苗药大果木姜子油口服乳剂的质量标准研究

【摘要】 　　目的研究苗药大果木姜子油口服乳剂的质量标准。方法通过气相色谱法测定大果木姜子油口服乳剂中的主要成分1，8-桉叶素含量，以HP-1弹性石英毛细管柱为色谱柱，高纯氮气为载体，分流比为30：1，检测气为FID检测气。结果1，8-桉叶素在浓度为0.427 6～2.565 6μg 内，峰面积与进样浓度有良好的线性关系，r=0.999 6（n=6），平均回收率为99.29%，RSD= 2.64%。结论所建立的方法简便、准确、重复性好,可作为该制剂的质量控制。

【关键词】 苗药； 大果木姜子油； 口服乳剂； 气相色谱； 薄层鉴别； 质量标准

　　大果木姜子油是从樟科植物米槁Cinnamomum migao H.W.Li的干燥果实经水蒸气蒸馏得到的挥发油，大果木姜子油作为贵州苗族特色药材收载于2003版《贵州省中药材、民族药材质量标准》中，其性味辛、温，归肝、胃经；能温中散寒、理气止痛，主治胃痛、腹痛、胸闷等症［1］ 。经现代药理学研究表明其对猫急性实验性心肌缺血和梗塞有良好的保护作用,可改善麻醉猫血流动力学和增加冠脉流量、抗实验性心律失常、镇痛等［2］ 。为有利于大果木姜子油的深度开发，并丰富其剂型，经实验研究选择Teen-80和大豆磷脂为乳化剂，大果木姜子油和大豆磷脂作为油相，Teen-80加入适量的水作为水相，将油相和水相在70℃的水浴温度下，用高速搅拌器制备成初乳，再经高压乳均机乳化后得到大果木姜子油口服乳剂。本文研究采用气相色谱法测定大果木姜子油口服乳剂中1，8-桉叶素的含量。

　　1 仪器与试药

　　1.1 仪器 GC-6890气相色谱仪（美国Angient公司）；HP-1（19091Z-433，30 m×0.25 mm×0.25 μm）弹性石英毛细管色谱柱；载气：高纯氮（N2）；检测器：氢火焰离子化检测器（FID）。

　　1.2 试药大果木姜子油口服乳剂(批号20060829，20060905，20060909)自制；1,8-桉叶素对照品（中国药品生物制品检定所，编号110788-9202）；无水硫酸钠，分析纯（重庆化学试剂有限公司）；无水乙醇，分析纯（成都金山化学试剂有限公司）；醋酸乙酯，分析纯（上海化学试剂有限公司）；环己烷，分析纯（天津市科密欧化学试剂开发中心）；硅胶G薄层板（青岛海洋化工分厂）。

　　2 方法与结果

　　2.1 大果木姜子油口服乳剂薄层鉴别精密吸取1,8-桉叶素对照品适量,置5 ml的容量瓶中，用无水乙醇定容，摇匀，配制成浓度为0.1 mg/ml，作为供对照品溶液。精密吸取本品1 ml于25 ml的烧杯中，加入无水硫酸钠0.7 g，轻轻摇匀，静置10 min后，用滤纸过滤，滤液置5 ml的容量瓶中，用无水乙醇定容，摇匀，作为供试品溶液。取本品空白乳1 ml于25 ml的烧杯中，与供试品溶液的配制方法相同，作为阴性品溶液。吸取对照品液、供试品溶液、阴性样品溶液约2 μl点于同一硅胶G薄层板（用前在105 ℃活化30 min以上［3］）展开槽中用醋酸乙酯-环己烷（1∶15）为展开剂进行展开，展开前饱和15 min，将展开后的硅胶G薄层板取出，待展开剂挥干后，喷以5%的香草醛硫酸溶液，在105 ℃的条件下烘至斑点清晰为止，可见在与对照品相对应的位置上有相同颜色的斑点，1,8-桉叶素的Rf约为0.45，阴性对照无干扰。结果见图1～4。

　　2.2 含量测定

　　2.2.1 对照品溶液的制备精密称取1,8-桉叶素对照品0.213 80 g置于10 ml容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，摇匀，即得。

　　2.2.2 供试品溶液的制备

　　精密吸取大果木姜子油口服乳剂1 ml于25 ml的烧杯中，加入5 ml的无水乙醇，加入无水硫酸钠0.7 g摇匀，置15 min，用滤纸过滤，滤液置10 ml的容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，摇匀再精密吸取2 ml于10 ml的容量瓶中，用无水乙醇定容，摇匀，即得。

