简介：目的构建用于白念珠菌MXR1基因敲除的载体质粒,并通过Ura-Blaster策略敲除MXR1两条等位基因。方法分别扩增白念珠菌MXR1基因ORF两侧上下游的片段,通过酶切与连接反应,将上下游片段分别插入到p5921质粒的hisG-URA3-hisG盒两端,从而形成MXR1敲除载体质粒pUC-MXR1-URA3。通过Ura-Blaster策略将载体质粒转染到白念珠菌RM1000内,并采用PCR和Southern-blot杂交方法鉴定各步转染、复筛所得的阳性克隆。结果成功获得MXR1基因缺失的菌株。结论MXR1基因缺失菌株的构建,有助于深入研究白念珠菌耐药机制。

简介：目的构建可用于白念珠菌YPD1基因敲除的质粒。方法克隆白念珠菌YPD1基因,构建YPD1载体质粒;通过酶切反应,将p5921中标记基因URA3插入载体质粒的YPD1中,形成同源重组质粒。结果成功获得YPD1载体质粒pBluescript-YPD1和敲除质粒pBluescript-YPD1-URA3。结论所获得的质粒pBluescript-YPD1-URA3可用于白念珠菌YPD1基因的同源重组敲除。

简介：矮脆突变体dwf1（dwarfandfragile1）来源于EMS诱变处理的籼型恢复系缙恢10号,主要表现为根、茎、叶、叶鞘、子粒等器官特别脆,同时植株变矮、叶片披垂。株高、穗长、结实率、节间长以及千粒重有不同程度降低,细胞壁中纤维素和木质素含量下降、半纤维素含量增加,机械强度下降。茎秆表面锯齿状突起尖锐,薄壁细胞较野生型小、细胞大小不一致、排列紊乱,细胞形状不规则、长度稍有变短。该突变性状受一对隐性核基因控制,位于第9染色体上标记Ind6与Ind4之间,dwf1相对于野生型在LOC_Os09g25490第7外显子上有一个碱基的错义突变,导致氨基酸由半胱氨酸突变为精氨酸,该突变发生在基因的高度保守区域内。dwf1对深入研究水稻变矮变脆机制具有重要意义。

简介：为研究烟草黑胫病不同亲本来源的抗性遗传规律,定位抗性基因位点,本研究利用抗黑胫病品种Beinhart1000-1构建了220个F2分离群体。通过病圃接种鉴定和遗传分析,确定Beinhart1000-1对烟草黑胫病的抗性由多基因控制。利用筛选到的70对稳定SSR引物对烟草黑胫病抗性进行了QTL分析,绘制了一张包含14条染色体的遗传连锁图谱,且定位到5个与烟草黑胫病抗性紧密相关的QTLs,分别在2、3、3、6、12号染色体上,其贡献率分别为6.2%、6.0%、6.7%、5.6%和5.1%。此结果使烟草黑胫病抗性研究进一步深入,推进了烟草黑胫病分子标记辅助选择。

简介：目的探讨血浆（1—3）-β-D-葡聚糖对早期诊断深部真菌感染的临床价值。方法收集2009年3月-11月间在北京友谊医院感染科住院患者174例，根据侵袭性真菌感染诊断标准，将患者分为排除深部真菌组、确诊组、临床诊断组、拟诊组。应用MB-80微生物动态快速检测系统，检测各组患者血浆（1—3）-β—D-葡聚糖水平，分析比较深部真菌感染组和非深部真菌感染组血浆（1-3）-β-D-葡聚糖的水平。结果深部真菌感染组血清（1-3）-β-D-葡聚糖含量为（153．4±37．0）pg／mL，排除深部真菌感染组血清（1-3）-β—D-葡聚糖含量为（54．6±8．6）pg／mL，两组间有统计学差异（t=3．4，P〈0．01）；分析血浆（1-3）-β-D-葡聚糖诊断深部真菌感染，以20pg／mL为诊断阈值，其准确率、敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为70．1％、87．5％、61．9％、52．1％、91．2％。确诊病例、临床诊断病例、拟诊病例，3组间血清（1—3）-β-D-葡聚糖含量无统计学差异（P〉0．05）。结论深部真菌感染组的葡聚糖水平明显高于排除深部真菌感染组的葡聚糖水平，具有统计学意义。以20pg／mL为诊断阈值，其准确率、敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为70．1％、87．5％、61．9％、52．1％、91．2％，可作为深部真菌感染的最佳诊断阈值。

