白芷化学成分研究

【摘要】  　　目的研究白芷的化学成分。方法采用硅胶柱、RP-C18及Sephadex LH-20凝胶柱色谱法对白芷水溶性化学成份进行分离，用理化性质及波谱方法鉴定结构。结果从白芷Angelica dahurica分离鉴定了5个化合物：① 7-O-β-D-Apiofuranosyl-(1→6)-β-D-Glucopyranosyl-Scopoletin(xeroboside)；②aesculetin -6-O-β-D- apiofuranosyl-(1→6)-O-β-D- glucopyranoside；③ tomenin；④ isoscopolin ；⑤Osmanthuside H。结论化合物1～5均首次从伞形科中分离得到。

【关键词】  伞形科 白芷 化学成分

　　Abstract：ObjectiveTo study the chemical constituents of Angelica dahurica．MethodsThe constituents were isolated and purified by silica gel, RP-18, and Sephadex LH-20 column chromatography. Their structures were identified by physiochemical properties and spectral analysis．ResultsFive compounds were isolated and identified as 7-O-β-D-Apiofuranosyl-(1→6)-β-D-Glucopyranosyl-Scopoletin①， aesculetin-6-O-β-D-apiofuranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside②， tomenin③， isoscopolin④， Osmanthuside H⑤．ConclusionCompound 1 to 5 were obtained from Umbeliferae for the first time．

　　Key words：Umbeliferae；  Angelica dahurica；  Chemical constituent
   
　　白芷Angelica dahurica(Fisch. ex Hoffm.) Benth. Et Hook. f. var. formosana(Boiss.) Shan et Yuan为伞形科(Umbeliferae)当归属(Angelica)植物。白芷以根入药，始载于《神农本草经》，列为中品。《中国药典》各个版本均有收载。白芷具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓之功效，用于感冒头痛、鼻塞、鼻渊、牙痛、白带异常、疮疡肿痛等病症。白芷中的香豆素具有抗肿瘤、抗氧化、抗微生物、降压等多种生物活性。前人已经对白芷中脂溶性的香豆素类做了大量而深入的研究，但对其水溶性的化学成分研究甚少。本文通过对白芷水溶性部分的分离得到了6个苷类成分，通过多种理化方法及光谱学手段鉴定为①7-O-β-D-Apiofuranosyl-(1→6)-β-D-Glucopyranosyl- Scopoletin； ②aesculetin-6-O-β-D-apiofuranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside；③ tomenin； ④ isoscopolin ；⑤ Osmanthuside H。化合物1～5均为首次从伞形科中分离得到。

　　1  器材

　　Bruker AV-300，AV-500 型核磁共振光谱仪；X4型数字显示显微熔点测定仪（温度未校正）； Agilent 1100 LC/MSD SL；LABCONCO冷冻干燥仪；JASCO P-1020旋光测定仪半制备型高效液相色谱仪Waters 600 型；检测器Waters2487紫外双波长检测器；Agilent-1100高效液相色谱仪；柱色谱材料为硅胶(200-300目) 、RP-C18（YMC;12nm）及Sephadex LH-20（Amersham Biosciences）；柱色谱试剂均为分析纯，高效液相色谱试剂均为色谱纯。

　　白芷根于200403采自江苏省盐城市洋马镇，经江苏省中国科学院植物研究所袁昌齐研究员鉴定，凭证标本现存放于江苏省中国科学院植物研究所标本馆内。

　　2  提取与分离

　　白芷根（38 kg）用95％的乙醇提取3次，合并提取液，减压浓缩至无醇味。提取液依次用石油醚、醋酸乙酯萃取，剩余部分为水部分。将水部分上样于D101大孔树脂柱，水－乙醇梯度洗脱，分为6个部分。其中50％洗脱部分分别进行硅胶柱层析，氯仿－甲醇（10∶1～7∶3）梯度洗脱，各流分采用薄层或高效液相检识，合并相类似组分，反复反相柱层析分离，凝胶纯化，得到6个化合物。

　　3  结构鉴定

　　3.1  化合物1  

　　白色无定形粉末（冻干），mp 170～172℃，［α］21.7D= -52.40(c=0.065 甲醇：水=40：60)，紫外灯365，254 nm下均显示蓝绿色荧光。ESI-MS m/z：509［M+Na］+，示其分子量为486，结合1H-NMR，13C-NMR谱数据推断分子式为C21H26O13。化合物的1H-NMR，13C-NMR，HMQC及HMBC谱数据详见表1。综合各谱数据及与文献［1］对照鉴定化合物为7-O-β-D-Apiofuranosyl-(1→6)-β-D -Glucopyranosyl-Scopoletin(xeroboside)。表1  化合物1的1H-NMR，13C-NMR，HMQC及HMBC谱数据（略）

　　3.2  化合物2 

　　白色无定形粉末（冻干），［α］21.7D= -55.20(c=0.065  甲醇∶水=40∶60)，紫外灯365 nm及254 nm下均显示蓝绿色荧光，ESI-MS m/z：495［M+Na］+，示其分子量为472，结合1H-NMR，13C-NMR谱数据推断分子式为C20H24O13。化合物的1H-NMR，13C-NMR，HMQC及HMBC谱数据见表2。综合以上各谱数据及与已知文献［2］对照鉴定化合物为aesculetin-6-O-β-D- apiofuranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside。

