摘要
摘要目的探讨地塞米松对大鼠肺缺血/再灌注损伤（LIRI）的保护作用及其作用机制。方法实验一：按随机数字表法将24只SD大鼠分成正常通气组（N组）、生理盐水组（NS组）、LIRI组和地塞米松+ LIRI组（DEX组），每组6只。用血管夹夹闭左肺肺门1 h、再灌注2 h建立大鼠LIRI模型；DEX组于再灌注前5 min经尾静脉给予地塞米松3 mg/kg，NS组注射等量生理盐水；N组不予任何处理。各组于再灌注后2 h处死大鼠取左肺组织，测定肺湿/干重比值（W/D），苏木素-伊红（HE）染色后光镜下观察肺组织病理学改变并评估损伤程度，电镜下观察肺组织超微结构改变；用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肺组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL-1β、IL-6）水平，用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）表达。实验二：应用磷脂酰肌醇3 -激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）通路抑制剂LY294002进行干预，以进一步探讨地塞米松减轻LIRI导致肺组织损伤的作用机制。另取24只大鼠，按随机数字表法分为N组、LIRI组、DEX组、地塞米松+ LY294002+LIRI组（LY组），每组6只。除LY组外，其他组均按实验一方法进行制模及干预，LY组于给予等量地塞米松后尾静脉注射LY294002 0.3 mg/kg。采用免疫组化法检测肺组织中M1型巨噬细胞极化标志物CD11c、CD16以及M2型巨噬细胞极化标志物CD206、Arg1的表达。结果①实验一：与N组比较，LIRI组肺组织形态学和超微结构发生明显改变，肺病理学评分、肺W/D比值及TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高，p-AKT表达明显下降。与LIRI组比较，DEX组肺组织形态学和超微结构改变明显改善，肺病理学评分降低（分：5.00±0.89比8.83±0.75），肺W/D比值及TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显下降〔肺W/D比值：6.25±0.56比8.27±0.72，TNF-α（ng/L）：93.28±16.42比205.90±25.30，IL-1β（ng/L）：130.10±10.81比209.10±19.20，IL-6（ng/L）：195.80±21.17比310.50±20.77〕，p-AKT表达明显升高〔p-AKT/AKT：（57.58±8.80）%比（36.62±9.25）%〕，差异均有统计学意义（均P<0.05）。而NS组各指标与N组比较差异均无统计学意义。②实验二：与N组比较，LIRI组巨噬细胞极化标志物CD11c、CD16、CD206、Arg1表达均明显升高。与LIRI组相比，DEX组CD11c、CD16表达明显降低，CD206、Arg1表达明显增加。而给予PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002干预后可明显阻断地塞米松对LIRI介导的巨噬细胞极化的影响〔CD11c免疫组化评分（分）：7.20±0.36比5.00±0.34，CD16免疫组化评分（分）：8.20±0.48比7.40±0.64，CD206免疫组化评分（分）：5.80±0.59比7.40±0.28，Arg1免疫组化评分（分）：7.20±0.72比8.80±0.48，均P<0.05〕。结论地塞米松预处理可减轻LIRI导致的大鼠肺内炎症反应和肺组织损伤，其作用机制与地塞米松激活PI3K/AKT通路进而改变肺巨噬细胞极化方向有关。
出版日期
2020年08月10日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
