简介：目的利用逆病毒表达载体快速构建梯度过表达人MTA1稳转单克隆细胞系。方法利用噬菌斑原位杂交筛选人肺噬菌体文库，以阳性克隆为模板，RT-PCR获得人MTA1完整CDS序列。以逆病毒表达载体pMX为基础，经过多次酶切连接，构建逆病毒表达载体pMX—MTA1-flag—IRES—EGFP。将构建好的逆病毒载体系统，转染293-gag／pol细胞，包装出含该表达载体的逆病毒颗粒。以含病毒上清多次感染HCT116细胞，获得稳定转染MTA1的HCT116多克隆细胞系。将该多克隆细胞系按合适比例稀释后接种至10cm大皿，获得大量单克隆细胞系，以GFP为筛选标志，筛选不同荧光强度的单细胞克隆进行扩增并分析MTA1与GFP表达水平的线性关系。结果测序结果显示成功克隆出人MTA1表达序列。免疫荧光、WesternBlot结果证实成功构建出梯度过表达MTA1的稳转细胞系。相关性验证结果显示构建的非融合载体MTA1与GFP的表达呈明显的线性相关，相关系数r=0．932，P〈0．01。结论利用逆病毒表达系统，快速成功构建并筛选出MTA1与GFP非融合梯度过表达稳转单克隆细胞系，为MTA1基因功能研究提供了良好模型。该逆转录病毒平台可用于快速建立其他基因的稳转单克隆细胞系。

简介：本文简要综述腺病毒载体的研究现状，包括各型载体的构成、优势与缺陷，及其相应的优化策略，并指出在我国人群中腺病毒载体作为疫苗和基因治疗的工具所应采取的优化措施。

简介：2010’广州神经肿瘤学术论坛将于2010年12月24-27日在广州举行。本次论坛由中国抗癌协会神经肿瘤专业委员会主办,中山大学肿瘤防治中心承办。论坛将邀请欧美、日本、韩国及国内神经肿瘤领域的著名专家对神经肿瘤领域的热点问题和研究进展做专题报告：

简介：近年来，随着环境、饮食、生活方式等的改变，全球恶性肿瘤的发病率及死亡率正在逐步攀升。据最新文献报道，乳腺癌已成为全球女性发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。对乳腺癌的发生、发展机制以及乳腺癌的多线治疗模式的研究已经成为目前肿瘤研究的重点及热点。

简介：机体免疫有宿主保护和肿瘤促进双重作用免疫微环境对肿瘤的促进作用知之甚少。研究发现本文讨论免疫微环境可直接或间接地影响肿瘤的发生发展,其机制。其机制包括促进肿瘤血管生成、改变肿瘤的生物学特性、筛选适应微环境的肿瘤细胞存活或建立适宜的肿瘤微环境促进肿瘤进展,甚至可以调节肿瘤干细胞活性。基于免疫微环境在肿瘤发生发展中的重要作用,免疫治疗成为一种重要的抗肿瘤治疗手段,而探索免疫治疗和细胞毒药物或分子靶向药物联合的多模式治疗可能是未来肿瘤免疫治疗的方向。

简介：由中国医促会胃病专业委员会主办，上海市市北医院、上海市中西医结合学会、上海市医学会肿瘤靶分子学会联合承办，上海交通大学附属瑞金医院、同济大学附属上海市第十人民医院及上海市闸北区医学会协办的第四届全国消化系统中晚期恶性肿瘤治疗学术交流年会定于2008年10月22日至26日在美丽迷人的城市——上海隆重召开。

简介：早在1889年，Paget即提出肿瘤生长的“种子一土壤学说”：器官微环境（土壤）可影响特定肿瘤细胞（种子）的种植、侵袭、存活、生长。回顾近十几年的肿瘤学研究进展，不难发现：肿瘤的发生及转移并不仅仅和肿瘤细胞自身有关，肿瘤细胞的周边环境对肿瘤的生长也发挥了重要作用。肿瘤微环境包含多种成分，骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSCs）是其中重要的一群。

简介：目的：筛选卵巢癌实验诊断比较适合的肿瘤标志，进一步探究其临界值。方法将研究对象分为卵巢癌组、卵巢良性肿瘤组和健康体检组，采用电化学发光法检测CA153、CA724、CA125、人附睾蛋白4（humanepididymisprotein4，HE4）等项目的浓度，并以文献报道的方法计算卵巢恶性肿瘤风险模型（riskofovarianmalignancyalgorithm，ROMA）；以SPSS软件分析研究对象肿瘤标志的表达差异，并分析它们的诊断指数（灵敏度＋特异性）；根据受试者工作特征曲线（receiveroperatingcharacteristics，ROC），试确定各肿瘤标志的最佳临界值。结果三组的肿瘤标志表达水平存在显著差异（P＜0．05）；ROMA的诊断能力最佳（诊断指数1．94，灵敏度0．94、特异性1．00），其它依次是HE4（诊断指数1．86，灵敏度0．89、特异性0．97）、CA125（诊断指数1．75，灵敏度0．83、特异性0．91）；依据曲线下面积（areaunderthecurve，AUC），诊断卵巢癌能力大小的肿瘤标志（或项目）分别是：ROMA、HE4、CA125、CA153、CA724。结论诊断卵巢癌应优先考虑CA125、HE4和ROMA等项目，相应临界值可拟定为90．96U/ml、81．38pmol/l和37．22％。

