简介:摘要布鲁氏菌病(Brucellosis)简称布病,又称地中海弛张热,马耳他热,波浪热或波状热,俗称“懒汉病”,是由布鲁氏菌(Brucella)引起的一种人畜共患传染病。布病在我国绝大多数省(市、区)都有不同程度的发生和流行,尤其以北方16个省(市、区)为重。病畜和带菌动物是主要传染源,并且布鲁氏菌能感染多种宿主,具有高度传染性1,其中羊种布鲁氏菌对人有高度的致病性。在我国,布鲁氏菌病流行广泛,尤其是以畜牧业生产为主的地区,人群分布以农民和牧民为主。近年来,实时荧光定量PCR方法是应用较为普遍的一种快速检测方法,并能在非常短的时间内提供结果。布鲁氏菌病的流行不仅造成巨大的经济损失,而且严重威胁人群的健康,研究布鲁氏菌病的病原学、流行病学及其实时荧光定量PCR的重要性日益突出,已经成为我国公共卫生迫切需要解决的一个问题。
简介:摘要转基因技术给全球的食品行业带来了巨大的经济效益,随着世界上各国不断对转基因技术和转基因农产品的开发利用,人们开始广泛关注食用转基因产品对人类健康的影响以及种植转基因农产品对生态环境的影响。各国政府和国际机构都十分重视对转基因作物及转基因食品进行综合评价,对转基因作物及转基因食品的综合评价需要一套科学合理的安全评价体系,也应该建立一套完善、严格的法律法规。本文分析了实时荧光定量PCR技术在转基因食品检测领域中的应用。
简介:摘要目的对荧光定量PCR检测肝病患者血清HBV-DNA的进行对比分析。方法选取2008年12月—2012年12月我院收治的肝病患者肝病患者126例,依据患者情况分为两组患者,甲组患者62例,患者为病毒性肝炎患者;乙组患者64例,为非病毒性肝炎患者,均采用荧光定量PCR检测肝病患者血清HBV-DNA。结果乙组患者的血清HBV-DNA含量显著低于乙组患者,差异性显著,具有统计学意义(P<0.05)。乙组患者HBeAg阳性率显著低于甲组患者,差异性显著,具有统计学意义(P<0.05)。结论采用荧光定量PCR检测肝病患者血清HBV-DNA,可更加明确的反应出人机体内病毒增加复制的情况,同时更加直接的反应患者所携带病毒量水平。
简介:摘要目的采用ELISA法和荧光RT-PCR法分别检测手足口病EV71,比较两种方法的差异性。方法严格按ELISA法和荧光RT-PCR法的操作要求分别检测221例临床标本手足口病EV71。结果两种方法检测EV71的结果221份标本,ELISA法阳性51例,荧光RT-PCR法阳性55例。两种方法比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验结果表明,两种方法的灵敏度分别为28.2%和30.4%,特异性均为100%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。
简介:摘要:随着生物技术的飞速发展,转基因食品的生产和消费逐渐成为一个备受争议的话题。因此,转基因食品的检测和监管变得尤为重要。实时荧光定量PCR技术是一种高效、敏感的分子生物学方法,已广泛应用于转基因食品检测中。本文将介绍实时荧光定量PCR技术的原理、方法和应用,探讨其在转基因食品检测领域的重要性,并讨论相关问题和挑战。实时荧光定量PCR技术为转基因食品检测提供了一种可靠的工具,对食品安全和消费者权益的保护起到了重要作用。
简介:摘要:目的 比较不同类型肝病患者应用荧光定量PCR法检查血清HBV-DNA的临床结果。方法 选取2020年4月~2021年8月我院收治的276例肝病患者作为研究对象,其中慢性乙型肝炎213例、乙肝后肝硬化37例、原发性肝癌26例;应用荧光定量PCR检测各组的HBV-DNA,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙肝病毒的血清免疫标志物HBeAg,比较检测结果。结果 肝硬化、原发性肝癌患者的PCR水平明显低于慢性乙型肝炎患者;HBeAg阳性组的HBV-DNA阳性率显著高于HBeAg阴性组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 荧光定量PCR检测肝病患者的血清HBV-DNA,能够直观反映出患者体内的病毒携带以及病毒复制情况,从而为临床评估病情提供依据,值得推广。