简介：耶氏肺孢子菌肺炎（Pneumocystisjirovecipneumonia，PJP，但习惯上仍简称PCP）常发生于未经高效抗反转录病毒药物治疗（highlyactiveantiretroviraldrugstherapy，HAART）的艾滋病（acquiredimmunodeficiencysyndrome，AIDS）患者及PCP一级预防（即CD4＋T淋巴细胞计数〈200×10^5/L的患者接受抗PCP的预防性化疗）广泛应用之前，

简介：根据转录组测序获得的钙依赖蛋白激酶基因的EST序列设计特异引物,利用RT-PCR和RACE技术从油菜中克隆获得BnCDPK1基因全长序列,NCBI登录号为KF740477,其cDNA和gDNA全长分别为2115bp和2857bp,含有11个内含子和12个外显子。生物信息学分析表明其开放阅读框为1581bp,编码527个氨基酸,具有CDPKs家族典型的特征,含有1个激酶区域和4个钙离子手型结构域,与拟南芥AtCDPK28同源性最高,属于第Ⅳ亚家族。BnCDPK1在油菜的根、茎、叶、花、种子中均有表达,但表达丰度存在差异,叶片中表达量最高,其次为茎、根和种子,花中的表达量最低;在高抗和高感油菜品种中,菌核菌胁迫均能够诱导BnCDPK1上调表达,但是高抗品种比高感品种反应更迅速,表达量更高。接种前、接种后12h、接种后24h,高抗品种的表达量相比高感品种分别提高1.4倍、4倍和3倍,推测其可能参与油菜的生长发育以及油菜对菌核菌侵染的应答和防御反应。

简介：目的：克隆并表达caspase-8／10相关RING结构域蛋白1（CARP1）基因，检测其泛素连接酶活性。方法：提取结肠癌HCT116细胞总RNA，RT-PCR扩增CARP1基因，将其克隆到真核表达载体pcDNA3-Flag中，序列正确的阳性克隆进行扩增，提取质粒转染至293T细胞中进行瞬时表达，通过体内泛素化检测其泛素化酶活性，通过萤光素酶报告基因的方法检测其对NF-kB转录活性的影响，利用细胞生长曲线检测CARP1基因对结肠癌细胞生长的影响。结果：免疫印迹实验表明CARP1基因在293T细胞中获得有效表达；免疫共沉淀实验表明，当CARP1存在时，受体相互作用蛋白1（RIP1）被泛素化；萤光素酶实验结果表明CARP1抑制肿瘤坏死因子a（TNFa）引起的NF-kB报道基因的激活；通过生长曲线发现CARP1能促进结肠癌细胞系HCT116生长，并能部分抵抗顺铂抑制细胞生长的作用。结论：构建的人CARP1基因真核表达载体在293T细胞中获得表达，表达产物具有RIP1泛素连接酶的活性，可抑制TNFa引起的NF-kB报告基因的激活，并且促进结肠癌细胞的生长，为进一步的基因功能研究奠定了基础。

简介：目的：探讨喀什地区维吾尔族和汉族丙肝患者的实验室检查特征,为临床诊断治疗提供依据。方法：对424例丙肝患者血清采用酶联免疫吸附法检测抗-HCV,荧光定量聚合酶链反应法检测丙肝RNA,采用电化学发光法检测FER、CA125、CA199,采用酶法检测GGT,ALT,AST。结果：维吾尔族丙肝患者HCVRNA的阳性率65.25%明显高于汉族患者54.26%,且维吾尔族丙肝患者血清FER（476.35±120.50）和GGT（71.22±21.84）水平均高于汉族患者FER（333.44±105.71）、GGT（55.63±15.16）,差异均有统计学意义（P〈0.05）。但两民族患者间抗-HCV阳性率、CA125、CA199、ALT、AST水平无统计学差异（P〉0.05）。结论：喀什地区维吾尔族和汉族丙肝患者不同,维吾尔族丙肝患者HCVRNA阳性率、FER、GGT水平均高于汉族患者,本研究提示维吾尔族丙肝患者可能肝细胞损害较重,更易发展为肝癌,临床应加以重视。