简介：目的探讨炎症微环境下ARGl基因表达水平对人结直肠癌细胞增殖的影响n方法选取人结直肠癌细胞系HT29细胞和巨噬细胞M2型细胞，通过小干扰RNA转染HT29细胞沉默ARGl表达，通过慢病毒载体系统转染HT29细胞高表达ARGl基因n实验共分6组：HT29单纯培养组、HT29与M2细胞共培养组、共培养＋精氨酸酶抑制剂组、共培养＋L-精氨酸组、ARGl高表达HT29与M2细胞共培养组、ARGl沉默HT29与M2细胞共培养组n精氨酸酶活性实验检测各组细胞中ARGl活性，ELISA法检测各组培养液中IL-6含量，CCK8试剂盒检测各组HT29细胞增殖能力。结果与巨噬细胞M2型细胞共培养后HT29细胞中精氨酸酶活性明显高于单独培养组n外源性添加L-精氨酸或高表达ARGl基因后，HT29细胞精氨酸酶活性、IL-6分泌水平及细胞增殖水平均显著提高。外源性添加精氨酸酶抑制剂（Nor-NOHA）或转染siRNA沉默ARGl基因表达均能明显降低HT29精氨酸酶活性，IL-6分泌水平及细胞增殖水平均显著降低。结论炎症微环境下过表达代谢基因ARGl能够增强结直肠癌细胞HT29的增殖能力。

简介：中国抗癌协会神经肿瘤学专业委员会第二届学术会议暨神经系统肿瘤基础研究及临床诊治进展学习班(国家继教项目:2005-04-08-009)定于2005年11月11日-14日在天府之国的名城-成都举行。大会由中国抗癌协会神经肿瘤专业委员会主办,四川大学华西医院神经外科承办。内容涵盖神经外

简介：目的结直肠癌肝转移（colorectallivermetastases,CRLM）常见,半数患者在病程不同阶段会合并肝脏转移。外科手术切除仍然是让患者可能获得长期生存的唯一手段（5年生存率可达40%~67%）,但仅有20%~30%的患者获得切除机会。对于那些肝内多发转移并且联合化疗、门静脉栓塞（portalveinembolization,PVE）和局部消融等治疗方案仍难以单次手术切除的患者,可考虑两步肝切除（2-stagehepatectomy,TSH）。本研究组2000年首先提出了TSH的手术方式。经过10余年的发展,该手术联合围手术期化疗和PVE,患者5年生存率可达32%~64%。然而,仍有1/3准备行TSH治疗的患者最终未能完成二期手术。其主要原因是两次手术期间出现肿瘤进展。这类患者的5年生存率显著低于完成二期手术的患者。本研究目的在于确认导致两步肝切除失败的预测因素,以更好地筛选两叶存在广泛CRLM进行TSH干预的适应证。方法自2000年至2012年,接受手术的845例CRLM患者中,125例（14.8%）准备接受TSH治疗。分析所有可能导致TSH失败的危险因素,并建立预测模型。多数患者都先行化疗,每隔4个化疗周期以CT评估病情。术中常规超声检查以确定切缘,并评估肿瘤和肝脏血管关系。消融治疗仅在肿瘤较深无法切除时才联合使用。常规进行PVE以保证可安全进行二期肝切除术。一期手术后3周恢复化疗。若肿瘤无进展且预期残存的肝再生体积达到安全性肝切除范围,可二期切除PVE栓塞的肝叶。二期手术结束后继续接受化疗。结果44例（35.2%）患者未能接受二期手术,5年总体生存率显著低于完成TSH的患者（0%比44.2%;P〈0.0001）。通过多变量回归分析发现,癌胚抗原（arcinoembryonicantigen,CEA）〉30ng/mL（RR：2.73,P=0.03）;肿瘤大小〉40mm（RR：2.89,P=0.04）;化疗周期〉12次（RR：3.46,P=0.01）以及一线化疗进展（RR：6.56,P=0.01）是TSH失败的独立危�

简介：目的：探讨乳腺癌术中诊断前哨淋巴结（sentinellymphnode，SLN）转移的最佳病理学方法。方法：收集204例乳腺癌患者，并进行淋巴结定位，前哨淋巴结活检、术中病理诊断。102例（A法）患者的前哨淋巴结均二等分后再进行连续切片，另外102例（B法）患者的前哨淋巴结先切成1mm-1．5mm厚的薄片，置于冷冻托头上，用水溶胶包埋；再从各个组织切面进行印片细胞检查，然后进行连续切片检查。以前哨淋巴结转移的术后诊断作为金标准。结果：A组28（27％）例、B组42（40％）例检出前哨淋巴结转移（P=0．05）。前哨淋巴结转移灶平均大小：A组5．5mm、B组3．3mm（P〈0．05）。结论：B法能检出更多、更小的转移灶，并且需时少，花费人力少。而A法许多微小转移性不能检出。