简介:【摘要】近年来,随着植物基因工程技术在农业生产行业中得到越来越广泛的应用,更多的带有改良育种特性基因的新型转基因育种品种也随之在世界范围内进行了广泛种植栽培,所以随之而来的就是转基因食品迅猛地发展,与转基因农业产品规模的商业化比较更引发了人们对农产品质量安全问题的忧虑。为了能确保转基因商品管理检测制度建设的进一步顺利推行,那么建立一个迅速、正确、高通量度的定量管理检验制度手段已十分必要。该文着重阐述了实时荧光定量PCR技术及在转基因食品定量检测过程中的运用,同时展望了建立质粒标准分子的技术来进行对较高转基因植物产品的定性检验。
简介:摘要:目的:探究乙肝病毒DNA检测中采用实时荧光PCR检验的价值分析。方法:选取2022年1月—2023年1月收治的100例乙肝病毒筛查患者为研究对象,其中,53例患者为乙肝病毒感染患者,为患者实施荧光定量PCR检测及酶联免疫吸附试验法检测,观察患者DNA检测结果、白细胞计数及酶联免疫吸附试验法检验结果。结果:研究证实,100例患者中,乙肝病毒DNA阳性患者有53例,患者阳性率53.00%,CT数值平均为(30.60±2.48),而阴性样本曲线水平无改变。乙肝病毒患者DNA白细胞计数为(6.49±2.45)×10 /L,阴性患者检出结果为(6.71±2.41)×10 /L,患者检验数值无差异(P>0.05)。而酶联免疫吸附试验法检验阳性率为50.00%,与乙肝病毒DNA检测结果相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:乙肝病毒DNA检测中采用实时荧光PCR检验效果较好,可以更为准确的检测阳性患者,且检测准确性要高于酶联免疫吸附试验法,极大程度上避免漏诊和误诊。
简介:摘要目的研究磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)荧光探针在肝细胞癌组织的成像情况及其与肝细胞癌患者预后的关系。方法回顾分析2019年1月至2020年8月在西南医科大学附属医院手术的87例肝细胞癌患者资料,其中男性75例,女性12例,年龄(56.1±11.9)岁。采用免疫组化以及荧光探针检测肝细胞癌组织GPC3的表达。分析两种检测的一致性。门诊复查随访患者肝切除术后复发情况。单因素和多因素Cox回归分析GPC3荧光强度与无复发生存的关系。结果GPC3荧光成像对肝细胞癌组织GPC3表达的检测与免疫组化结果基本一致(Kappa=0.84,P<0.001)。荧光成像GPC3阳性率为79.3%(69/87),免疫组化GPC3阳性率为80.4%(70/87),两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。依据肿瘤分化程度分为低分化组(n=30)和中高分化组(n=57)。低分化组荧光强度为[M(Q1,Q3)]134.4(128.0,144.7) a.u.,高于中高分化组[M(Q1,Q3)]84.8(0,108.5) a.u.,差异有统计学意义(Z=-7.52,P<0.001)。87例肝细胞癌患者癌组织荧光强度中位数为108.6 a.u.。多因素Cox回归分析,GPC3探针荧光强度≥108.6 a.u.(HR=2.07,95%CI:1.21~3.53,P=0.008)的肝细胞癌患者肝切除术后复发风险增加。结论GPC3特异性荧光探针与免疫组化检测肝细胞癌组织GPC3表达一致性好,GPC3探针荧光强度≥108.6 a.u.是肝细胞癌患者肝切除术后复发的危险因素。