简介：【背景】豚草于20世纪80年代入侵广西省来宾市兴宾区，现已扩散至该区的部分乡（镇），2009年5月通过在广西来宾市高岭村释放广聚萤叶甲和豚草卷蛾防治豚草，3个月后释放点豚草的死亡率达98％以上。【方法】实地调查豚草卷蛾的扩散、建群情况和对当地作物的安全性。【结果】豚草卷蛾在来宾市已形成稳定种群。豚草卷蛾在对豚草的控制过程中，能在豚草生长区迅速定殖、建群，在定殖区豚草被完全控制或呈现零星分布后，该虫又会迅速向邻近成片生长的豚草区扩散、定殖。在调查中未发现豚草卷蛾对周边农作物产生为害。【结论与意义】豚草卷蛾对作物安全，可以在广西大范围释放。

简介：目的：获得抑制效果好的泛素C端水解酶LI（UCH—L1）基因小干扰RNA（siRNA）干扰载体。方法：根据Gen—Bank中大鼠UCH—L1基因序列设计并合成4对siRNA寡核苷酸序列，将4对寡榱苷酸序列退、k成双链后分别插入siRNA表达载体pcDNA6．2-GW／EmGFP—miR中构建4个siRNA表达质粒，测序鉴定后将4个siRNA表达磺牝分别转染HEK293细胞，利用Western印迹和qPCR方法检测干扰效果；将干扰效果最好的质粒包装成腺病毒，感染大汛血管平滑肌细胞（VSMC），并采用TNF-a干预诱导UCH—Ll表达升高，Western印迹验证干扰效果。结果：测序分析证实4对siRNA寡核苷酸序列分别插入siRNA表达载体pcDNA6．2-GW／EmGFP—miR；qPCR检测与Western印迹均表明第3号siRNA表达载沐对UCH—Ll表达的抑制程度最高，将其包装成腺病毒并转染VSMC能显著抑制TNFd湾导的U（：H—I。l表达升高。结论：构建并筛选出干扰效果好的UCH—LlsiRNA干扰载体。

简介：目的：研究地塞米松联合熊脱氧胆酸对妊娠期肝内胆汁淤积症患者血清血清磷脂转移蛋白（phospholipidtransferprotein，PLTP）、白介素-18（interleukin-18，IL-18）水平的影响。方法：选择2014年10月至2016年10月在我院进行治疗的妊娠期肝内胆汁淤积症患者130例，按照治疗方法不同分为观察组和对照组，观察组给予地塞米松联合熊脱氧胆酸治疗，对照组给予地塞米松治疗。比较两组的临床治疗效果、治疗前后肝功能指标、血清PurP、1L-18水平、瘙痒评分的变化及妊娠结局。结果：治疗后，观察组总有效率（93．8％）明显高于对照组（80．0％）（P〈O．05）；观察组血清PulP、IL-18水平均明显低于对照组（P〈O．05），且血清TBA、ALT、AST、TBIL水平、瘙痒评分、剖宫产率均明显的低于对照组（P〈0．05），早产率、胎儿窘迫率、新生儿窒息率均低于对照组，但差异无统计学意义（P〉0．05），Apgar评分明显高于对照组（P〈0．05）。结论：地塞米松联合熊脱氧胆酸治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的临床疗效显著优于单用地塞米松治疗，可有效改善患者肝功能和妊娠结局，并降低血清PLTP，IL-18水平。

