简介：目的：对传统酶联免疫吸附测定法（ELISA）进行优化改进，以提高其检测灵敏度，拓展应用范围。方法：通过在传统ELISA方法中引入原子转移自由基聚合反应（ATRP）和纳米金颗粒（GNPs），并将大量辣根过氧化物酶（HRP）与二抗结合，提高了HRP与抗原的结合比例，进而实现了对待检测物的信号放大。结果：优化后的ELISA方法在对β淀粉样蛋白的检测中，检测限（LOD）降低为原来的1／81。结论：改进后的ELISA方法性能稳定，灵敏度大幅提高，能够用于对痕量目标检测物的检测。

简介：目的：建立一种简便的对抗体相对亲和力进行定性比较的酶联免疫吸附测定（ELISA）方法,以便快速、简便地从大量抗体突变体中挑选高亲和力突变体。方法：将待测抗体倍比稀释后用直接ELISA方法进行定量,同时用相同浓度抗体作为一抗与抗原进行间接ELISA反应,以前者吸光度值为横轴、后者吸光度值为纵轴绘制散点图,通过拟和后的曲线判断抗体亲和力高低,并通过BIA-core法对该方法的准确性进行验证。结果：通过该方法获得的抗体亲和力高低情况与经测定抗体亲和力得出的结果一致。结论：该ELISA方法是一种简便可行、准确有效的抗体亲和力定性比较方法,可以应用于不同抗体的亲和力成熟比较研究。

简介：目的：建立检测人4型腺病毒拷贝数的荧光定量PCR方法。方法：提取本实验室构建的4型腺病毒全基因组质粒，以梯度稀释质粒为标准模板，选取人4型腺病毒六邻体区域基因设计一对特异性引物，进行SYBRGreenI荧光定量PCR扩增并制作标准曲线。结果：标准曲线为y=-4．284x＋53．468，由全基因组质粒所构建的标准曲线线性关系良好，扩增反应Ct值与拷贝数的对数呈线性关系（R2=0．999609），检出敏感度可达1×10^2拷贝/μL，且与其他几种腺病毒无交叉反应。用该方法检测4型腺病毒感染细胞2、12和24h后的病毒拷贝数，其病毒拷贝数随时间增加，与细胞病变（CPE）变化保持一致，且荧光定量PCR的测量结果稳定（变异系数〈6％）。结论：建立了检测人4型腺病毒基因拷贝数的荧光定量RT—PCR方法，该方法灵敏度高、特异性强。

简介：2005年以来，二代测序平台和测序技术越来越普及，被广泛用于新病毒和未知病原体的发现，从未经培养的复杂样本中筛查病毒类病原体需要更多的前期处理措施。我们围绕高通量测序所涉及到的测序样本预处理方法和扩增方法做简要总结：样品类型分为无菌样本和开放样本；病原体类型包括病毒、细菌、真菌等；背景核酸去除的常用方法包括物理分离、核酸酶消化和几种rRNA去除的方法；常用的微量样本非特异性扩增方法包括随机引物PCR、SISPA技术、锚定随机引物PCR、RCA技术、MDA技术和NASBA技术。

简介：目前，西班牙Navarra大学的研究人员BorjaSaezOchoa开发出了一种新的诊断多发性骨髓瘤（MM）的遗传方法，该方法可在早期阶段就检测到疾病。

简介：目的：利用基因芯片技术，以细菌16SrDNA和23SrDNA为靶序列筛选引物和探针，建立快速、准确的检测水产食品中肠道致病菌的方法。方法：将致病菌的16SrDNA和23SrDNA全序列进行软件比对，在可变区和恒定区分别设计特异性寡核苷酸探针和通用性引物，点样于玻片制成基因芯片。致病菌DNA经过通用引物扩增后与芯片上的探针杂交，然后通过扫描图像对结果进行判断。对基因芯片检测的灵敏度进行了评价，并对模拟污染样本进行了实际检测，以验证所建立的方法。结果：设计的4对通用引物在同一条件下能够扩增7种常见肠道致病菌。在均一的杂交条件下能够同时检测单核细胞增生利斯特菌、副溶血性弧菌、霍乱弧菌、金黄色葡萄球菌、弗氏志贺氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和肠出血性大肠杆菌O157∶H7；以鼠伤寒沙门氏菌为对象，本方法的检测灵敏度可达到10^-3cfu/mL，实际检测模拟污染的样本的正确率达到100%。结论：建立的基因芯片系统可以准确而稳定地实现对7种水产食品中常见致病菌的通用检测，为食源性感染的诊治与预防提供了有效的技术手段和方法依据。

简介：选择60Coγ射线5Gy照射后第7天的人胚肺成纤维细胞(HELF),采用聚阳离子脂质体LipofectAMINE介导的基因转染法将人TGFβ1正、反义基因表达载体pMAMneo-TGFβ1和pMAMneo-AntiTGFβ1转入HELF,转染细胞经G418抗性筛选出来.提取培养细胞的染色体DNA,用DNA斑点印迹分析表明,它们能与neo基因特异杂交.用neo基因特异的PCR引物能从转染细胞扩增出276bp的阳性片段,而未转染细胞则扩增阴性.