　　2.2.3 测定方法分别吸取对照品溶掖与供试品溶液各2 μl，注入气相色谱仪，测定，即得。

　　2.2.4 色谱条件HP-1毛细管柱（19091Z-433，30 m×0.25 mm×0.25 μm）；程序升温从105 ℃ 以3 ℃/min升至110 ℃，再以2 ℃/min升至130 ℃，最后以12 ℃/min 升到150 ℃；进样口温度180 ℃；检测器温度200 ℃；氢火焰离子化检测器（FID）；载气为氮气（N2）；分流比30∶1，进样量2 μl。

　　2.2.5 线性关系的考察精密吸取1,8-桉叶素对照品浓度为4.2760 mg/ml的对照品溶液分别为0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0 ml于10 ml的容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，摇匀，得到一系列的浓度分别为0.213 8，0.427 6，0.641 4 ，0.855 2，1.069 0，1.282 8 mg/ml的对照品溶液。按“含量测定项”下色谱条件进行1,8-桉叶素的含量测定，以1,8-桉叶素的进样浓度对峰面积值进行线性回归得标准曲：Y=0.001 774X-0.016 89 ，r2=0.999 4。结果表明1,8-桉叶素在浓度为0.427 6 ～2.565 6 μg范围内，峰面积值与进样浓度呈良好的线性关系。结果见表1。表1 1,8-桉叶素浓度和峰面积值的关系（略）2.2.6 精密度实验精密吸取同一浓度的1,8-桉叶素对照品溶液，按照含量测定项下的色谱条件进行测定，注入气相色谱仪，记录1,8-桉叶素峰面积值，结果表明仪器精密度良好，RSD为1.17%。

　　2.2.7 重复性实验

　　按供试品溶液制备项下方法处理样品，按照含量测定项下的色谱条件测定1,8-桉叶素含量。结果表明本法重复性良好。RSD为2.45%。

　　2.2.8 稳定性实验

　　取重复性实验中任一样品，按照含量测定项下的色谱条件测定，分别在0，1，2，3，4，5 h测定并记录峰面积值，结果表明样品在5h内稳定性良好，RSD为2.56%。

　　2.2.9 回收率实验

　　精密吸取大果木姜子油口服乳剂适量，分别精密加入一定量1,8-桉叶素对照品，按供试品液制备项下方法处理后，按照含量测定项下的色谱条件测定，计算加样回收率，测定结果表明回收率较好，方法可行，平均回收率为99.93%（RSD为2.50%）。结果见表2。2.2.10 样品的含量测定 取3批大果木姜子油口服乳剂，按供试品溶液制备项的方法处理，同法测定1,8-桉叶素的含量。结果见表3。 表2 回收率实验结果（略）表3 样品含量测定结果（略）

　　根据以上样品测定结果，暂定本品每毫升含大果木姜子油以1,8-桉叶素计（C10H18O）,不得少17.0 mg。

　　3 讨论

本实验方法专属性和重复性好，可作为大果木姜子油口服乳剂的质量控制方法。

大果木姜子油口服乳剂是采用吐温-80 作为增溶剂制成，加入乙醇即可提取大果木姜子油。苗药大果木姜子油口服乳剂因大果木姜子油被包裹于内部的油相中，必须先使乳剂破乳，释放出大果木姜子油，才能进行提取。

破乳方法的研究将本品进行破乳后取得大果木姜子油相，再进行含量测定。本实验选择加酸、有机溶剂及电解质破坏乳剂方法，但加酸破乳方法不能满足准确迅速测得结果的要求，同时有可能破坏药物中的活性物质，而单独加有机试剂或电解质均不能满足大生产的需求，最后选择有机试剂及电解质共同破乳，能够在0.5 h内达到完全破乳，适应生产的要求。

本实验采用外标一点法测定苗药大果木姜子油口服乳剂中1.8-桉叶素的含量，而没有采用内标法，使得在处理样品时不需要配制内标液而显得更为简便、快速，可用于工业大生产的产品质量控制。

【参考文献】
　　［1］贵州省药品监督管理局.贵州省中药材、民族药材质量标准［M］.贵阳:贵州科技出版社,2003:37.

　　［2］邱德文,杜茂瑞.贵州苗药大果木姜子研究及产业化［J］.中国民族民间医药杂志,2003，12（1）:1.

　　［3］章育中，郭希圣.薄层层析法和薄层扫描法［M］.北京：中国医药科技出版社，1990：69.