简介:摘要目的探讨脂肪肉瘤中DDIT3荧光原位杂交(FISH)分离探针判读陷阱及其意义。方法收集DDIT3端粒侧信号簇状扩增的脂肪肿瘤18例,回顾其HE形态、免疫组织化学及临床病理资料,加做MDM2、CDK4扩增FISH检测,结合临床资料、形态学、免疫学、分子结果对其重新诊断。结果18例DDIT3端粒侧信号扩增的脂肪肿瘤均应诊断为高分化脂肪肉瘤或去分化脂肪肉瘤,其MDM2、CDK4基因扩增FISH结果均为阳性。对照说明书探针设计细节并辅以MDM2、CDK4基因扩增FISH实验论证,发现DDIT3分离双色探针位于DDIT3基因两侧,均不覆盖DDIT3基因本身,而DDIT3基因及CDK4基因都位于第12号染色体长臂,距离很近,DDIT3分离探针的端粒侧探针覆盖CDK4基因;因此,当DDIT3分离探针不出现红绿信号分离结果,而覆盖CDK4基因的端粒侧信号出现簇状扩增,不能提示DDIT3基因存在异常,无法支持黏液样脂肪肉瘤/圆细胞脂肪肉瘤的诊断,反而能提示CDK4基因存在扩增改变,因此可支持高分化脂肪肉瘤/去分化脂肪肉瘤的诊断。结论基于临床工作观察,发现脂肪肉瘤中DDIT3 FISH分离探针判读存在陷阱,可能对脂肪肉瘤诊断产生误导。
简介:【摘 要】目的:本次研究多通道荧光探针的滚环扩增技术应用在结核分枝杆菌耐药基因的检测中的应用。方法:通过多通道荧光探针(HEX/FAM/ROX)对滚环扩增产物精准捕获与信号放大,实现对三种突变基因的单管多重检测。结果:通过应用多通道荧光探针的滚环扩增技术,同一反应体系中中katG315的响应范围为1.5 pmol/L至0.1 5nmol/L, rpoB531和rpsL43的响应范围为1.5pmol/L至60.0 pmol/L和1.5 pmol/L至25.0 pmol/L,特异度与灵敏度较高,可精确识别单碱基突变;模拟血清样本回收实验中,回收率95.3%-105.5%。结论:多通道荧光探针的滚环扩增技术检测具有较高的特异性,耗时短,灵敏度高的优势,临床应用价值显著。
简介:摘要目的建立并评价一种基于COYOTE® Flash20实时荧光定量PCR仪用于新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸快速检测的方法。方法通过使用靶向SARS-CoV-2 ORF1ab和N基因的特异性引物探针组构建快速反应体系,并验证体系的灵敏度和特异性。同时,使用108例新型冠状病毒肺炎(COVID-19)临床样本对该方法进行应用评估。结果该检测方法无需核酸提取、手动操作时间仅用1 min,样本进、结果出,可以在30 min完成检测。该方法最低检测限为4×102拷贝/ml;与其他人类冠状病毒(包括HCoV-229E、HCoV-NL63、HCoV-OC43、HCoV-HKU1、SARS-CoV和MERS-CoV)以及其他引起呼吸系统疾病的病毒无交叉反应。临床样本应用评估显示,与常规需要核酸提取的RT-qPCR的总符合率为98.15%。结论通过对SARS-CoV-2快速荧光定量PCR方法的应用评价发现,该方法操作简便、快速、特异、灵敏,适用于多种场景即时快速检测需求。
简介:摘要:目的:对实时荧光定量PCR在痰标本中结核分枝杆菌检测中的应用价值进行分析。方法:本次实验对象为结核患者,实验时间集中在2018年9月-2020年9月,共计90例患者参与本次实验中来。本次实验分组依据为结核分枝杆菌检测手段,依据不同检测方法将所选患者分为甲组、乙组及丙组。甲组患者实施实时荧光定量PCR检测,乙组患者实施抗酸染色检测,丙组患者实施改良罗氏培养法检测,对三组患者检验结果进行分析及对比。结果:对本次实验进行系统的分析,甲组患者中共计16例患者检测结果为阳性,乙组患者中共计8例患者检测结果为阳性,丙组患者中共计10例患者检测结果为阳性,分别占总人数比重的53.33%、26.67%及33.33%,三组相关数据之间差异凸显,(p<0.05)。结论:相比抗酸染色检测及改良罗氏培养法检测,实时荧光定量PCR检测在痰标本中结核分枝杆菌检测中的应用效果更加突出,其能够在一定程度上提高检测结果的准确性,而且具有操作简单、等待时间较短等优势,为疾病预防控制中心工作人员开展工作提供了极大的便利。