简介：目的：比较连续股神经阻滞（CFNB）与静脉自控镇痛（PCIA）在全膝关节置换术中的应用效果及对患者凝血功能的影响。方法：选取2014年1月至2015年12月间我院行单侧全膝关节置换术的患者80例,按照随机数字表法分为CFNB组和PCIA组,每组各40例,两组患者分别接受CFNB和PCIA治疗。观察两组患者术后6h、12h、24h、48h视觉模拟疼痛评分（VAS）,两组患者分别于麻醉前（T1）、术毕（T2）、术后1d（T3）、术后2d（T4）进行血栓弹力图检查,观察两组凝血功能变化。并于术后随访1年,比较两组患者膝关节功能。结果：术后6h、12h、24h、48hCFNB组患者VAS评分显著低于PCIA组患者（P〈0.05）。T2、T3、T4时点CFNB组患者凝血反应时间（R）、血凝块形成时间（K）较T1升高,血凝块聚合形成速率（α角）、血凝块最大振幅（MA）较T1降低,PCIA组患者R、K较T1降低,α角、MA较T1升高,T2、T3、T4时点CFNB组患者R、K高于PCIA组患者,α角、MA低于PCIA组患者,差异均有统计学意义（P〈0.05）。两组患者术后均完成1年的随访,两组患者KSS评分、膝关节最大屈曲度、膝关节最大伸直度比较无统计学差异（P〉0.05）。结论：CFNB对于全膝关节置换术术后患者镇痛效果优于PCIA,有利于改善患者凝血功能,不影响术后患者膝关节功能的恢复。

简介：本文根据高校女生生理及心理特点,说明从需要,目标,语言,情感等几方面对学生加以激励,对学生体育学习可以起到事半功倍的作用。

简介：危急值通知服务管理在医院信息化建设的今天起到了越来越重要的作用,已经是LIS不可缺少的一个模块,在与HIS的集成度也是要求越来越高,依赖于现在的实验室管理系统自动判定结果和不断完善的网络建设,危急值通知服务也越来越快捷准确。

简介：：随着人们对天然、绿色、安全性化妆品的日益需求，天然香料在化妆品中也随之被广泛应用。天然香料主要分为植物性天然香料和动物性天然香料。本文主要介绍了天然香料的定义及其分类，天然香料在化妆品中的应用以及国内外可用于化妆品的天然香料工业发展等，并且根据天然香料在化妆品中应用存在的问题，提出几点建议。其中，在对天然香料的定义和分类中，除了明确天然香料的定义外，还根据其中含有的不同类型和功效的成分，分为天然香料中的芳香成分、药用成分、营养成分和其他成分。天然香料在化妆品中的应用，主要介绍目前市场上应用最广泛的动物类天然香料以及花类、叶类和果实类等植物性天然香料。此外，从三方面对天然香料在化妆品中的应用提出建议，主要为新资源综合利用及开发，改进技术并提高天然香料产量和质量，开发治疗性、保健性天然化妆品等。

简介：很早以前，人们就认识到，人体健康或生命之所以不能维持，往往不是机体所有器官受到损害，而是由于部分组织或个别生命重要器官丧失功能所致，因而产生了更换受损组织或器官的设想。为了实现用新的器官替换功能低下器官的愿望，19世纪的欧洲即已开始尝试器官移植的相关实验研究。然而，人源供体器官异常短缺，许多患者在等待器官的过程中死亡，这使人们将目光转向了异种移植，

简介：遗传标记经历了形态标记、细胞学标记、生化标记和分子标记等4个阶段,其中分子标记的发展最为迅猛和有效.本文比较了几种主要分子标记方法的特点,为更好地利用分子标记提供了理论依据,并对分子标记在林木遗传多样性研究、遗传育种、DNA指纹图谱的构建、亲缘关系鉴定及分类研究等方面的应用做了介绍.

简介：表面等离子共振（SurfacePlasmonResonance，SPR）技术是研究生物分子相互作用的强有力工具之一，该技术使生物分子之间相互作用的实时检测成为可能，并且灵敏度高、无需标记。通过分析传感图谱及分子相互作用的响应值获取分子相互作用的模式和动力学常数等方面的信息，并且获得的信息是能够定性和定量。SPR技术现在已广泛应用于生物、化学、免疫学研究及新药开发等领域。本文主要就SPR技术在免疫学研究中抗体活性检测、抗原表位预测等方面的应用进行了综述。

简介：随着新课程改革在全国的推行,各个学校以及各个学科的教师都在积极的进行着教学改革,努力的将自己对于新课改的理解实施到实际课堂教学,生物学科的教学也不例外。而在新课改实施中我们遇到了阻碍,经过我们的分析,这些阻碍来自于我们平时的课堂教学。我将对于存在的这些问题进行分析并提出一些对策与建议。