简介：目前肝切除术仍是临床治疗肝癌首选的治疗方式。但肝切除术后仍有一定复发率。肿瘤微环境中巨噬细胞及其相关细胞因子能够影响肝癌细胞生物学行为，促进肝癌的侵袭和转移，引发肿瘤复发和影响患者预后。测定巨噬细胞及相关细胞因子水平对判断肝癌肝切除术后患者的预后具有重要价值，同时巨噬细胞及相关细胞因子也是肝癌治疗的潜在靶点。

简介：总结38例嗜铬细胞瘤患者优化手术前后护理方法的效果。通过安排专人实施一对一护理,采用优化手术前后护理方法,能明显缩短患者术前准备时间及术后血压波动时间,有效维持血压平稳,减少术后并发症的发生,促进疾病康复。

简介：目的优化建立一种敏感、简便、稳定地检测结肠癌患者K-Ras基因突变的方法。方法构建K-Ras基因第二外显子12、13密码子的野生型及突变型质粒,通过优化PCR及肽核酸与特异性引物的浓度关系,达到有效模板浓度低的样品K-Ras基因突变的检测。结果成功构建K-Ras基因第二外显子12、13密码子的野生型和突变型质粒。肽核酸钳制PCR条件优化包括：（1）最佳复性温度为58℃和60℃;（2）有效模板浓度为10^-6pg/μl;（3）引物浓度与肽核酸浓度的最佳比例为20∶1。在K-Ras突变型质粒与野生型质粒浓度比为1∶100时即可检测到突变。结论肽核酸钳制PCR技术较传统的测序方法更为敏感,可以应用于有效模板浓度低的样品,为结肠癌个体化治疗前相关基因检测的有效方法。

简介：目的:研究心肌细胞条件培养液(cardiomyocyteconditionedmedium,CMCM)对K562细胞及NCI-H2452细胞增殖的影响,探索CMCM抑癌作用是否有肿瘤特异性,并探究其理化性质。方法:原代培养Wistar乳大鼠心肌细胞,以顺铂(DDP)作为阳性对照,CCK8法分析CMCM对K562细胞及人间皮瘤细胞NCI-H2452以及正常肝细胞HL7702体外增殖的影响。随后将CMCM采取不同比例稀释,探究稀释浓度与抑瘤作用间的关系。将CMCM采用胰酶消化,予以不同温度处理,以探究CMCM的理化性质。结果:K562细胞及NCI-H2452细胞分别与CMCM共同培养后,细胞存活率明显下降,与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05),而对正常细胞存活率无明显影响(P>0.05)。经胰酶消化及热处理后的CMCM活性仍然存在,CMCM对K562细胞的抑制作用具有时间及浓度依赖性。结论:CMCM可抑制K562细胞及NCI-H2452细胞的增殖,CMCM不能被蛋白酶所破坏,对热也稳定,抑制作用具有时间及浓度依赖性。

简介：目的探讨加速康复外科模式下初次单次全髋关节置换术（totalhiparthroplasty,THA）术中优化鸡尾酒疗法（罗哌卡因配伍氨甲环酸切口周围局部注射）的安全性和有效性。方法前瞻性纳入行加速康复外科模式下初次单次THA患者80例,根据术中鸡尾酒疗法方案,以数字表法随机分为试验组（40例,缝皮前切口周围局部浸润注射罗哌卡因200mg＋氨甲环酸80ml混合溶液100ml）和对照组（40例,缝皮前切口周围局部浸润注射罗哌卡因200mg＋生理盐水80ml混合溶液100ml）。主要指标为最大血红蛋白下降值、总失血量、输血率、视觉模拟疼痛评分（visualanaloguescale,VAS）;次要指标为补救镇痛率、术后并发症发生率、术后住院日及术后2周血栓发生事件。结果最大血红蛋白下降值：试验组（24.3±9.9）g/L,对照组（24.1±10.9）g/L,差异无统计学意义（P〉0.05）。总失血量：试验组（737.4±399.0）ml,对照组（730.1±401.3）ml,差异无统计学意义（P〉0.05）。术侧髋关节活动时VAS疼痛评分：术前、术后当天、术后第1、2天,试验组分别为（4.5±0.7）分、（1.7±0.5）分、（1.6±0.6）分、（1.2±0.4）分;对照组分别为（4.5±0.7）分、（1.5±0.5）分、（1.6±0.6）分、（1.1±0.4）分,差异无统计学意义（P〉0.05）。术后补救镇痛率：试验组为12.5%,对照组为7.5%,差异无统计学意义（P〉0.05）。术后并发症发生率：试验组为10.0%,对照组为17.5%,差异无统计学意义（P〉0.05）。术后住院日：试验组为（2.5±0.6）天,对照组为（2.4±0.7）天,差异无统计学意义（P〉0.05）。两组均无1例输血,术后2周彩超检查无1例下肢深静脉血栓发生。结论加速康复外科模式下初次单侧THA术后失血少、疼痛轻、康复快,术中优化鸡尾酒疗法虽然是安全的,但其有效性尚需进一步研究证实。