d), 70.5(d), 74.1(d), 85.5(d), 61.4(t)。由此推断化合物3为尿嘧啶核苷。化合物3的以上波谱数据与文献［9］中尿嘧啶核苷的数据一致。化合物4：白色结晶, mp: 163～164℃; IRKBrνmax (cm-1): 3 269, 3 001, 2 933, 2 804, 1 701, 1 674, 1 468, 1 392, 1 263, 1 057, 960, 860, 766;  FAB-MS: 227［M-1］－; 1H NMR(DMSO-d6) δ: 11.27(s, 1H), 7.83(d, J=8.1 Hz, 1H), 5.62(d, J=8.1 Hz, 1H), 6.14(t, J=6.9 Hz, 1H), 4.20(m, 1H), 3.75(m, 1H), 3.52(m, 2H), 2.06(m, 2H); 13C NMR(DMSO-d6) δ: 151.0(s), 163.7(s), 102.4(d), 141.2(d), 88.0(d), 40.1(t), 71.0(d), 84.8(d), 61.8(t)。因此，推断化合物4为尿嘧啶脱氧核苷。化合物4的以上波谱数据与尿嘧啶脱氧核苷的文献［10］数据一致。

    化合物5：白色结晶, mp; 185～187℃; IRKBrνmax (cm-1): 3 311, 3 024, 2 837, 1 709, 1 699, 1 660, 1 477, 1 435, 1 273, 1 120, 1 066, 1 011, 958, 852,758; FAB-MS : 241［M-1］－; 1H NMR(DMSO-d6) δ: 11.3(s), 7.68(s, 1H), 6.15(t, J=6.9 Hz, 1H), 4.21(m, 1H), 3.74(m, 1H), 3.56(m, 2H), 2.07(m, 2H),1.76(s, 3H); 13C NMR(DMSO-d6) δ: 150.4(s), 163.7(s), 109.4(s), 136.2(d), 12.3(q), 87.2(d), 39.7(t), 70.4(d), 83.7(d), 61.3(t)。因此，确定化合物5为胸腺嘧啶脱氧核苷。以上波谱数据与文献［10］中胸腺嘧啶脱氧核苷的数据一致。

【参考文献】
  ［1］ Kobayashi J, Cheng J F, Walchlj M R，et al. Cystodytins A, B, and C, novel tetracyclic aromataic alkaloids with potent antineoplastic activity from the okinawan tunicate Cystodytes dellechiajei ［J］. The Journal of Organic Chemistry, 1988, 53(26): 6147.

［2］ Kobayashi J, Cheng J F, Walchlj M R，et al. Iejimalides A and B, novel 24-membered macrolides with potent antilirkemic activity from the Okinawan tunicate Eudistoma cf. rigida ［J］. The Journal of Organic Chemistry, 1988, 53(8): 1800.

［3］ 李 亮, 王长云, 郭跃伟. 中国黄海柄海鞘的化学成分［J］. 中国天然药物, 2007, 5(6)： 408.

［4］ 劳彦斌, 蒋 亭, 李 军, 等. 柄海鞘Styela clava次生代谢产物的化学研究(I) ［J］. 中国海洋药物, 2001, 20(2)：12.

［5］ 王超杰, 苏镜娱, 曾陇梅. 皱瘤海鞘的化学成分研究［J］. 分析化学, 2001, 29(11)：1311.

［6］ 王超杰, 韩 光, 苏镜娱, 等. 冠瘤海鞘的化学成分［J］. 分析化学, 2001, 29(2)：168.

［7］ 王超杰, 苏镜娱, 曾陇梅. 冠瘤海鞘Styela canopus的化学成份研究［J］. 中国海洋药物, 2000, 19(1)：1.

［8］ 史大永, 韩丽君, 孙 杰, 等. 刺状鱼栖苔化学成分研究［J］. 中国中药杂志, 2007, 32(11): 1035.

［9］ 麻兵继, 阮 元, 刘吉开. 人工蛹虫草中核苷类化学成分的研究［J］. 中药材, 2007, 30(8): 957.

［10］ 季宇彬, 王 禹, 林文翰. 中国南海海绵正丁醇部分中的核苷类成分研究［J］. 中草药, 2004, 35(11): 1211.