　　3.3  化合物3白色无定形粉末（氯仿-甲醇），mp 207℃，［α］21.7D= +47.75(c=0.07 甲醇∶水=40∶60)，紫外灯365，254 nm下均显示蓝色荧光。ESI-MS m/z∶407［M+Na］+示其分子量为384，结合1H-NMR，13C-NMR谱数据推断分子式为C17H20O10。化合物的1H-NMR，13C-NMR，COSY，HMQC及HMBC谱数据详见表3。综合各谱数据［3］鉴定化合物为tomenin。表2  化合物2的1H-NMR，13C-NMR，COSY，HMQC及HMBC谱数据（略）表3  化合物3的1H-NMR，13C-NMR，COSY，HMQC及HMBC谱数据（略）3.4  化合物4 

　　白色无定形粉末（冻干），mp 140～141℃，［α］19.4d= -52.30(c=0.06 甲醇∶水=40∶60)，紫外灯365及254 nm下均显示蓝色荧光，结合1H-NMR，13C-NMR谱数据推断分子式为C16H18O9。1H-NMR（Pyridine-d5 500 MHz）δ：6.27（1H，d，J=9.5 Hz，3-H），7.56（1H，d，J=9.5 Hz，4-H），7.62（1H，s， 5-H），6.90（1H，s， 8-H），3.70（3H，s，OCH3），5.65（1H，d，J=7.1 Hz，1-H-Glc）。综合以上数据及与已知文献［4］对照鉴定化合物为isoscopolin。

　　3.5  化合物5 

　　白色无定形粉末（冻干），［α］21.7D= -55.20(c=0.065 甲醇∶水=40∶60)， ESI-MS m/z：455［M+Na］+，示其分子量为432，结合1H-NMR，13C-NMR谱数据推断分子式为C19H28O11。1H-NMR（Pyridine-d5 500 MHz）δ：7.07（2H，d，J=8.5Hz，3-H和5-H），7.19（2H，d，J=8.6 Hz， 2-H和6-H），2.96（2H，t，J=7.4 Hz， β-H），4.34（1H，dd，J=7.5，11.2 Hz，3'a-α），3.88（1H，dd，J=7.4，11.2Hz，3'a-α），4.82（1H，d，J=7.1Hz，1-H-Glc），5.75（1H，d，J=2.6 Hz，1-H-Api）。13C-NMR（Pyridine-d5 125 MHz）δ：129.53（C-1），130.50（C-2），116.13（C-3），157.23（C-4），116.13（C-5），130.50（C-6），71.12（C-α），35.88（C-β），104.58（C-1-Glc），74.95（C-2-Glc），78.45（C-3-Glc），71.12（C-4-Glc），77.08（C-5-Glc），68.87（C-6-Glc），111.07（C-1- Api），77.74（C-2- Api），80.37（C-3- Api），75.00（C-4- Api），65.48（C-5- Api）。综合以上数据及与文献［5］对照鉴定化合物为Osmanthuside H。

　　4  结果与讨论

　　前人从茜草科植物山石榴 Xeromphis spinosa［1］以及Xeromphis obovata ［6］中分到过此化合物1，故此次为首次从伞形科中分离得到。但化合物的熔点有文献［1］报道为238～234℃，有文献［2］报道为192～197℃，而本次实验测得的熔点为170～172℃，具体原因有待进一步确定。

　　前人从忍冬科植物Lonicera gracilipes［3］中分得化合物2，但是只报道了1H-NMR，13C-NMR谱数据，且C-6和C-7的归属颠倒了。本文通过对其进行HSQC，HMBC等二维谱的研究，纠正了前人的错误，丰富了该化合物的波谱数据。

　　日本学者Hasegawa［3］最早从蔷薇科植物Prunus tomentosa中分离得到化合物3，但没有报道核磁数据，以后未见此化合物的报道。本文完善了该化合物的核磁数据，并且用二维谱进行了全归属，丰富了该化合物的波谱数据，并首次报道了此化合物的旋光值。

　　化合物6在自然界植物中分布广泛，但在伞形科植物中此类化合物较少见。

【参考文献】
  　　［1］S. P. Sati， D. C. Chaukiyal， O. P. Sati ［J］.Jounal of Natural Products， 1989 ，52 (2)：376.
　　
　　［2］T. Iossifova， B. Vogler， I. Kostova. Escuside， a new coumarin-secoiridoid from Fraxinus ornus bark［J］.Fitoterapia ，2002， (73)：386.

　　［3］Hasegawa， Masao. Flavonoids of various Prunus species. X. Wood constituents of Prunus tomentosa［J］. Shokubutsugaku Zasshi ，1969，82(978)：458.

　　［4］Komissarenko. N. F， Derkach. A. I，Komissarenko. A. N. Coumarins of Aesculus hippocastanum L ［J］.Fitochemistry Rastitel'nye Resursy，1994， 30(3)：53.

　　［5］Warashina. Tsutomu， Nagatani. Yoshimi， Noro， Tadataka. Constituents from the bark of Tabebuia impetiginosa［J］. Chemical Pharmaceutical Bulletin，2006，54(1)：14.

　　［6］S. Sibanda， B. Ndengu， G. Multari. A Coumarin glucosides from Xeromphis obav- ata［J］. Phytochemistry，1989， 28(5)：1550.