简介：为探究大豆应答非致病菌（Bipolarismaydis）胁迫的分子机制，将玉米小斑病菌接种于3周龄的大豆苗。取48hpi的大豆叶片以TCA／丙酮法提取蛋白质，利用蛋白质双向电泳技术分离蛋白，串联质谱（MS＋MS／MS）鉴定蛋白质再结合生物信息学技术进行蛋白质功能分析。结果显示：分离到大豆苗期叶片总蛋白点1300＋15个，其中，差异表达（2倍以上，P值〈0．05）的蛋白质点18个，除2个蛋白点未成功测序，其余16个差异蛋白点经GO分析可知，差异表达的蛋白质功能主要涉及光合作用、胁迫应激和非寄主抗性响应，如核酮糖1，5-二磷酸羧化酶、病程相关蛋白PR-10和细胞骨架结构相关蛋白profilin-2。同时，由测序结果推测：在非致病菌（玉米小斑病菌）的胁迫下，大豆通过降低光合作用相关蛋白和能量代谢相关蛋白的表达，来增强防御相关蛋白和非寄主抗性相关蛋白的表达。

简介：依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶（PFK）是糖酵解途径的关键酶。本研究首先构建带有种子特异性napin启动子和Nos终止子的植物表达载体2300-nap及带有组成型35S启动子和Nos终止子的植物表达载体2300-35S；然后用PCR法从甘蓝型油菜（BrassicanapusL．）中油119总基因组中扩增出依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶（PFK）基因片段，再以扩增出的PFK基因片段作模板设计引物扩增出一个相应的小片段。将两个PFK基因片段反向连接，插入到植物表达载体2300-nap的napin启动子和nos终止子之间，植物表达载体2300-35S的35S启动子和nos终止子之间，分别构建成可转录表达出发夹RNA（hairpinRNA，hpRNA）结构的种子特异型和组成型油菜RNA干扰载体，为今后油菜利用RNA干扰（RNAi）提高含油量的基因工程研究奠定了基础。